簡介：選擇題選擇題1關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)敘述錯誤的是（B）A可用來研究細(xì)胞生理和細(xì)胞各種功能B首先用胰蛋白酶將動物或植物組織進行酶解，游離出單細(xì)胞后再進行培養(yǎng)C用小牛血清配制的培養(yǎng)基進行動物細(xì)胞培養(yǎng)D培養(yǎng)過程可用倒置顯微鏡進行觀察2貼壁細(xì)胞的分裂方式屬于BA無絲分裂B有絲分裂C減數(shù)分裂D增殖調(diào)節(jié)唾液腺細(xì)胞增殖、分化和功能的因素，沒有以下哪一個DA細(xì)胞因子B激素C細(xì)胞外基質(zhì)D白介素8E鈣離子以下哪句話是錯誤的BA牙周膜是致密的結(jié)締組織構(gòu)成B頜面部軟骨細(xì)胞培養(yǎng)多見于上頜骨髁突軟骨培養(yǎng)C鱗狀細(xì)胞癌是口腔最常見的惡性腫瘤D成釉細(xì)胞是一種常見的良性上皮源性腫瘤，因其易復(fù)發(fā)、可能惡變等特性，而受到研究者的廣泛關(guān)注E體外培養(yǎng)的腺泡上皮細(xì)胞多成多角形，鋪路石樣排列1牙周膜不具有以下哪種功能（D）A分泌功能B礦化功能C收縮功能D防御功能2唾液腺細(xì)胞不包括以下哪種（C）A導(dǎo)管上皮細(xì)胞B,腺泡上皮細(xì)胞C唾液腺腫瘤細(xì)胞D肌上皮細(xì)胞1從體內(nèi)去除組織接種培養(yǎng)到第一次傳代的階段稱為（A）A初代培養(yǎng)B傳代期C衰退期D以上均不對2在特定的時間和特定的空間研究一個完整生物體所表達的全體蛋白質(zhì)特征稱為（A）A蛋白質(zhì)組學(xué)B蛋白質(zhì)鑒定C模式生物學(xué)D生物信息學(xué)1按照培養(yǎng)細(xì)胞的主要形態(tài)，可包括哪些類型EA上皮型細(xì)胞B成纖維型細(xì)胞C游走型細(xì)胞D多形型細(xì)胞E以上全是2復(fù)蘇是以一定的復(fù)溫速率將凍存的培養(yǎng)物恢復(fù)到常溫的過程。在冷凍復(fù)蘇中應(yīng)遵循什么原則（C）A速凍速溶B慢凍慢溶C慢凍速溶D速凍慢溶E以上都不是組織工程三要素EA種子細(xì)胞B生物支架材料C細(xì)胞活性因子DA和BEA、B和C細(xì)胞培養(yǎng)一代中，進行各項試驗最好的階段是DA游離期B貼壁期C潛伏期D指數(shù)生長期E停滯期1、有關(guān)上皮型細(xì)胞說法錯誤的是（A）A一定來源于外胚層B形態(tài)類似體內(nèi)的上皮細(xì)胞C生長易相連成片D鋪路石狀2、那種細(xì)胞是懸浮型細(xì)胞（D）A心肌細(xì)胞B平滑肌細(xì)胞C成骨細(xì)胞D白細(xì)胞1、以下哪項不是培養(yǎng)細(xì)胞的生長過程（A）A、分裂期B、原代培養(yǎng)期C、傳代期D、衰退期2、培養(yǎng)細(xì)胞的生存環(huán)境與條件不包括（A）A、競爭菌群B、細(xì)胞的營養(yǎng)需要C、溫度條件D、液相環(huán)境下列哪項不是正常細(xì)胞體外培養(yǎng)調(diào)解下生存過程的階段D1下列哪項不屬于口腔組織特有的干細(xì)胞（B）A、牙髓干細(xì)胞B、脫落恒牙牙髓干細(xì)胞C、牙周膜干細(xì)胞D、根尖牙乳頭干細(xì)胞1下列說法正確的是（C）、A貼壁型細(xì)胞中的成纖維型細(xì)胞即我們所說的成纖維細(xì)胞B細(xì)胞培養(yǎng)出來的細(xì)胞與人體的細(xì)胞相同C細(xì)胞凍存與復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融D細(xì)胞培養(yǎng)的停滯期最適合進行實驗研究E細(xì)胞轉(zhuǎn)化的標(biāo)志之一是細(xì)胞獲得永生性，體外人工誘導(dǎo)無法達成（2）調(diào)節(jié)唾液腺細(xì)胞增殖分化和功能的因素有（E）A細(xì)胞因子B激素C細(xì)胞外基質(zhì)D鈣離子E以上都有（3）一下哪項屬于破骨細(xì)胞的區(qū)域（E）A皺褶緣B清亮區(qū)C小泡及空泡區(qū)D細(xì)胞基底部E以上都有1組織工程支架材料須符合以下哪項要求（E）A具有良好的生物相容性B具有生物可降解性C具有良好的表面活性D具有多孔性，