組蛋白H3乙?;閷?dǎo)TGFβ2上調(diào)H9C2細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
   探討轉(zhuǎn)化生長因子β2(transforming growth factor beta2,TGFβ2)對大鼠胚胎心肌細(xì)胞H9C2心臟發(fā)育相關(guān)核心轉(zhuǎn)錄因子Mef2c和GATA4表達(dá)的影響及其與組蛋白H3乙酰化的關(guān)系。
   材料與方法:
   比較TGFβ2對細(xì)胞生長的影響。利用Real-time PCR檢測心肌細(xì)胞的心臟發(fā)育相關(guān)核心轉(zhuǎn)錄因子Mef2c和GATA4 mRNA的相對表達(dá)量,篩選合適的TGF

2、-β2干預(yù)濃度。采用Western blot檢測H9C2細(xì)胞組蛋白H3乙?;揭阴;疕3(acetylated histone H3,acH3)的差異。染色質(zhì)免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,CHIP) Real-timePCR檢測Mef2c和GATA4啟動子區(qū)與acH3結(jié)合DNA的相對表達(dá)水平。比色分析法檢測TGF-β2對心肌細(xì)胞的總體組蛋白乙酰化酶(histoneacetyltransfera

3、se,HATs)活性的影響。
   結(jié)果:
   ①TGF-β2干預(yù)組相對于對照組心肌細(xì)胞的增殖能力增強(qiáng)(P<0.05)。②心肌細(xì)胞的心臟相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Mef2c和GATA4 mRNA的相對表達(dá)量隨著TGF-β2濃度的升高呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢,在5μg/L的濃度時均達(dá)到最高,Mef2c mRNA相對表達(dá)量是對照組的1.8倍,GATA4 mRNA是對照組的2.3倍(P<0.05)。③TGF-β2干預(yù)72h后acH3水平是對

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