中藥抗炎制劑的研發(fā).pdf

1、本研究主要針對細(xì)菌、病毒、內(nèi)毒素等因素引起的炎癥病理過程，按“清熱解毒，活血化瘀”治則選藥遣方研究抗炎中藥。癥候明顯期的炎癥病理過程的基本證候表現(xiàn)按中醫(yī)進(jìn)行辨證，大多屬于溫病的“營血分證”證型，治療按“清熱涼血、清熱解毒，活血化瘀”的治療原則進(jìn)行設(shè)計(jì)并選藥組方進(jìn)行研究。本次研究是在已有研究成果的基礎(chǔ)上運(yùn)用均勻?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)，以抗炎藥理學(xué)指標(biāo)為考察目標(biāo)，進(jìn)行處方藥物的拆方分析，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步完善處方篩選與設(shè)計(jì)，完成適用劑型的制備，并就制劑的

2、安全性、有效性進(jìn)行了初步評價，對有關(guān)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了初步研究，初步完成了制劑質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)成分的含量測定研究，為進(jìn)一步開發(fā)抗炎新制劑奠定了一定的科學(xué)基礎(chǔ)。
　　本處方經(jīng)篩選后確定由青蒿，梔子，金銀花，丹參、草珊瑚等五味中藥組成，分別提取其有效部位，并經(jīng)組合制備成按生藥計(jì)為1g·mL-1的混合藥液，與糊精∶淀粉(1∶2)混合后，用95％乙醇作粘合劑濕法制粒而成并且命名為“黃金丹草顆粒”。試驗(yàn)對顆粒劑按制劑通則的要求進(jìn)行了有關(guān)粉體學(xué)性質(zhì)研

3、究、臨界相對濕度的測定，確定制劑符合顆粒劑劑型要求。試驗(yàn)進(jìn)一步采用TLC法對制劑中有關(guān)有效部位及其成分進(jìn)行了鑒別。其中，分別以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(9∶4∶1);乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(5∶5∶1∶1)為展開劑時能充分鑒定制劑中的異嗪皮啶及梔子苷。而以HPLC進(jìn)行的含測定量分析，則初步建立了制劑中兩種重要的有效成分-青蒿素及異嗪皮啶的含量測定方法，并就制劑中兩組分的含量進(jìn)行了測定和確認(rèn)。這些研究為該制劑的開發(fā)及其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立奠定了初

4、步的基礎(chǔ)。
　　試驗(yàn)以制劑為研究對象，分別研究了制劑對以二甲苯致小鼠耳殼腫脹度模型、醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高模型、以及小鼠人工內(nèi)毒素血癥病理模型的藥理作用進(jìn)行了系統(tǒng)的觀察，以期研究該制劑的抗炎作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)該中藥制劑能顯著或極顯著地降低二甲苯所致的耳殼腫脹程度;抑制毛細(xì)血管通透性的增加。
　　在研究該復(fù)方顆粒劑對小鼠人工內(nèi)毒素血癥病理模型的影響時。試驗(yàn)采用小鼠腹腔注射大腸桿菌內(nèi)毒素，成功建立了小鼠內(nèi)毒素血癥病理模型。

5、并在此基礎(chǔ)上研究了制劑對內(nèi)毒素致炎癥病理過程的影響。結(jié)果表明:LPS陽性對照組動物72h死亡率為78.57％，陽性對照藥物組-地塞米松磷酸鈉注射液組小鼠的死亡率為28.57％，與陽性對照組比較具顯著差異;制劑中劑量的死亡率為30.85％，較陽性藥物組略高，但顯著較陽性對照組小鼠死亡率低。期間動態(tài)測定染毒后不同時間血清中TNF-α、IL-6水平及肝組織中eNOS含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn):治療中劑量組能顯著降低TNF-α、IL-6水平，與陽性藥物地塞

6、米松磷酸鈉組比較，降低TNF-α和IL-6的程度相當(dāng)。染毒后LPS組eNOS含量在24h明顯升高，至72h才恢復(fù)正常，制劑組和DEX組在12h eNOS含量達(dá)到高峰，24h后迅速下降，中藥制劑中劑量組的治療效果和DEX組的差異不明顯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:該中藥顆粒劑可有效治療內(nèi)毒素血癥的炎癥病理過程，其重要的作用機(jī)制是通過抑制炎癥初期TNF-α，IL-1、IL-4及eNOS等致炎因子的表達(dá)并進(jìn)而控制炎癥病理的發(fā)展產(chǎn)生治療作用，這為進(jìn)一步明確并

7、研究其作用機(jī)理也奠定了基礎(chǔ)，為進(jìn)一步確證制劑的療效提供了可能。
　　為研究該制劑安全性，試驗(yàn)還進(jìn)行了有關(guān)制劑對小鼠經(jīng)胃腸道給藥的最大耐受量測定。結(jié)果表明:服藥后小鼠體重、進(jìn)食量等與空白對照組比較未表現(xiàn)出現(xiàn)顯著性差異(P＜0.05)。小鼠對該中藥顆粒劑經(jīng)胃腸道給藥的最大耐受量為0.403g/20g，該劑量是人口服推薦劑量的144倍。表明該制劑具有較高的安全性。
　　綜上可知:以本次研究中藥組方及其制劑為基礎(chǔ)，開發(fā)新型的抗炎中藥