具有可塑性E以上都是2有關(guān)天然培養(yǎng)基描述錯誤的是（B）A以天然成分作為培養(yǎng)液B包括氨基酸、維生素、糖類、無機離子和一些其他輔助物質(zhì)C包括血清、組織提取液、水解乳白蛋白等D營養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果良好E成分復(fù)雜，來源受限1下列不屬于粘附型細(xì)胞的是（D）A、上皮型細(xì)胞B、成纖維型細(xì)胞C、游走型細(xì)胞D、血細(xì)胞2有關(guān)培養(yǎng)細(xì)胞下列說法錯誤的是（B）A細(xì)胞傳代經(jīng)過的順序為游離，貼壁，潛伏期，生長，停滯期B金屬不可做為基質(zhì)C細(xì)胞耐酸性比耐堿性強些D氧氣參與細(xì)胞能量代謝1體外培養(yǎng)包括（D）A細(xì)胞培養(yǎng)B組織培養(yǎng)C器官培養(yǎng)D以上全是2粘附型細(xì)胞按照培養(yǎng)細(xì)胞的主要形態(tài)，可分為以下類型（E）A上皮型細(xì)胞B成纖維型細(xì)胞C游走型細(xì)胞D多形型細(xì)胞E以上全是牙髓細(xì)胞體外培養(yǎng)時生長較為穩(wěn)定的是DA、第1020代B、第15代C、第510代D、第515代E、第1015代1、下列不屬于上皮型細(xì)胞生長特點的是（D）A、易相連成片B、相靠緊密相連成薄層鋪路石狀C生長時呈膜狀移動，很少脫離細(xì)胞群而單個活動D、排列成放射狀、漩渦1體外細(xì)胞培養(yǎng)中培養(yǎng)細(xì)胞一代生存期不包括D

簡介：1、試述利用基因工程的技術(shù)調(diào)控基因表達的主要方法試述利用基因工程的技術(shù)調(diào)控基因表達的主要方法（1）、基因表達系列分析技術(shù)基因表達系列分析技術(shù)是一種以測序為基礎(chǔ)定量分析全基因組表達模式的技術(shù)，能夠直接讀出任何一種類型細(xì)胞或組織的基因表達信息。其基本原理是根據(jù)理論上任何長度超過910個堿基的核苷酸片段可代表一種轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的特意序列，因此，選擇特定的限制性內(nèi)切酶分離轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中這些代表基因特異性的910各堿基的核苷酸序列并制成標(biāo)簽連接、克隆測序，根據(jù)其占總標(biāo)簽數(shù)的比例即可分析其對應(yīng)編碼基因的表達頻率。（2）、RNA選擇性剪切機制RNA的選擇性剪切是指用不同的剪切方式選擇不同的剪切位點組合從一個MRNA前體產(chǎn)生不同的MRNA剪切異構(gòu)體的過程。一般將選擇性剪切分為如下幾類平衡剪切、5’選擇性剪切、3’選擇性剪切，外顯子遺漏，相互排斥性剪切?？梢訰TPCR的方法研究一個基因是否存在選擇性剪切。其步驟是首先以CRNA兩端特異性引物或來自不同外顯子的引物序列在不同組織來源的RNA樣品中進行擴增，觀察PCR產(chǎn)物大小是否存在差異。如果發(fā)現(xiàn)差異，測序后可以分析出這種差異是否來自于選擇性剪切。選擇性剪切使一個基因翻譯為多種蛋白質(zhì)序列，是基因表達多樣性的重要表現(xiàn)形式。（3）、原位雜交技術(shù)原位雜交INSITUHYBRIDIZATION,ISH是用標(biāo)記的核酸探針，經(jīng)放射自顯影或非放射檢測體系，在組織、細(xì)胞、間期核及染色體上對核酸進行定位和相對定量研究的一種手段。通?？梢苑譃镽NA原位雜交和染色體原位雜交兩大類1、RNA原位雜交用放射性或非放射性如地高辛、生物素等標(biāo)記的特異性探針與被固定的組織切片反應(yīng)，若細(xì)胞中存在與探針互補的MRNA分子，兩者雜交產(chǎn)生雙鏈RNA，就可以通過檢測放射性標(biāo)記或經(jīng)酶促免疫顯色，對該基因的表達產(chǎn)物在細(xì)胞水平上作出定性定量分析；2、熒光原位雜交FLUORESCENCEINSITUHYBRIDIZATION,FISH技術(shù)首先對于寡核苷酸探針做特殊修飾和標(biāo)記，然后用原位雜交法與靶染色體或DNA上特定的序列結(jié)合，再通過與熒光素分子相偶聯(lián)的單克隆抗體來確定該DNA序列在染色體的位置。