聚丙烯酰胺水凝膠中丙烯酰胺單體的提取及高效液相色譜測(cè)定.pdf

1、目的：為了檢測(cè)用于軟組織填充的聚丙烯酰胺水凝膠（PolyacrylamideGel，PAMG）中丙烯酰胺（acrylamide，AM）單體的含量，建立一種快速、簡(jiǎn)單、有效的丙烯酰胺單體提取及高效液相色譜（High Performance LiquidChromatography，HPLC）分析方法。并對(duì)植入人體前、后的聚丙烯酰胺酰胺水凝膠進(jìn)行丙烯酰胺單體的提取及檢測(cè)。 方法：比較超聲輔助甲醇萃取法、水浸泡萃取法和加速溶劑萃取法（

2、accelerated solvent extraction，ASE）三種聚丙烯酰胺水凝膠樣品前處理方法的優(yōu)劣。采用水浸泡萃取法對(duì)聚丙烯酰胺水凝膠進(jìn)行樣品前處理，0.45μm的PVDF膜過濾，依次通過Oasis HLB 固相萃取柱和Bond Elut-Accucat 固相萃取柱凈化，收集最終的提取液進(jìn)行HPLC分析。 結(jié)果：超聲輔助甲醇萃取法的加標(biāo)回收率為44.2~70.0％，水浸泡萃取法的加標(biāo)回收率為87.8~94.9％，AS

3、E法的加標(biāo)回收率為36.2~64.2％。色譜條件為Angilent TC-C18色譜柱，流動(dòng)相為100％水，流速為1mL/min。丙烯酰胺色譜圖峰面積與丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度在0.05~100μg/mL 之間呈線性關(guān)系（R2=0.9997），最小檢出限與最小定量限分別為0.05μg/mL和0.15μg/mL。對(duì)3個(gè)不同濃度的丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液的測(cè)定結(jié)果顯示RSD值為2.4％~4.7％，日內(nèi)和日間RSD 值分別為5.6％（n=6）和6.7％（

4、n=8）。對(duì)未植入人體的聚丙烯酰胺水凝膠檢測(cè)結(jié)果為0.2~0.8μg/mL，對(duì)從人體中抽出的聚丙烯酰胺水凝膠的檢測(cè)結(jié)果均低于最小檢測(cè)限。 結(jié)論：水浸泡萃取法是一種簡(jiǎn)單、有效的樣品前處理方法。根據(jù)聚丙烯酰胺水凝膠的特性及丙烯酰胺在水中溶解度最大，過量的水使聚丙烯酰胺水凝膠達(dá)到完全的溶脹狀態(tài)，丙烯酰胺單體則在水凝膠內(nèi)、外水中達(dá)到平衡，通過測(cè)定提取液中丙烯酰胺的含量間接得出聚丙烯酰胺水凝膠中丙烯酰胺單體的含量，通過對(duì)檢測(cè)基質(zhì)的替換，不

5、但極大地簡(jiǎn)化了樣品處理過程，而且加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)也獲得了滿意結(jié)果。采用高效液相色譜對(duì)聚丙烯酰胺水凝膠中的丙烯酰胺進(jìn)行檢測(cè)是一種簡(jiǎn)便、高效、快速、經(jīng)濟(jì)的方法。對(duì)植入與未植入人體的聚丙烯酰胺水凝膠分析結(jié)果提示，植入人體的聚丙烯酰胺水凝膠在人體內(nèi)未在短時(shí)間內(nèi)大量降解及局部蓄積，且丙烯酰胺含量低于植入前水平，可能因?yàn)榫郾０匪z中的水份在人體組織復(fù)雜的生物環(huán)境中與體液進(jìn)行交換，丙烯酰胺自由擴(kuò)散，被組織吸收、代謝使之含量減少。對(duì)于臨床出現(xiàn)的多種