鹽角草鉀離子通道蛋白基因SeAKT1的克隆與表達.pdf

1、鉀是植物生長所必需的營養(yǎng)元素之一，廣泛分布于植物各組織和器官，參與植物體內多種重要的生理過程，維持細胞質內高水平且相對穩(wěn)定的鉀含量對植物至關重要。鉀離子通道是植物吸收鉀的主要途徑。目前已從不同植物中克隆得到一些AKT1亞族鉀離子通道基因，然而這些基因大部分來自甜土植物，并且多數(shù)對Na+敏感，其中包括來自鹽生植物的MKT1，對真鹽生植物鉀離子通道的報道很少。所以，本論文選用迄今為止報道過的最耐鹽的陸生高等真鹽生植物之一的鹽角草為實驗材料，

2、旨在獲得一種在高鹽環(huán)境下仍具有鉀吸收能力的Na+不敏感的鉀通道蛋白。
　　本文從真鹽生植物鹽角草中克隆得到鉀離子通道蛋白基因SeAKT1 cDNA。其長度為3189bp，其中ORF為2577bp，編碼858個氨基酸。氨基酸序列分析表明SeAKT1具有6個跨膜結構域(S1-S6)，同時帶有一個cNMP結合位點和C端的ANK結構，并且含有一個錨蛋白結合結構域KHA，是典型的Shaker家族內向整流型鉀離子通道。系統(tǒng)發(fā)育分析顯示該基因屬

3、于Shaker家族鉀離子通道中的AKT1亞族。缺鉀情況下鹽角草幼苗和成苗中SeAKT1表達量均有所上調，且幼苗中上調幅度尤為明顯;同樣，幼苗和成苗中SeAKT1表達量均可被缺鉀+Na+所誘導;在100mMNa+處理的幼苗中表達量有所增加，然而在700mMNa+處理下成苗中eAKT1表達略有下降。SeAKT1在鹽角草成苗的根和冠中均有表達，但在根中表達量略高。構建植物表達載體pBI121-SeAKT1，利用花器浸泡法將eAKT1基因轉入野