HPV58型病毒E1^E4蛋白B細胞線性表位研究.pdf

1、宮頸癌是世界上第三常見的影響女性健康的癌癥，而高危型HPV是感染是宮頸癌的病因，其中以HPV16型檢出率最高，危害性也最大。HPV58型作為15種高危型HPV的一種，雖然在世界范圍內的感染率比HPV16和HPV18低，卻存在較大的地區(qū)分布的差異，特別是在我國東部和南部部分地區(qū)及其他亞洲東部地區(qū)有著很高的感染率和致死率。
　　E1^E4是HPV一個早期非結構蛋白，它的表達關系到病毒的復制和侵襲，但其具體功能還未被人們完全了解，HPV

2、58型E1^E4蛋白的相關研究報道更是缺乏，準確獲得其全部表位信息對宮頸癌診斷、疫苗和抗體藥物的研發(fā)具有參考作用。
　　我們首先從生物信息學的角度對E1^E4蛋白進行了分析，E1^E4是一個親水性蛋白，內部有幾個親水性較高的區(qū)域，在溶液中不穩(wěn)定。利用現(xiàn)有的B細胞表位預測算法（親水性算法、可及性算法、可塑性算法、二級結構預測算法）和軟件(ABCpred、BepiPred)對HPV58型E1^E4蛋臼B細胞線性表位進行預測，在對不同算

3、法預測的B細胞線性表位結果進行整合時，我們發(fā)現(xiàn)這些結果有一定的一致性，分析出了該蛋白可能的B細胞線性表位所在區(qū)域，從整體上對HPV58型E1^E4蛋白B細胞表位有了大致認識。
　　我們對HPV58型E1^E4蛋白進行了原核表達、純化，并免疫三只雄性新西蘭白兔，獲得了其抗血清。隨后，我們采用了改良的生物合成肽法，使用pXXGST-1短肽表達載體合成了13條覆蓋整個HPV58 E1^E4蛋白并相互重疊9個氨基酸的15肽，利用制備的E1