Biodentine對MG-63細胞增殖及成骨作用的研究.pdf

1、目的:研究不同濃度Biodentine對入骨肉瘤細胞MG-63增殖及成骨作用的影響。
　　方法:將表面積S=75mm2的圓柱形研究材料置于1.5ml培養(yǎng)液中浸提24小時后，過濾除菌得到濃度為50 mm2/ml的Biodentine浸提液（即濃度比例記作1），1∶1連續(xù)稀釋四次，得到五個濃度梯度的稀釋液即:1、1/2、1/4、1/8和1/16。不同濃度的Biodentine分別作用于MG-63細胞，用CCK-8法分別于第1、3、5、

2、7天檢測細胞增殖情況。依據(jù)細胞增殖實驗結(jié)果，選取1/16濃度Biodentine作用于MG-63細胞，于第1、3、5、7天，用Real-time PCR法檢測MG-63細胞中成骨因子Runx2 mRNA表達情況;并于第10天和第14天行茜素紅染色，觀察MG-63細胞鈣化結(jié)節(jié)形成情況。
　　結(jié)果:1.各時間點不同濃度Biodentine(BD)對MG-63細胞增殖的影響
　　(1) Biodentine作用于MG-63細胞第1

3、天，活細胞數(shù)量與空白對照組比，1濃度組、1/2濃度組、1/8濃度組略有下降，1/4濃度組無明顯變化，1/16濃度組增多。各組間活細胞數(shù)的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　(2) Biodentine作用于MG-63細胞第3天，活細胞數(shù)量與空白對照組比，1濃度組略有下降，1/2濃度組，1/4濃度組和1/8濃度組無明顯變化，1/16濃度組略有增多。各組間活細胞數(shù)的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　(3) Bioden

4、tine作用于MG-63細胞第5天，活細胞數(shù)量與空白對照組比，1濃度組明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05);1/2濃度組略降低，差異無統(tǒng)計學(xué)意義
　　(p＞0.05);1/4濃度組、1/8濃度組略有升高，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05);1/16濃度組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。
　　(4) Biodentine作用于MG-63細胞第7天，活細胞數(shù)量與空白對照組比，1濃度組、1/2濃度組明顯降低，差異有

5、統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05);1/4濃度組、1/8濃度組略降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05);1/16濃度組略有上升，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　2.Biodentine對MG-63細胞成骨性的影響
　　(1) Runx2mRNA的表達
　　1/16濃度BD作用于MG-63細胞第1天時，MG-63細胞Runx2 mRNA的表達量為空白對照組的1.14倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05);第3天時，Runx

6、2 mRNA的表達量為空白對照組的5.29倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05);第5天時，Runx2mRNA的表達量為空白對照組的1.08倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05);第7天時，Runx2 mRNA的表達量為空白對照組的2.11倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。
　　(2)不同處理組的茜素紅染色
　　1/16濃度BD作用于MG-63細胞第10天時，與空白對照組相比，肉眼均未見礦化結(jié)節(jié)，鏡下觀察均可見2～3處小面積

7、紅色鈣化物，兩組之間未見顯著差異。
　　1/16濃度BD作用于MG-63細胞第14天時，空白對照組可見6孔板內(nèi)大面積紅色鈣化物;1/16濃度BD組見紅色鈣化物，面積比對照組更廣泛，顏色更深。
　　結(jié)論:1.不同濃度的Biodentine對MG-63細胞增殖的作用不同，50mmVml的Biodentine可抑制細胞增殖，低于該濃度的浸提液無明顯的抑制細胞增殖作用。
　　2.Biodentine能夠使MG-63細胞Runx