PPAR-γ在尿酸刺激的人近端腎小管上皮細(xì)胞中的表達(dá)及匹格列酮對(duì)NALP3炎癥小體和IL-1β表達(dá)的影響.pdf

1、背景:PPAR-γ是核受體超家族成員，參與多種因素所致炎癥反應(yīng)的調(diào)控。我們?cè)谇捌谘芯恐邪l(fā)現(xiàn)，尿酸刺激人近端腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)可引起細(xì)胞內(nèi)炎癥小體NALP3以及細(xì)胞因子IL-1β表達(dá)增加。
　　目的:觀察尿酸刺激是否能夠影響HK-2的PPAR-γ的表達(dá)及匹格列酮能否調(diào)節(jié)NALP3表達(dá)以及細(xì)胞因子IL-1β的分泌。
　　方法:將體外培養(yǎng)人近端腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)分為7組:①空白對(duì)照組(CON):不添加刺激因素，僅加

2、入等體積的培養(yǎng)液;②可溶性尿酸組:在培養(yǎng)液中加入可溶性尿酸(SUA200μg/ml);③晶體實(shí)驗(yàn)組:單鈉尿酸鹽結(jié)晶組（MSU200μg/ml）;④堿性磷酸鈣對(duì)照組:堿性磷酸鈣組(BCP200μg/ml);⑤LPS陽性對(duì)照組(LPS100μg/ml);⑥匹格列酮5umol/l+SUA200μg/ml;⑦匹格列酮5umol/l+ MSU200μg/ml。分別于0h、4h、24h后RT-PCR法檢測(cè)PPAR-γmRNA表達(dá)水平，0h、24h、

3、48h后Western Blot方法檢測(cè)PPAR-γ蛋白表達(dá)情況。48h后Western Blot方法檢測(cè)NALP3蛋白表達(dá)情況，Elisa方法檢測(cè)IL-1β蛋白表達(dá)情況。
　　結(jié)果:①PPAR-γmRNA表達(dá):與正常對(duì)照組相比，0h及24h尿酸(SUA、MSU)刺激組PPAR-γmRNA水平無顯著差異，4h尿酸(SUA、MSU)刺激組PPAR-γmRNA表達(dá)顯著高于空白對(duì)照組(p＜0.05)。單從尿酸組(SUA、MSU)來看，4

4、hPPAR-γmRNA明顯高于0h，24h表達(dá)明顯低于4h，但24h表達(dá)水平與0h相比無明顯差異，即尿酸刺激HK-2細(xì)胞引起PPAR-γmRNA表達(dá)水平先快速增加后呈下降趨勢(shì)。②PPAR-γ蛋白表達(dá):0h、48h尿酸刺激組較對(duì)照組PPAR-γ蛋白表達(dá)無差異，24h尿酸(SUA、MSU)刺激組較對(duì)照組而言，PPAR-γ蛋白表達(dá)顯著增加(p＜0.05)。單從尿酸組(SUA、MSU)來看，24hPPAR-γ蛋白明顯高于0h，48h表達(dá)明顯低于

5、24h，但48h表達(dá)水平與0h相比無明顯差異。即尿酸刺激HK-2細(xì)胞引起PPAR-γ蛋白表達(dá)水平先快速增加后下降趨勢(shì)。③相對(duì)于尿酸刺激組，加入匹格列酮后，PPAR-γmRNA及蛋白表達(dá)無明顯變化。④與對(duì)照組相比，尿酸(SUA、MSU)能顯著增加NALP3和IL-1β蛋白的表達(dá)(p＜0.05);⑤相對(duì)于尿酸組而言，加入匹格列酮后使NALP3、IL-1β蛋白表達(dá)下降(p＜0.05)，提示匹格列酮可以減少尿酸刺激HK-2細(xì)胞所致的NALP3和