FISH技術(shù)不需要放射性同位素，實驗周期短，檢測靈敏度高。（4）定點突變技術(shù)定點突變是重組DNA進化的基礎(chǔ)，該方法通過改變基因特定位點核苷酸序列來改變所編碼的氨基酸序列，常用于研究某個氨基酸殘基對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、催化活性以及結(jié)合配體能力的影響，也可用于改造DNA調(diào)控元件特征序列、修飾表達載體、引入新的酶切位點等。但目前為止選擇氨基酸突變的位點存在一定的盲目性。主要是采用兩種PCR方法來實現(xiàn)重疊延伸技術(shù)和大引物誘變法在基因序列中進行定點突變。（5）RNAI技術(shù)RNA干擾RNAINTERFERENCE,RNAI技術(shù)利用雙鏈小RNA高效、特異性降解細(xì)胞內(nèi)同源MRNA，從而阻斷體內(nèi)靶基因表達，使細(xì)胞出現(xiàn)靶基因缺失的表型。其過程一般為在DICER的參與下，細(xì)胞中的雙鏈RNA首先被降解形成2125個核苷酸的小片段雙鏈RNASIRNA，然后又SIRNA中的反義鏈指導(dǎo)合成一種被稱為RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體RISC的核蛋白體，再又RISC介導(dǎo)切割目的MRNA分子中與SIRNA反義鏈互補的區(qū)域，從而實現(xiàn)干擾基因表達的功能。同時，SIRNA可作為特殊引物，在依賴于RNA的RNA聚合酶的作用下，以目的MRNA為模板合成DSRNA，后者又可被降解為新的SIRNA，重新進入上述循環(huán)。6一些基本分子生物學(xué)手段在啟動子上游構(gòu)建增強子、細(xì)菌培養(yǎng)時加入誘導(dǎo)物誘導(dǎo)產(chǎn)物生成等。2、論述原核生物和真核生物基因組的異同、論述原核生物和真核生物基因組的異同1原核生物的基因組結(jié)構(gòu)特點原核生物的基因組結(jié)構(gòu)特點原核生物的基因表達調(diào)控特點原核生物的基因表達調(diào)控特點1轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控?zé)o論原核生物還是真核生物的基因調(diào)控主要是轉(zhuǎn)錄水平的,原核生物不同于真核生物的基因結(jié)構(gòu),存在轉(zhuǎn)錄單元,即操縱子，原核生物的轉(zhuǎn)錄受操縱子控制。11RNA聚合酶與啟動子的影響DNA轉(zhuǎn)錄RNA合成起始時,只有帶有Σ因子的全酶才能專一地與DNA上的啟動子結(jié)合，Σ因子能提高酶辨認(rèn)啟動子的能力，若啟動子與聚合酶結(jié)合緊密,則基因獲得較高水平的轉(zhuǎn)錄,否則,轉(zhuǎn)錄水平較低，另外,還發(fā)現(xiàn)有些基因有增強子，位于轉(zhuǎn)錄起始的上游,是強化轉(zhuǎn)錄起始的序列。12代謝產(chǎn)物的調(diào)控可誘導(dǎo)調(diào)節(jié)在代謝產(chǎn)物或化合物的誘導(dǎo)下,使基因活化,操縱子由關(guān)閉狀態(tài)轉(zhuǎn)為工作狀態(tài)，如大腸桿菌的乳糖操縱子無誘導(dǎo)物存在時，阻遏物與操作基因結(jié)合使得結(jié)構(gòu)基因不能正常轉(zhuǎn)錄；誘導(dǎo)物（乳糖或IPTG）存在，與阻遏物結(jié)合時，阻遏物從操縱基因上脫離下來，RNA聚合酶便可通過啟動子和操作基因正常轉(zhuǎn)錄出一條多順反子MRNA從而翻譯得到三種酶?？勺瓒粽{(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄平時是開啟的,但由于某些特殊代謝產(chǎn)物或化合物的積累將其關(guān)閉,阻遏基因的轉(zhuǎn)錄,不能合成蛋白質(zhì)或酶。如大腸桿菌的色氨酸操縱子TRP操縱子轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控是通過阻遏蛋白實現(xiàn)的。產(chǎn)生阻遏蛋白的基因是TRPR，它結(jié)合于TRP操縱基因特異序列,阻止轉(zhuǎn)錄起始。