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文檔簡介
1、目的:研究胃癌細(xì)胞株SGC-7901、BGC-823的側(cè)群細(xì)胞(side population,SP),以制備的四君子湯及其各拆方藥物血清進(jìn)行干預(yù),檢測干預(yù)后增殖、侵襲能力及凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的變化情況,從體外生物學(xué)角度探討四君子湯對腫瘤側(cè)群細(xì)胞的影響。
方法:
1.選取胃癌細(xì)胞株SGC-7901(中分化)及胃癌細(xì)胞株BGC-823(低分化)進(jìn)行培養(yǎng);
2.流式細(xì)胞儀分選SGC-7901及BGC-823胃癌細(xì)
2、胞的SP;
3.制備四君子湯及其各拆方含藥物血清;
4.平板克隆實(shí)驗觀察四君子湯及其各拆方藥物血清對SP細(xì)胞、非側(cè)群細(xì)胞(Non-side population,NSP)及未分選細(xì)胞體外增殖能力的影響;
5. Transwell侵襲實(shí)驗觀察含四君子湯及其拆方的藥物血清干預(yù)后SP細(xì)胞、NSP細(xì)胞及未分選細(xì)胞侵襲能力的變化;
6. Western blot檢測藥物血清干預(yù)后凋亡相關(guān)蛋白Caspase-
3、9、Cytochrome C、PRAP表達(dá)的變化情況。
結(jié)果:
1.胃癌SGC-7901、BGC-823細(xì)胞株中均分選出SP,比例分別為2.68%±0.58%、3.28%±0.58%;
2.含四君子湯及其拆方藥物血清干預(yù)后,SP、NSP及未分選細(xì)胞的增殖、侵襲能力與生理鹽水組相比總體上受到了不同程度的抑制(p<0.05,個別組p>0.05);干預(yù)后SP的增殖、侵襲能力總體上仍要強(qiáng)于NSP(p<0.05,個別
4、組p>0.05);單方抑制增殖、侵襲的能力總體上不如全方(p<0.05,個別組p>0.05);
3.藥物血清干預(yù)后凋亡相關(guān)蛋白Caspase-9、Cytochrome C、PRAP的表達(dá)水平與生理鹽水對照組相比總體上有一定程度的提高;藥物血清作用48h后的蛋白表達(dá)水平與作用24h后相比總體上有一定程度的提高;SP的蛋白的表達(dá)總體呈現(xiàn)與NSP相比較低的現(xiàn)象;全方促進(jìn)凋亡相關(guān)蛋白Caspase-9、Cytochrome C、PRA
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