兔SSS后1-3及橋靜脈結扎后竇旁病理、生化和神經(jīng)功能的長時程觀察.pdf

1、第一部分兔急性靜脈性腦梗死動物模型的建立 目的：建立一個穩(wěn)定的靜脈性腦梗死的動物模型。 方法：家兔35只，隨機分為3組(A組，單純上矢狀竇后1／3段結扎組15只；B組，上矢狀竇后1／3段+橋靜脈結扎組15只；C組，假手術組5只、)，共觀察48h，在術后8h、24h、48h分別測定腦水含量，TTC染色測梗死范圍并和大體標本、光鏡及電鏡行對照研究。 結果：A組術后8h和B組術后8h、24h、48h腦組織水腫明顯。與A

2、組比較，B組結扎后腦梗死范圍明顯增加。且B組術后24h、48h竇旁皮層病變區(qū)被伊文思藍不同程度藍染。顯微病理學上，B組15只兔24h、48h均可見病理證實的不同程度的靜脈性腦梗死，而A組中僅5只兔出現(xiàn)了靜脈性腦梗死。假手術組4只均未見上述各種異常表現(xiàn)。 結論：上矢狀竇后1／3段+橋靜脈結扎制備靜脈性腦梗死動物模型的方法是可行的。 第二部分 兔SSS后1／3及橋靜脈結扎后竇旁病理、生化和神經(jīng)功能的長時程觀察 目的：

3、認識SSS后1／3及橋靜脈閉塞后腦組織病理、生化和神經(jīng)功能動態(tài)變化的全過程，探討其腦損傷的病理生理機制，確定神經(jīng)保護治療的方法和時間窗。 方法：家兔60只，隨機分為實驗組和對照組，實驗組進一步分為顱內壓組和結扎后8小時、24小時、48小時、72小時、1周、2周、1月、2月8個不同時間的亞組。采用外科手術的方法,在手術顯微鏡下結扎兔SSS后1/3及橋靜脈,對受損腦組織的病理狀態(tài),尤其是血管內皮細胞及凋亡神經(jīng)元超微結構的改變、顱內壓

4、、腦組織含水量、SOD和MDA含量、NOS活性及動物神經(jīng)功能缺損分級變化進行了長達2個月綜合觀察。結果:實驗過程中有7只兔死亡,動物尸檢病理示腦水腫明顯,并可見竇旁不同程度梗死;家兔神經(jīng)功能缺損分級變化在結扎后8小時～1周顯著變差,2周時神經(jīng)功能有改善,1月和2月功能顯著改善;ICP在結扎后4小時開始升高,8小時顯著升高,至72小時時達到最高峰,此后逐漸下降并維持1周左右;竇旁腦組織中的SOD活性在8小時無顯著改變,在24小時和48小時

5、開始下降,并在72小時～1周時下降到最低,此后逐漸升高。而顳葉腦組織的SOD活性僅于48小時～2周有下降,在同一時間點竇旁腦組織中SOD的活性較顳葉為低;而竇旁MDA含量于8小時就有顯著升高,并一直維持在較高水平至結扎后1月,顳葉MDA含量僅結扎后72小時和1周有升高;竇旁NOS活性于48小時開始升高,72小時達到高峰,并維持一周左右,2周NOS活性下降至基線水平,1月及2月NOS活性再次升高,顳葉NOS活性只在48小時、72小時和1周

6、有升高,竇旁NOS活性較顳葉NOS活性有明顯差異;血管內皮細胞損傷以結扎后48小時～72小時最為明顯,早期以細胞腫脹、壞死為主,晚期則主要表現(xiàn)為血管增生、管腔狹窄,血管內皮細胞損傷還與腦組織含水量、神經(jīng)元凋亡呈平行關系;竇旁腦組織水含量于結扎后8小時開始升高,24小時和48小時顯著升高,72小時達到高峰,而顳葉皮層腦組織水含量于48小時開始升高,即全腦出現(xiàn)水腫,2周左右竇旁腦組織水含量開始下降,顳葉皮層則恢復正常,1月～2月腦組織水含量

7、恢復正常,全腦水腫消失;結扎后8小時～1個月均可見具有典型形態(tài)學特征的凋亡神經(jīng)元,而且以結扎后72小時和1周較多見。結論:SSS后1/3及橋靜脈結扎術后動物生存良好,能滿足長時程實驗觀察的要求;SSS后1/3及橋靜脈結扎術后主要的受損區(qū)為SSS后1/3的竇旁區(qū),顳葉區(qū)則因全腦水腫而受損;兔SSS后1/3及橋靜脈結扎后4小時顱內壓開始升高,3天達到最高峰，顱內壓的升高主要原因是靜脈回流障礙和腦組織水腫；血管內皮細胞的損傷以結扎后48小時～

8、72小時最為明顯，其損傷程度與腦組織含水量、神經(jīng)元凋亡呈平行關系；腦組織中脂質過氧產物MDA含量于結扎后1個月一直維持在高水平，提示過氧化損傷貫穿于SSS后1／3及橋靜脈結扎后的急性期和恢復期；腦組織NOS活性經(jīng)歷了升高、降低、再升高的變化過程，在確定對抗NO毒性的時間窗時，應予關注；自由基損傷及NO毒性是誘發(fā)神經(jīng)元凋亡的重要原因，對抗自由基損傷及NO毒性將是預防結扎后神經(jīng)元凋亡的有效途徑；SSS后1／3及橋靜脈結扎后病理、生化和神經(jīng)功

9、能等發(fā)生顯著改變的時間段主要為結扎后72小時～1周，提示此時段的有效干預治療十分重要。 第三部分 藥物干預對兔SSS及橋靜脈結扎后 病理、生化和神經(jīng)功能的影響 目的：探討尼莫通和甘露醇對SSS后1／3及橋靜脈閉塞后的藥物干預作用機理，篩選在SSS后1／3及橋靜脈閉塞后對腦有較好保護作用的用藥方法。 方法：家兔30只，根據(jù)用藥不同隨機分成實驗組、假手術對照組、尼莫通治療組、甘露醇治療組和尼莫通與甘露醇聯(lián)合治療組