當(dāng)TRP水平低時,阻遏蛋白以一種非活性形式存在,不能結(jié)合DNA。這時TRP生物合成途徑被激活；TRP操縱子轉(zhuǎn)錄終止的調(diào)控是通過弱化作用實現(xiàn)的。在大腸桿菌TRPOPERON,前導(dǎo)區(qū)的堿基序列包括4個分別以1、2、3和4表示的片段,能以兩種不同的方式進行堿基配對,12和34配對,或23配對,34配對區(qū)正好位于終止密碼子的識別區(qū)。前導(dǎo)序列有相鄰的兩個色氨酸密碼子,當(dāng)培養(yǎng)基中TRP濃度很低時,負(fù)載有TRP的TR2NATRP也就少,這樣翻譯通過兩個相鄰色氨酸密碼子的速度就會很慢,當(dāng)4區(qū)被轉(zhuǎn)錄完成時,核糖體滯留1區(qū),這時的前導(dǎo)區(qū)結(jié)構(gòu)是23配對,不形成34配對的終止結(jié)構(gòu),所以轉(zhuǎn)錄可繼續(xù)進行。反之,核糖體可順利通過兩個相鄰的色氨酸密碼子,在4區(qū)被轉(zhuǎn)錄之前,核糖體就到達2區(qū),這樣使23不能配對,34區(qū)可以配對形成終止子結(jié)構(gòu),轉(zhuǎn)錄停止。13降解物對基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)細(xì)菌在有葡萄糖存在的培養(yǎng)基情況下,即使加入乳糖、半乳糖等誘導(dǎo)物,與其相應(yīng)的操縱子也不會啟動，這是由于葡萄糖抑制了細(xì)菌的腺苷酸環(huán)化酶,減少環(huán)腺苷酸CAMP的合成。當(dāng)培養(yǎng)基中的葡萄糖減少時,則環(huán)腺苷酸的活力提高,CAMP的合成增加,CAMP與CRP形成復(fù)合物并與操縱子結(jié)合,促進乳糖的表達。降解物的抑制作用是通過促進基因轉(zhuǎn)錄來正常調(diào)節(jié)基因表達的。14細(xì)菌的應(yīng)急反應(yīng)對基因表達的調(diào)控細(xì)菌在生存條件危急時,如氨基酸全面匱乏,細(xì)菌會產(chǎn)生一個應(yīng)急反應(yīng)包括生產(chǎn)各種RNA、糖、脂肪、蛋白質(zhì)在內(nèi)的幾乎全部生物化學(xué)反應(yīng)過程均被停止，因為此時細(xì)菌細(xì)胞中存在大量不載氨基酸的TRNA,空載的TRNA激活焦磷酸轉(zhuǎn)移酶,使鳥苷四磷酸PPGPP大量合成,PPGPP的出現(xiàn)會關(guān)閉許多基因除PPGPP外,實施應(yīng)急反應(yīng)的額信號還有鳥苷五磷酸PPPGPP它們的作用十分廣泛,影響一大批操縱子,是基因轉(zhuǎn)錄的超級調(diào)控因子。15亮氨酸的影響亮氨酸通過亮氨酸反應(yīng)蛋白LRP對基因表達的激活或阻遏起調(diào)節(jié)作用，某些亮氨酸影響基因表達的操縱子，外加丙氨酸也有類似效果。

簡介：1從時間生物學(xué)探討內(nèi)科住院病人死亡節(jié)律從時間生物學(xué)探討內(nèi)科住院病人死亡節(jié)律陳進洪永敦冼紹祥提要回顧性分析了973例內(nèi)科住院病例死亡的時間節(jié)律。結(jié)果表明，一天24小時中，死亡高峰在下半夜及中午,上半夜最低；一年四季冬春季死亡最高，夏季最低，基本符合中醫(yī)學(xué)陰陽學(xué)說及當(dāng)代生物鐘理論。主題詞時間生物學(xué)醫(yī)院死亡率時間因素季節(jié)我們通過對廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院1990～1998年9年間973例內(nèi)科住院死亡病例的回顧，希望從時間生物學(xué)角度分析病人的死亡節(jié)律，掌握疾病死亡規(guī)律特點，提高治療效果，降低病死率，結(jié)果報道如下。1臨床資料臨床資料11一般資料廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院1990～1998年9月間內(nèi)科住院病人死亡共973例，占同期住院總數(shù)392％；其中男576例，占592％，女397例，占408％；死亡平均年齡為68歲。