探討膽管癌上皮間質轉化過程中Wnt-β-catenin通路與TGFβ1-Smad信號轉導通路之間的關系.pdf

1、目的：通過檢測Wnt2b抑制后膽管癌細胞上皮間質轉化過程中TGFβ1-Smad信號途徑相關因子的變化，對膽管癌細胞上皮間質轉化過程中Wnt/β-catenin信號通路與TGFβ1-Smad信號通路之間的軸連關系進行初步探討。
　　方法：分別用設計出的3種（pLVT1402、pLVT1403及pLVT1404）Wnt2b-siRNA慢病毒載體、3種（pLVT1399、pLVT1400及pLVT1401）β-catenin-siRNA

2、慢病毒載體以及空白慢病毒載體轉染人膽管癌細胞RBE細胞系，RT-PCR法檢測Wnt2b和β-catenin表達，篩選出Wnt2b表達水平最低的Wnt2b-siRNA-RBE細胞組、β-catenin表達水平最低的β-catenin-siRNA-RBE細胞組，并以空白慢病毒載體轉染的RBE細胞作為陰性對照組。分別用RT-PCR和Western Blot法測定各組中E-cadherin、Vimentin、TGFβ1、smad4、snail及

3、slug的表達。
　　結果：與陰性對照組、pLVT1403組及pLVT1404組相比，pLVT1402組RBE細胞中Wnt2b的表達水平最低（P＜0.05）；與陰性對照組、pLVT1400組及pLVT1401組相比，pLVT1399組RBE細胞中β-catenin的表達水平最低（P＜0.05）；與陰性對照組相比，篩選出的Wnt2b-siRNA-RBE細胞組、β-catenin-siRNA-RBE細胞組中，E-cadherin表達上

4、升而Vimentin表達下降（P＜0.05）。Wnt2b-siRNA-RBE細胞組與β-catenin-siRNA-RBE細胞組及陰性對照組相比，TGFβ1、smad4、snail及slug的表達下降（P＜0.05），而β-catenin-siRNA-RBE細胞組與陰性對照組之間比較上述四種因子的表達水平無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。
　　結論：抑制RBE細胞中Wnt2b或β-catenin的表達后，細胞中E-cadherin表達