基于hepG2細(xì)胞模型的丙烯酰胺危害性風(fēng)險(xiǎn)評估.pdf

1、自從丙烯酰胺于2002年首次在食品中檢測出以來，關(guān)于丙烯酰胺的毒性機(jī)理研究和安全防護(hù)監(jiān)控一直是研究的熱點(diǎn)，各項(xiàng)研究也廣泛開展。經(jīng)過一系列的科學(xué)研究和相關(guān)報(bào)道，丙烯酰胺的形成機(jī)制和緩解策略研究已日趨成熟，但受制于傳統(tǒng)的活體動(dòng)物研究方法，其快速檢測與實(shí)時(shí)監(jiān)控的方法都受到限制，并且由動(dòng)物實(shí)驗(yàn)推理出人體實(shí)驗(yàn)還有待考證，因此建立一套完整的人體細(xì)胞離體研究體系就成為了大勢所趨。丙烯酰胺風(fēng)險(xiǎn)評估包含多個(gè)內(nèi)容:危害識別，危害描述，暴露評估，風(fēng)險(xiǎn)描述和風(fēng)

2、險(xiǎn)管理。而與試驗(yàn)相關(guān)的主要是危害識別，危害描述和暴露評估，風(fēng)險(xiǎn)描述與風(fēng)險(xiǎn)管理則主要是由相關(guān)權(quán)威機(jī)構(gòu)進(jìn)行分析認(rèn)證和管理。本文針對這三個(gè)部分分別進(jìn)行了毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)，系統(tǒng)生物學(xué)分析和化學(xué)檢測分析的方法來對丙烯酰胺進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估實(shí)驗(yàn)。本課題構(gòu)建了丙烯酰胺研究所用HepG2細(xì)胞模型，并利用2.5，5，10，20mM濃度丙烯酰胺對細(xì)胞在6h，12h，24h進(jìn)行處理，通過細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析得出丙烯酰胺能在藥品濃度超過10mM，處理時(shí)間超過12h時(shí)會使細(xì)胞形態(tài)

3、發(fā)生變化，結(jié)合雙重染色的方法得出丙烯酰胺在12h及以上處理?xiàng)l件下，在超過5mM時(shí)則既有一定的抑制分裂作用，還有一定的細(xì)胞致死作用;通過轉(zhuǎn)錄組學(xué)的分析可以得出細(xì)胞對于藥物的反應(yīng)主要改變了蛋白質(zhì)組裝、MAPK途徑、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、酒精中毒和致癌性等功能并找到一些潛在的生物標(biāo)志物用以快速監(jiān)控;建立了一套UPLC-MS在細(xì)胞基質(zhì)中的分析化學(xué)檢測方法，可以快速有效的對真正侵入人體、對人體起作用的丙烯酰胺暴露量進(jìn)行檢測，而不是傳統(tǒng)單純的丙烯酰胺攝入