hTERT、miR-29c、miR-124、miR-135a和miR-148a與胃癌的相關性研究.pdf

1、第一部分端粒酶逆轉錄酶在胃癌中的表達及臨床意義
　　目的：
　　探討端粒酶逆轉錄酶（human telomerase reverse transcriptase，hTERT）mRNA及蛋白在胃癌組織中的表達及臨床意義。
　　方法：
　　收集60例有完整臨床病理資料的胃癌組織為實驗組和30例正常胃組織為對照組。以實時熒光定量PCR（quantitative real-time polymerase chain re

2、action，qRT-PCR）檢測組織樣本中hTERT mRNA表達水平，用MaxVisionTM即用型快速免疫組化一步法檢測組織樣本中hTERT蛋白表達。運用方差分析、χ2檢驗或連續(xù)校正χ2檢驗、Spearman秩相關、生存分析等多種統(tǒng)計方法進行實驗數(shù)據(jù)處理。分析hTERT mRNA和蛋白在胃癌組織中的表達及兩者的相關性；探討hTERT mRNA與胃癌臨床病理特征及預后間的關系。
　　結果：
　　hTERT mRNA在胃癌

3、組和正常組中均有表達，但胃癌組中hTERT mRNA的表達水平明顯高于正常組，兩組間差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；hTERT蛋白主要表達在胃癌細胞胞漿中，胃癌細胞核中也偶有表達，hTERT蛋白在胃癌組和正常組中的陽性表達率分別為83.3％，40.0%，兩組差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。hTERT mRNA和蛋白表達水平呈正相關（r=0.733，P<0.01）；hTERT mRNA與淋巴結轉移、遠處轉移及臨床分期相關（P<0.05

4、），與年齡、性別、腫瘤直徑、腫瘤部位、腫瘤分化程度及浸潤深度無關（P>0.05）。生存分析顯示高表達hTERT mRNA患者的中位生存時間為24個月，低表達者的中位生存時間為64個月，兩者比較差異有統(tǒng)計學意義（P=0.015）。
　　結論：
　　hTERT基因在胃癌組織中高表達，且能夠影響胃癌進展和預后。因此，hTERT有望成為評估胃癌進展和預后的指標之一。
　　第二部分評估m(xù)iR-29c、miR-124、miR-13

5、5a和miR-148a對胃癌淋巴結轉移及臨床分期的預測能力
　　目的:
　　檢測胃癌組織中miR-29c、miR-124、miR-135a和miR-148a的表達水平，探討其對胃癌淋巴結轉移和臨床分期的預測能力。
　　方法:
　　收集60例有完整臨床病理資料的胃癌組織為實驗組，30例正常胃組織作為對照組。以實時熒光定量PCR（quantitative real-time polymerase chain reac

6、tion，qRT-PCR）檢測組織樣本中miR-29c、miR-124、miR-135a和miR-148a的表達水平。運用Mann-Whitney U test或者Kruskal-Wallis H test、Logistic回歸、Spearman秩相關、受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC曲線）、McNemar test等多種分析方法進行實驗數(shù)據(jù)處理。分析miR-29

7、c、miR-124、miR-135a和miR-148a在胃癌組織中的表達及與胃癌臨床病理特征間的關系，進一步分析其對胃癌淋巴結轉移和臨床分期的預測能力。
　　結果:
　　miR-29c、miR-124、miR-135a和miR-148a在胃癌組織中表達下調（P<0.05）。miR-124和miR-135a在胃癌淋巴結轉移組和臨床III–IV期中的低表達（P<0.01）提示了與淋巴結轉移及臨床分期的潛在相關。Spearman秩

8、相關分析顯示miR-124與miR-135a呈正相關（r=0.730）。ROC曲線分析顯示miR-124在識別胃癌淋巴結轉移和臨床分期方面具有較好的預測能力。取最佳截斷值為0.013，miR-124診斷淋巴結轉移的靈敏性和特異性均為80.0%；同時其診斷胃癌Ι-II期的靈敏性為71.9%，特異性為75.0%。對于胃癌轉移淋巴結的診斷，miR-124與CT影像的診斷特異性沒有明顯不同（0.800 vs0.900，P=0.508），但miR