毛囊復(fù)合組織移植結(jié)合超脈沖CO2激光治療兔耳增生性瘢痕的實驗研究.pdf

1、目的：
　　采用環(huán)鉆及超脈沖CO2激光在增生性瘢痕表面打孔后移植自體毛囊復(fù)合組織，觀察新生毛干形成的時間及瘢痕形態(tài)學(xué)的變化，分析比較CK-15及a-SMA在不同移植方式下的表達(dá)情況，探討毛囊復(fù)合組織促進(jìn)增生性瘢痕轉(zhuǎn)歸的可能機制。
　　方法：
　　選取新西蘭大白兔20只，隨機分到4個組：A:正常皮膚組、B:瘢痕對照組、C:環(huán)鉆打孔毛囊復(fù)合組織移植組、D：超脈沖CO2激光打孔毛囊復(fù)合組織移植組。將隨機納入B、C、D三組的1

2、5只新西蘭大白兔建立兔耳增生性瘢痕模型。C、D兩組增生性瘢痕表面分別用環(huán)鉆及超脈沖CO2激光打孔后行自體毛囊復(fù)合組織移植。記錄每個瘢痕創(chuàng)面愈合所需時間及新生毛干形成時間，收集C、D兩組新生毛干形成后第1天、3天、7天、14天的瘢痕組織標(biāo)本做病理組織切片，行HE染色鏡下觀察，并采用免疫組化方法檢測毛囊干細(xì)胞標(biāo)志物角蛋白-15（CK-15）、毛囊真皮鞘細(xì)胞標(biāo)志物a-平滑肌肌動蛋白（a-SMA）的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：
　　1.C

3、、D兩組行復(fù)合毛囊組織移植后新生毛干形成時間的觀察：環(huán)鉆打孔組新生毛干形成時間為（24.75±1.97）天；超脈沖CO2激光打孔組新生毛干形成時間為（23.30±1.87）天；C、D兩組新生毛干形成時間對比具有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.02＜0.05）。
　　2.HE染色病理組織學(xué)觀察：
　　A組：正常皮膚組織表皮真皮連接緊密，基底層、顆粒層、棘細(xì)胞層及角質(zhì)層明顯，可見毛囊、皮脂腺、汗腺等皮膚附屬器，真皮內(nèi)腺體豐富。膠原呈鮮紅色，

4、排列疏松，形態(tài)規(guī)則。
　　B組：增生性瘢痕組織內(nèi)仍可見表皮樣結(jié)構(gòu)、基底層細(xì)胞數(shù)量較少，亦存在有少量皮膚附屬器。大量成纖維細(xì)胞、炎性細(xì)胞浸潤。膠原纖維排列致密，呈漩渦狀，不規(guī)整，血管管腔擠壓變形。
　　C組：增生性瘢痕組織內(nèi)可見簇?fù)沓蓤F狀毛囊組織及皮脂腺、汗腺，毛囊周圍新生血管聚集，血管管徑形狀規(guī)則，膠原纖維束較瘢痕組排列疏松規(guī)整，真皮組織層厚度增加，越靠近毛囊基底部膠原排列越疏松。D組：增生性瘢痕組織內(nèi)毛囊組織排列規(guī)則，瘢痕

5、表皮、真皮連接緊密，表皮真皮連接區(qū)可見皮釘生成，毛囊間結(jié)締組織及新生血管豐富，血管管徑較細(xì)，皮脂腺及汗腺清晰可見開口于皮膚表面，真皮膠原束疏松、增粗、變寬，平行于表面，其間分布相同走向的細(xì)長纖維細(xì)胞，類似于正常真皮組織中的膠原纖維所見。
　　3.免疫組化染色觀察：通過運用環(huán)鉆及超脈沖CO2激光打孔毛囊復(fù)合組織移植新生毛干形成后第1天即可見CK-15及a-SMA陽性細(xì)胞的表達(dá)，CK-15陽性細(xì)胞散在分布于毛囊周圍及表皮基底部，a-S

6、MA陽性細(xì)胞的表達(dá)位置固定且分布于毛囊外層真皮組織。環(huán)鉆打孔（C組）CK-15陽性細(xì)胞表達(dá)率在第1天、3天、7天、14天分別為21％、32%、58%、42%；超脈沖CO2激光打孔（D組）CK-15陽性表達(dá)率分別為31%、57%、78%、60%。D組強陽性細(xì)胞表達(dá)率高于C組；環(huán)鉆打孔（C組）a-SMA強陽性細(xì)胞表達(dá)率在第1天、3天、7天、14天分別為21%、34%、52%、44%；超脈沖CO2激光打孔組（D組）a-SMA強陽性細(xì)胞表達(dá)率分