海洋新型α-淀粉酶AmyP優(yōu)勢降解大米生淀粉特性的研究.pdf

1、α-淀粉酶（α-amylase，EC.3.2.1.1）普遍分布在動物、植物和微生物中，是一種重要的淀粉水解酶，被廣泛應(yīng)用于淀粉加工、醫(yī)藥制造、食品制造、紡織品退漿、洗滌劑生產(chǎn)等行業(yè)，是應(yīng)用最為廣泛的酶制劑之一。在前期的工作中，我們從海洋宏基因文庫中篩選到了一個糖化型的α-淀粉酶基因AmyP，并在大腸桿菌中實現(xiàn)了可溶性高表達，它與已知的淀粉酶的序列相似性低于20％，代表了糖苷水解酶GH13家族的一個新的亞家族GH13-37。
　　

2、 鑒于AmyP新穎的蛋白序列和進化地位，本研究嘗試挖掘該酶新型的催化功能。通過研究發(fā)現(xiàn)，AmyP是生淀粉降解酶，在40℃，pH7.5的條件下，它能夠降解陸地來源的各種生淀粉，例如大米，小麥，玉米，馬鈴薯，土豆，豌豆，綠豆等，但是卻無法降解巖藻聚糖，海帶多糖和卡拉膠等海洋中常見的糖類。在降解生淀粉方面，AmyP表現(xiàn)出兩個顯著的特性。其一，對大米生淀粉具有顯著的偏好降解特性。其降解能力達到了118.5U/mg，顯著的高于其它種類淀粉。其二，

3、AmyP對大米生淀粉的降解速度非?？?，當(dāng)?shù)孜餅?％大米生淀粉時，有效降解在2h之內(nèi)完成;當(dāng)?shù)孜餅?％大米生淀粉時，在1h內(nèi)完成降解，其中最快的有效降解僅為30min。AmyP的這種快速偏好降解大米生淀粉的特性在已知的α-淀粉酶中從未被發(fā)現(xiàn)過，這是首次報道。這種獨特快速偏好的降解能力使AmyP在大米淀粉加工中可能具有巨大應(yīng)用潛力。但是AmyP高效降解的維持時間較短，導(dǎo)致最終的水解效率并不是很高。分別從酶的穩(wěn)定性、產(chǎn)物抑制和底物變化三個方面