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文檔簡(jiǎn)介
1、目的
探討脂質(zhì)體介導(dǎo)的TK/GCV系統(tǒng)對(duì)人骨肉瘤MG-63細(xì)胞的殺傷作用及其所產(chǎn)生的“旁觀者效應(yīng)”。
方法
脂質(zhì)體介導(dǎo)TK基因體外轉(zhuǎn)染骨肉瘤MG-63細(xì)胞,倒置熒光顯微鏡觀察細(xì)胞轉(zhuǎn)染是否成功,流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞與未轉(zhuǎn)染細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。將未轉(zhuǎn)染的骨肉瘤MG-63細(xì)胞分為3組,實(shí)驗(yàn)組1用轉(zhuǎn)染TK/GCV的細(xì)胞上清液按1/10,1/7,1/5,1/2比例與培養(yǎng)液的混和液培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)組2用經(jīng)0.22μm濾器過(guò)濾的
2、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞上清液按1/10,1/7,1/5,1/2比例與培養(yǎng)液的混和液培養(yǎng),對(duì)照組用培養(yǎng)液培養(yǎng),四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法分別測(cè)定各組細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率、骨肉瘤細(xì)胞對(duì)TK/GCV系統(tǒng)的敏感性以及轉(zhuǎn)染細(xì)胞的旁觀者效應(yīng)。
結(jié)果
1、經(jīng)TK基因轉(zhuǎn)染的MG-63細(xì)胞,倒置熒光顯微鏡下有大量綠色熒光蛋白表達(dá),流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染TK基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率可達(dá)75.5%。
2、6天后MTT檢測(cè)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組1中各比例濃度的
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