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1、大連理工大學碩士學位論文鹽角草膽堿單加氧酶基因的克隆及其在煙草中的表達研究姓名:葛慶燕申請學位級別:碩士專業(yè):生物化工指導教師:安利佳20050601AbstractThefulllengthCMOeDNAwasclonedfromSalicorniaeuropaeabyRTPCRandRLM—RACECMOcDNA(1844bp)includeda154bp5’UTR,a361bp3’UTR,aputativepolyadenylyl
2、ationsignalanda1329bpOpenreadingframeencodinga442一aminoacidpolypeptidewhichwas84%,79%,79%and78%toCMOsequencesofSuaedaliaotungensis,Ahortensis,AtricolorandBvulgar括inaminoacidhomologyrespectivelyThededucedaminoacidsequence
3、includedtheconservedmononuclearFebindingmotif“CTH”and“CPYH’’andtheconservedRieske—typeiron—sulfurclusterbindingregion“HVPYAH”GwasconsideredasthepossibletranscriptioninitiationsitebasedOntheprincipleofRLMRACEandtheanalysi
4、sofCMO5’UTRsequencesTheCMOORFwasclonedandtheplantexpressionvectorpBll21一CMOwasconstructedTheresultantplasmidspBll21一CMOwastransferredintoAgrobacteriumtumefaciens(GV3101)bytheliquidnitrogenfreezingthawmethodTheCMOgenewast
5、ransferredintotobacco(NictianatabacumLCV89)viaAgrobacteriummediationPCRanalysisshowedthattheCMOgenewastransferredintotobaccoRelativeelectronicconductivitydemonstratedlessmembranedamageintransgenicplantsthaninthewildtypeK
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