12死亡病因死于心腦血管疾病者426例，占438％；呼吸系統(tǒng)疾病234例，占241％；血液系統(tǒng)疾病158例，占162％；代謝內(nèi)分泌疾病81例，占83％；其他疾病74例，占76％。13死亡時間3的影響。一般疾病，大多是白天病情較輕，夜晚較重。這是由于早晨、中午、黃昏、夜半，人體的陽氣存在著生、長、收、藏的變化。本組死亡病人節(jié)律變化表明，子夜時分正值陰陽交替之時，陽氣收藏，陰氣漸盛，故死亡人數(shù)最多。然從本組病人死亡節(jié)律來看，死亡高峰除子夜外，正午之時死亡病人居第二位。22死亡與季節(jié)的關(guān)系地球圍繞太陽公轉(zhuǎn)而形成的季節(jié)氣候的節(jié)律常用“年生物鐘”或“年周期”表示。本組資料表明，一年四季中，以冬季春季病死率為高，尤以12月至次年1、2月份為甚。按現(xiàn)代時間生物學(xué)觀點分析，冬春兩季氣溫偏低，人體經(jīng)常處于拘束狀態(tài)，氣壓較高，血液流向體表時受到外界壓力的阻力大，機體不能作出相應(yīng)調(diào)節(jié)，出現(xiàn)生物節(jié)律紊亂，從而導(dǎo)致病人死亡。此外，某些慢性疾病，往往亦會在氣候劇變或季節(jié)交換的時候發(fā)作或增劇，如胸痹、哮喘等，也會導(dǎo)致病人死亡增加。醫(yī)務(wù)人員要了解時間生物學(xué)提供的節(jié)律信息，對危重病人嚴(yán)加監(jiān)護，減少內(nèi)外有害因子對病人的刺激，提高病人的應(yīng)激能力；選擇最佳的醫(yī)療時機如服藥次數(shù)、手術(shù)時間，從而減輕病人的痛苦，提高療效，降低死亡率。陳進（廣東省陽江市人民醫(yī)院，陽江市東山南路14號529500）

簡介：1生物化學(xué)與分子生物學(xué)重點生物化學(xué)與分子生物學(xué)重點第二章第二章蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能一、氨基酸一、氨基酸1．結(jié)構(gòu)特點氨基酸AMINOACID是蛋白質(zhì)分子的基本組成單位。構(gòu)成天然蛋白質(zhì)分子的氨基酸約有20種，除脯氨酸為Α亞氨基酸、甘氨酸不含手性碳原子外，其余氨基酸均為LΑ氨基酸。2．分類根據(jù)氨基酸的R基團的極性大小可將氨基酸分為四類①非極性中性氨基酸8種；②極性中性氨基酸7種；③酸性氨基酸GLU和ASP；④堿性氨基酸LYS、ARG和HIS。二、二、肽鍵與肽鏈肽鍵與肽鏈肽鍵PEPTIDEBOND是指由一分子氨基酸的Α羧基與另一分子氨基酸的Α氨基經(jīng)脫水而形成的共價鍵CONH。氨基酸分子在參與形成肽鍵之后，由于脫水而結(jié)構(gòu)不完整，稱為氨基酸殘基。每條多肽鏈都有兩端即自由氨基端N端與自由羧基端C端，肽鏈的方向是N端→C端。三、肽鍵平面三、肽鍵平面肽單位肽單位肽鍵具有部分雙鍵的性質(zhì)，不能自由旋轉(zhuǎn)；組成肽鍵的四個原子及其相鄰的兩個Α碳原子處在同一個平面上，為剛性平面結(jié)構(gòu)，稱為肽鍵平面。四、蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)四、蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)可人為分為一級、二級、三級和四級結(jié)構(gòu)等層次。一級結(jié)構(gòu)為線狀結(jié)構(gòu)，二、三、四級結(jié)構(gòu)為空間結(jié)構(gòu)。1．一級結(jié)構(gòu)指多肽鏈中氨基酸的排列順序，其維系鍵是肽鍵。蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)決定其空間結(jié)構(gòu)。2．二級結(jié)構(gòu)指多肽鏈主鏈骨架盤繞折疊而形成的構(gòu)象，借氫鍵維系。主要有以下幾種類型⑴Α螺旋其結(jié)構(gòu)特征為①主鏈骨架圍繞中心軸盤繞形成右手螺旋；②螺旋每上升一圈是36個氨基酸殘基，螺距為054NM；③相鄰螺旋圈之間形成許多氫鍵；④側(cè)鏈基團位于螺旋的外側(cè)。影響Α螺旋形成的因素主要是①存在側(cè)鏈基團較大的氨基酸殘基；②連續(xù)存在帶相同電荷的氨基酸殘基；③存在脯氨酸殘基。