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文檔簡介
1、目的:
對比Lewis肺癌細胞(LLC)及LLC原位接種后獲得的第一代衍生細胞和原位接種后獲得的第二代衍生細胞間的生物學(xué)特性,比較衍生細胞系與LLC細胞分別在原位種植模型中的侵襲轉(zhuǎn)移能力。
方法:
1.建立C57 BL/6小鼠Lewis肺癌原位種植模型。
2.Lewis肺癌衍生細胞系的建立。
3.離體實驗:1)熒光顯微鏡及電鏡下觀察細胞形態(tài)。2)cck8法測細胞增殖能力。3)細胞克隆形成
2、實驗。4)Transwell侵襲實驗。
4.活體實驗:1)原位種植模型與皮下種植模型的比較。2)細胞接種數(shù)量對成瘤與轉(zhuǎn)移的影響。3)第一及第二代衍生細胞系與親代細胞間成瘤與轉(zhuǎn)移的對比。
5.藥物抑制實驗:小鼠成瘤的藥物抑制實驗。
結(jié)果:
1.第一代及第二代衍生細胞系與LLC細胞細胞均呈梭形生長,熒光顯微鏡下均能穩(wěn)定表達GFP,電鏡下細胞均表達出不同程度的肺腺癌細胞的特征。
2.細胞系之間
3、的增殖能力無明顯差異(p>0.05)
3.侵襲能力第二代衍生細胞系>第一代衍生細胞系>LLC( p<0.05)。
4.活體實驗顯示:1)接種相同數(shù)目細胞的原位組較皮下組有更高的成瘤率和轉(zhuǎn)移性。2)隨著原位種植細胞數(shù)目的增加,小鼠成瘤率明顯增高。3)通過體內(nèi)多次傳代的衍生細胞株在原位種植模型中的成瘤率和轉(zhuǎn)移性較強,依次為: LLC-R2-Lung>LLC-R1-Lung>LLC-P。
5.順鉑與紫杉醇合并組的
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