?；撬釋?duì)Aβ1-40毒性的保護(hù)作用研究.pdf

1、目的:探討牛磺酸對(duì)Aβ1-40毒性的保護(hù)作用。
　　 方法:體內(nèi)實(shí)驗(yàn):用Aβ1-40注入SD大鼠海馬制備AD動(dòng)物模型，將SD大鼠隨機(jī)分為:正常組、Aβ1-40模型組、假手術(shù)組、陽性治療組、?；撬嵝?、中、大劑量組。陽性治療組給予哈伯因治療，?；撬嵝?、中、大劑量組給予不同劑量(1.6、3.2、4.79mM·kg-1·d-1)牛磺酸灌胃治療。通過Morris水迷宮進(jìn)行行為學(xué)測試;尼氏染色觀察大鼠海馬神經(jīng)元的病理學(xué)改變;剛果紅染色觀察大

2、鼠海馬β淀粉樣肽的沉積。
　　 體外實(shí)驗(yàn):用Aβ1-40損傷人神經(jīng)母細(xì)胞瘤(SH-SY5Y)細(xì)胞作為AD細(xì)胞模型，將對(duì)數(shù)生長期的SH-SY5Y細(xì)胞分為:正常對(duì)照組、Aβ1-40模型組、?；撬嵝　⒅?、大劑量組。?；撬嵝　⒅?、大劑量組分別加入終濃度為0.8、8、20mmol·L-1的?；撬犷A(yù)處理24h，再與模型組同時(shí)加入終濃度為20μ mol·L-1Aβ1-40，繼續(xù)培養(yǎng)24h。采用噻唑藍(lán)(MTT)比色法測定細(xì)胞的存活率;Hoech

3、st33258熒光染色觀察細(xì)胞凋亡;流式細(xì)胞技術(shù)（Flow cytometry，F(xiàn)CM）檢測細(xì)胞線粒體膜電位(mitochondrialmembrane potential，△ψm)的變化。
　　 結(jié)果:體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)，與模型組相比，?；撬?.2、4.79mM·kg-1·d-1劑量組大鼠的逃避潛伏期縮短(P＜0.05)，穿越站臺(tái)次數(shù)及在第三象限停留時(shí)間延長(P＜0.05);尼氏染色結(jié)果顯示，Aβ1-40模型

4、組神經(jīng)細(xì)胞排列散亂，尼氏體碎裂、數(shù)量減少。給予3.2、4.79mM·kg-1·d-1?；撬嶂委煹拇笫蟠竽X海馬神經(jīng)元細(xì)胞排列較整齊，尼氏體數(shù)量增多，形態(tài)完整;剛果紅染色結(jié)果顯示，Aβ1-40模型組的橘紅色沉淀物較多，而給予3.2、4.79mM·kg-1·d-1?；撬嶂委煹拇笫蟠竽X切片橘紅色淀粉樣沉積相對(duì)減少。
　　 體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果:MTT法檢測，與模型組細(xì)胞存活率相比，0.8、8、20mmol·L-1?；撬犷A(yù)處理的大鼠細(xì)胞存活率升高

5、(P＜0.01，P＜0.05);與0.8mmol·L-1?；撬峤M相比，8.0、20.0mmol·L-1?；撬峤M細(xì)胞存活率明顯升高(P＜0.01); Hoechst33258染色觀察，?；撬嶂委熃M細(xì)胞呈均一完整的淡藍(lán)色熒光，與模型組細(xì)胞凋亡率相比，0.8、8、20mmol·L-1?；撬犷A(yù)處理的大鼠細(xì)胞凋亡率降低(P＜0.01);與0.8mmol·L-1?；撬峤M相比，8.0、20.0mmol·L-1牛磺酸組細(xì)胞凋亡率降低(P＜0.01);

6、FCM檢測結(jié)果，Aβ1-40模型組中細(xì)胞的△ψm較正常對(duì)照組降低(P＜0.01);0.8、8、20mmol·L-1?；撬犷A(yù)處理組的△ψm較Aβ1-40模型組增強(qiáng)((P＜0.05，P＜0.01);與0.8mmol·L-1牛磺酸組相比，8.0、20.0mmol·L-1?；撬峤M△ψm升高(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:?；撬峥商岣逜β1-40致AD大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，增加神經(jīng)元數(shù)量，可能具有干擾Aβ聚集的作用;?；撬釋?duì)Aβ1-40致S