Dicer與SIRT7相互作用在DNA損傷應(yīng)答過程中調(diào)節(jié)H3K18乙?；?pdf

1、目的:研究Dicer表達(dá)水平對H3K18乙?；降恼{(diào)節(jié)作用。
　　方法:用免疫共沉淀檢測Dicer和SIRT7的相互作用，用免疫熒光對Dicer和S1RT7進(jìn)行共定位，通過免疫印跡以及實(shí)時(shí)熒光定量檢測DNA損傷處理后Dicer、SIRT7、H3K18Ac、Lamin A/C及總H3的表達(dá)水平，亞細(xì)胞生化分離后用免疫印跡法檢測這些蛋白的亞細(xì)胞定位。
　　結(jié)果:SIRT7是一種NAD+依賴的組蛋白去乙酰化酶，能夠作用于組蛋白H

2、3K18位點(diǎn)，導(dǎo)致H3K18Ac去乙?；Ｎ覀儼l(fā)現(xiàn)Dicer能夠與SIRT7相互作用，導(dǎo)致一部分SIRT7定位在細(xì)胞質(zhì)中。Dicer的表達(dá)水平?jīng)Q定了SIRT7的亞細(xì)胞定位，Dicer表達(dá)增加導(dǎo)致SIRT7從染色質(zhì)轉(zhuǎn)位到細(xì)胞質(zhì)中，Dicer表達(dá)降低導(dǎo)致SIRT7從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)位到染色質(zhì)上。Dicer敲除導(dǎo)致與染色質(zhì)結(jié)合的SIRT7增加，同時(shí)降低細(xì)胞質(zhì)的SIRT7。過表達(dá)Dicer導(dǎo)致與染色質(zhì)結(jié)合的SIRT7減少，細(xì)胞質(zhì)中的SIRT7增加。DN