⑵Β折疊其結(jié)構(gòu)特征為①若干條肽鏈或肽段平行或反平行排列成片；②所有肽鍵的CO和NH形成鏈間氫鍵；③側(cè)鏈基團分別交替位于片層的上、下方。⑶Β轉(zhuǎn)角多肽鏈180°回折部分，通常由四個氨基酸殘基構(gòu)成，借1、4殘基之間形成氫鍵維系。⑷無規(guī)卷曲主鏈骨架無規(guī)律盤繞的部分。3．三級結(jié)構(gòu)指多肽鏈所有原子的空間排布。其維系鍵主要是非共價鍵（次級鍵）氫鍵、疏水鍵、范德華力、離子鍵等，也可涉及二硫鍵。4．四級結(jié)構(gòu)指亞基之間的立體排布、接觸部位的布局等，其維系鍵為非共價鍵。亞基是指參與構(gòu)成蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)的而又具有獨立三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈。五、五、蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)1．兩性解離與等電點蛋白質(zhì)分子中仍然存在游離的氨基和游離的羧基，因此蛋白質(zhì)與氨基酸一樣具有兩性解離的性質(zhì)。蛋白質(zhì)分子所帶正、負(fù)電荷相等時溶液的PH值稱為蛋白質(zhì)的等電點。2．蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)蛋白質(zhì)具有親水溶膠的性質(zhì)。蛋白質(zhì)分子表面的水化膜和表面電荷是穩(wěn)定蛋白質(zhì)親水溶膠的兩個重要因素。3核苷酸是由核苷與磷酸經(jīng)脫水縮合后生成的磷酸酯類化合物，包括核糖核苷酸和脫氧核糖核酸兩大類。最常見的核苷酸為5’核苷酸（5’常被省略）。5’核苷酸又可按其在5’位縮合的磷酸基的多少，分為一磷酸核苷（核苷酸）、二磷酸核苷和三磷酸核苷。此外，生物體內(nèi)還存在一些特殊的環(huán)核苷酸，常見的為環(huán)一磷酸腺苷（CAMP）和環(huán)一磷酸鳥苷（CGMP），它們通常是作為激素作用的第二信使。核苷酸通常使用縮寫符號進行命名。第一位符號用小寫字母D代表脫氧，第二位用大寫字母代表堿基，第三位用大寫字母代表磷酸基的數(shù)目，第四位用大寫字母P代表磷酸。三、核酸的一級結(jié)構(gòu)三、核酸的一級結(jié)構(gòu)核苷酸通過3’,5’磷酸二酯鍵連接起來形成的不含側(cè)鏈的多核苷酸長鏈化合物就稱為核酸。核酸具有方向性，5’位上具有自由磷酸基的末端稱為5’端，3’位上具有自由羥基的末端稱為3’端。DNA由DAMP、DGMP、DCMP和DTMP四種脫氧核糖核苷酸所組成。DNA的一級結(jié)構(gòu)就是指DNA分子中脫氧核糖核苷酸的種類、數(shù)目、排列順序及連接方式。RNA由AMP，GMP，CMP，UMP四種核糖核苷酸組成。RNA的一級結(jié)構(gòu)就是指RNA分子中核糖核苷酸的種類、數(shù)目、排列順序及連接方式。四、四、DNADNA的二級結(jié)構(gòu)的二級結(jié)構(gòu)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)是DNA二級結(jié)構(gòu)的一種重要形式，它是WATSON和CRICK兩位科學(xué)家于1953年提出來的一種結(jié)構(gòu)模型，其主要實驗依據(jù)是CHARGAFF研究小組對DNA的化學(xué)組成進行的分析研究，即DNA分子中四種堿基的摩爾百分比為AT、GC、AGTC（CHARGAFF原則），以及由WILKINS研究小組完成的DNA晶體X線衍射圖譜分析。天然DNA的二級結(jié)構(gòu)以B型為主，其結(jié)構(gòu)特征為①為右手雙螺旋，兩條鏈以反平行方式排列；②主鏈位于螺旋外側(cè)，堿基位于內(nèi)側(cè)；③兩條鏈間存在堿基互補，通過氫鍵連系，且AT、GC（堿基互補原則）；④螺旋的穩(wěn)定因素為氫鍵和堿基堆砌力；⑤螺旋的螺距為34NM，直徑為2NM。五、五、DNADNA的超螺旋結(jié)構(gòu)的超螺旋結(jié)構(gòu)雙螺旋的DNA分子進一步盤旋形成的超螺旋結(jié)構(gòu)稱為DNA的三級結(jié)構(gòu)。