原代培養(yǎng)人肺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞對肺癌細(xì)胞系放射敏感性影響研究.pdf

1、目的:
　　探討在體外原代培養(yǎng)人肺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞(Cancer-associated fibroblasts,CAF)和肺癌細(xì)胞系(A549、H1299)直接接觸共培養(yǎng)條件下,與肺癌細(xì)胞系(A549、H1299)單獨(dú)培養(yǎng)條件下放射敏感性的差異,從而研究影響肺癌細(xì)胞放射敏感性的可能因素。
　　方法:
　　選擇人肺癌A549、H1299細(xì)胞系,采用人肺癌組織進(jìn)行原代培養(yǎng)后獲取人肺CAF,采用免疫熒光技術(shù)鑒定。CAF與肺癌

2、細(xì)胞系 A549、H1299進(jìn)行直接接觸共培養(yǎng),及肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549、H1299進(jìn)行單獨(dú)培養(yǎng),采用細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察CAF對肺癌細(xì)胞系放射敏感性的影響。
　　結(jié)果:
　　新鮮人肺腺癌經(jīng)組織塊貼壁法原代培養(yǎng)出可穩(wěn)定傳代的CAF,免疫熒光技術(shù)鑒定其特異表達(dá)α-平滑肌肌動蛋白、波行蛋白和成纖維細(xì)胞活化蛋白,而無細(xì)胞角質(zhì)蛋白-18表達(dá)。人肺CAF分別與A549、H1299細(xì)胞共培養(yǎng)組在接受不同劑量梯度(0、2、4、6、8Gy)照射

3、后的克隆形成率均高于單獨(dú)組。在0Gy照射時單獨(dú)組和共培養(yǎng)組 A549細(xì)胞的克隆形成率分別為(20.0±3.9)％和(32.3±5.5)％(P<0.05),H1299細(xì)胞的分別為(20.6±3.1)％和(35.2±2.3)％(P<0.05)。在2Gy照射時,A549細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)組和 A549細(xì)胞與 CAF共培養(yǎng)組的存活分?jǐn)?shù)(SF2)及 H1299細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)組和 H1299細(xì)胞與CAF共培養(yǎng)組的存活分?jǐn)?shù)(SF2)均無明顯差異,單獨(dú)組和共培

4、養(yǎng)組A549細(xì)胞的SF2分別為0.727±0.061和0.782±0.089(P>0.05),H1299細(xì)胞分別為0.692±0.065和0.782±0.037(P>0.05);A549細(xì)胞與CAF共培養(yǎng)組和H1299細(xì)胞與CAF共培養(yǎng)組,在X線照射時,CAF對A549、H1299細(xì)胞均有放射保護(hù)作用,人肺 CAF對A549、H1299細(xì)胞的放射保護(hù)增益比分別為1.29和1.25。
　　結(jié)論:
　　人肺CAF與肺癌細(xì)胞系直接