miR-574-5p、Gomafu和QKI對人宮頸癌細(xì)胞生長、轉(zhuǎn)移的影響及相關(guān)護(hù)理干預(yù)研究.pdf

1、研究背景:
　　宮頸癌的發(fā)病率位居女性腫瘤第二位,對其發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制和護(hù)理干預(yù)研究意義重大。miR-574-5p、QKI以及 Gomafu在宮頸癌細(xì)胞中的表達(dá)及它們在宮頸癌中的作用與機(jī)制還不清楚。在本項研究中,我們比較系統(tǒng)地研究了致癌微小 RNA miR-574-5p、抑癌蛋白QKI以及長非編碼RNA Gomafu在宮頸癌細(xì)胞中的表達(dá)以及它們之間可能存在的聯(lián)系。為探討護(hù)理干預(yù)是否能誘導(dǎo)miRNAs的快速應(yīng)激,本課題還研究了UV

2、照射、缺氧、溫度等部分護(hù)理干預(yù)對HeLa細(xì)胞miR-574-5p表達(dá)的影響,以及上述護(hù)理干預(yù)對細(xì)胞周期、存活以及克隆形成能力及遷移等方面的影響。
　　研究意義:
　　本研究希望揭示miR-574-5p、Gomafu以及QKI之間可能的聯(lián)系及它們在人宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的作用與機(jī)制。以期通過揭示基因調(diào)控的作用,獲得部分常見臨床護(hù)理干預(yù)手段能影響miRNAs的實證,為宮頸癌預(yù)治和護(hù)理手段的制定及繼續(xù)研究提供借鑒和思路。
　　研

3、究方法:
　　Real-time RT-PCR、Western Blot、細(xì)胞劃痕實驗、細(xì)胞克隆能力檢測、Transwell細(xì)胞轉(zhuǎn)移和侵襲實驗、流式細(xì)胞測試、活體成瘤實驗。
　　研究內(nèi)容:
　　1)在臨床宮頸癌組織樣本中研究miR-574-5p、QKI基因及Gomafu表達(dá)情況;
　　2)通過過表達(dá)或siRNA介導(dǎo)的敲降,研究miR-574-5p、QKI基因及Gomafu三者間可能的相互作用及這些基因?qū)?xì)胞增殖、

4、轉(zhuǎn)移、侵襲能力的影響;
　　3)利用裸鼠移植瘤實驗探討抑制miR-574-5p對宮頸癌腫瘤生長的影響;
　　4)研究一些常見護(hù)理干預(yù)手段可能對HeLa細(xì)胞miR-574-5p表達(dá),克隆形成、轉(zhuǎn)移能力等方面的影響。
　　研究結(jié)果:
　　1)宮頸癌組織中miR-574-5p表達(dá)較癌旁組織顯著升高,相反,Gomafu、總QKI(pan-QKI)和QKI-5 mRNA和蛋白表達(dá)均下降。且miR-574-5p與QKI變化呈

5、負(fù)相關(guān)。
　　2)過表達(dá)miR-574-5p后pan-QKI、QKI-5 mRNA表達(dá)下降,Gomafu表達(dá)上升, HeLa細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移、克隆能力上升;抑制miR-574-5p后pan-QKI、QKI-5 mRNA表達(dá)上升,Gomafu表達(dá)明顯降低。
　　3)抑制miR-574-5p后,HeLa細(xì)胞克隆形成能力、遷移和侵襲能力顯著下降,人宮頸癌HeLa細(xì)胞的活體成瘤能力受到極顯著抑制。
　　4)部分臨床常見的護(hù)理手段

6、能對miR-574-5p的表達(dá),HeLa細(xì)胞繁殖和轉(zhuǎn)移、甚至細(xì)胞周期產(chǎn)生一定影響。如UV照射能顯著降低HeLa細(xì)胞miR-574-5p的表達(dá),并明顯抑制細(xì)胞遷移;重度缺氧明顯降低 HeLa細(xì)胞的存活率,導(dǎo)致其程序性死亡比例顯著上升,以及G1期細(xì)胞比例下降、G2/M期細(xì)胞比例升高。不同孵育溫度也能影響miR-574-5p的表達(dá)和細(xì)胞的增殖能力。
　　結(jié)論:
　　宮頸癌細(xì)胞或組織中的miR-574-5p、Gomafu以及QKI的