絕大多數(shù)原核生物的DNA都是共價封閉的環(huán)狀雙螺旋，其三級結(jié)構(gòu)呈麻花狀。在真核生物中，雙螺旋的DNA分子圍繞一蛋白質(zhì)八聚體進行盤繞，從而形成特殊的串珠狀結(jié)構(gòu)，稱為核小體。核小體結(jié)構(gòu)屬于DNA的三級結(jié)構(gòu)。六、六、DNADNA的功能的功能DNA的基本功能是作為遺傳信息的載體，為生物遺傳信息復(fù)制以及基因信息的轉(zhuǎn)錄提供模板。DNA分子中具有特定生物學(xué)功能的片段稱為基因（GENE）。一個生物體的全部DNA序列稱為基因組（GENOME）?；蚪M的大小與生物的復(fù)雜性有關(guān)。七、七、RNARNA的空間結(jié)構(gòu)與功能的空間結(jié)構(gòu)與功能RNA分子的種類較多，分子大小變化較大，功能多樣化。RNA通常以單鏈存在，但也可形成局部的雙螺旋結(jié)構(gòu)。1．MRNA的結(jié)構(gòu)與功能MRNA是單鏈核酸，其在真核生物中的初級產(chǎn)物稱為HNRNA。大多數(shù)真核成熟的MRNA分子具有典型的5’端的7甲基鳥苷三磷酸（M7GTP）帽子結(jié)構(gòu)和3’端的多聚腺苷酸POLYA尾巴結(jié)構(gòu)。MRNA的功能是為蛋白質(zhì)的合成提供模板，分子中帶有遺傳密碼。MRNA分子中每三個相鄰的核苷酸組成一組，在蛋白質(zhì)翻譯合成時代表一個特定的氨基酸，這種核苷酸三聯(lián)體稱為遺傳密碼（CODEN）。2．TRNA的結(jié)構(gòu)與功能TRNA是分子最小，但含有稀有堿基最多的RNA。TRNA的二級結(jié)構(gòu)由于局部雙螺旋的形成而表現(xiàn)為“三葉草”形，故稱為“三葉草”結(jié)構(gòu)，可分為五個部分①氨基酸臂由TRNA的5’端和3’端構(gòu)成的局部雙螺旋，3’端都帶有CCAOH順序，可與氨基酸結(jié)合而攜帶氨

簡介：1微生物學(xué)微生物學(xué)陳向東第1章緒論緒論三、微生物與我們微生物無處不在，我們無時不生活在“微生物的海洋”中。?細(xì)菌數(shù)億/G土壤，土壤中的細(xì)菌總重量估計為100341012噸；?每張紙幣帶細(xì)菌900萬個；萬個；?人體體表及體內(nèi)存在大量的微生物皮膚表面平均10萬個細(xì)菌/平方厘米；口腔細(xì)菌種類超過500種；腸道微生物總量達100萬億，糞便干重的1/3是細(xì)菌，每克糞便的細(xì)菌總數(shù)為1000億個；?每個噴嚏的飛沫含4500個細(xì)菌，重感冒患者為8500萬；時時刻刻與微生物“共舞”時時刻刻與微生物“共舞”是禍?zhǔn)堑準(zhǔn)歉８Ｎ⑸锛仁侨祟惖臄橙?，更是人類的朋友微生物既是人類的敵人，更是人類的朋友微生物是人類的朋友微生物是人類的朋?微生物是自然界物質(zhì)循環(huán)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)；微生物是自然界物質(zhì)循環(huán)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)；?體內(nèi)的正常菌群是人及動物健康的基本保證；體內(nèi)的正常菌群是人及動物健康的基本保證；幫助消化、提供必需的營養(yǎng)物質(zhì)、組成生理屏障?微生物可以為我們提供很多有用的物質(zhì)；微生物可以為我們提供很多有用的物質(zhì)；有機酸、酶、各種藥物、疫苗、面包、奶酪、啤酒、醬油等等?基因工程為代表的現(xiàn)代生物技術(shù)；基因工程為代表的現(xiàn)代生物技術(shù)；少數(shù)微生物也是人類的敵人少數(shù)微生物也是人類的敵人鼠疫；天花；艾滋?。化偱２?；埃博拉病毒；可以說，微生物與人類關(guān)系的重要性，你怎么強調(diào)都不過分，微生物是一把十分鋒利的雙刃劍，它們在給人類帶來巨大利益的同時也帶來“殘忍”的破壞。它給人類帶來的利益不僅是享受，而且實際上涉及到人類的生存?！霸诮茖W(xué)中，對人類福利最大的一門科學(xué)，要算是微生物學(xué)了。”