肝細(xì)胞癌中MAGE-A1、-A3的表達(dá)檢測和重組MAGE-A3抗原免疫效果的觀察.pdf

1、本文檢測了HCC中MAGE-A1、-A3的表達(dá)情況；克隆肝癌組織MAGE-A3；對克隆的HCCMAGE-A3進(jìn)行蛋白表達(dá)，制造抗體。觀察MAGE-A3蛋白致敏樹突狀細(xì)胞(DC)活化的淋巴細(xì)胞對HCC細(xì)胞的體外殺傷作用，確定MAGE-A3蛋白負(fù)載DC作為HCC疫苗的可能性。通過WesternBlot，用純化的融合蛋白GST-MAGE-A3檢測上述抗體，結(jié)果顯示對應(yīng)融合蛋白GST-MAGE-A3分子量59KD處有一條帶，表明所純化的IgG抗

2、體有很高的特異性。 本文將致敏DC與淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)，檢測最佳培養(yǎng)條件。以淋巴細(xì)胞為效應(yīng)細(xì)胞，以肝癌細(xì)胞H4M、正常肝細(xì)胞為靶細(xì)胞，以多種效靶比放入96孔板中。用MTT實(shí)驗(yàn)測定效應(yīng)細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。結(jié)果負(fù)載GST-MAGE-A3抗原的DC激活的CTL對肝癌細(xì)胞有明顯的殺傷作用，顯著高于正常肝細(xì)胞對照組。說明從人外周血中誘導(dǎo)的DC負(fù)載GST-MAGE-A3抗原后，激活的CTL在體外對肝癌細(xì)胞能產(chǎn)生高效的殺傷作用，為臨床應(yīng)用