日本學(xué)者尾形學(xué)在“家畜微生物學(xué)”（1977）31、在每一相同病例中都出現(xiàn)這種微生物；2、要從寄主分離出這樣的微生物并在培養(yǎng)基中培養(yǎng)出來；3、用這種微生物的純培養(yǎng)接種健康而敏感的寄主，同樣的疾病會重復(fù)發(fā)生；4、從試驗發(fā)病的寄主中能再度分離培養(yǎng)出這種微生物來。（三）微生物學(xué)發(fā)展過程中的重大事件（見講義P4表11微生物學(xué)發(fā)展中的重大事件）?1890VONBEHRING制備抗毒素治療白喉和破傷風(fēng)；?1892IVANOVSKY提供煙草花葉病毒是由病毒引起的證據(jù)；?1928GRIFFITH發(fā)現(xiàn)細(xì)菌轉(zhuǎn)化；對其機理的研究導(dǎo)致DNA是遺傳物質(zhì)的確證；外源遺傳物質(zhì)導(dǎo)入各種細(xì)胞的基因重組技術(shù)的建立；?1929FLEMING發(fā)現(xiàn)青霉素；?1944AVERY等證實轉(zhuǎn)化過程中DNA是遺傳信息的載體；?1953WATSON和CRICK提出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)；?1970～1972ARBER、SMITH和NATHANS發(fā)現(xiàn)并提純了DNA限制性內(nèi)切酶?1977WOESE提出古生菌是不同于細(xì)菌和真核生物的特殊類群SANGER首次對F174噬菌體DNA進行了全序列分析；?1982～1983PRUSINER發(fā)現(xiàn)朊病毒PRION；?1983～1984MULLIS建立PCR技術(shù)；?1995第一個獨立生活的細(xì)菌流感嗜血桿菌全基團組序列測定完成；?1996第一個自養(yǎng)生活的古生菌基因組測定完成；?1997第一個真核生物啤酒酵母基因組測序完成；（四）20世紀(jì)的微生物學(xué)十九世紀(jì)末到二十世紀(jì)中期微生物學(xué)鑒定病原菌、研究免疫學(xué)及其在預(yù)防疾病中的作用、尋找化學(xué)治療藥物、分析微生物的化學(xué)活性。普通生物學(xué)細(xì)胞的構(gòu)造及其在繁殖和發(fā)展中的作用、植物和動物的遺傳和進化的機制。動、植物動、植物的生命活動規(guī)律的生命活動規(guī)律適用于結(jié)構(gòu)大大簡單的微生物適用于結(jié)構(gòu)大大簡單的微生物肌肉的糖酵解酵母菌乙醇發(fā)酵本質(zhì)上的同一性

簡介：第二章1．想想核酸的A260為什么會下降肯定是形成雙螺旋結(jié)構(gòu)引起的。那為什么相同序列的核酸，RNA的A260下降，DNA的A260不變這說明RNA能形成雙鏈，DNA不能。那么，為什么RNA能形成雙鏈呢原因肯定就在RNA和DNA序列上不同的堿基U和T上面。U和T的含義完全一樣，差別在于RNA分子上的U可以和G配對，而DNA分子上的T不能和G配對。如果這時候能想到這一點，題目的答案也就有了。本題正確的答案是1個核酸的A260主要是4個堿基的Π電子。當(dāng)一個核酸是單鏈的時候，Π電子能吸收較大的光；但核酸為雙鏈的時候，堿基對的堆積效應(yīng)使Π電子吸收較少的光。于是，題目中的數(shù)據(jù)告訴我們，第一種序列的DNA和RNA在二級結(jié)構(gòu)上沒有什么大的差別。而對于第二種序列的RNA光吸收大幅度減少，意味著RNA形成了某種雙鏈二級結(jié)構(gòu)，RNA二級結(jié)構(gòu)的一個常見的特征是G和U能夠配對。從第二種序列不難看出，它能夠自我配對，形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，而降低光吸收。2．RNA的小溝淺而寬，允許接近堿基邊緣。2′－OH位于小溝，提供氫鍵供體和受體，起穩(wěn)定作用。GU搖擺堿基對讓G的氨基N2位于小溝，能夠與蛋白質(zhì)相互作用（如在TRNAALA和同源的氨酰－TRNA合成酶之間）。3．（1）核酶由RNA組成，所以一定是RNA雙螺旋，為A型。（2）序列交替出現(xiàn)嘌呤和嘧啶，應(yīng)該是Z型雙螺旋。（3）既然是DNA，在上述濕度條件下，要么是B型，要么是Z型。由于B型比Z型更緊密（螺距比Z型短，每個螺旋單位長度具有更多的電荷，相同數(shù)目堿基對的總長度要短）。因此，1號一定是B型，2號為Z型DNA。4．（1）（2）ARG（3）ASN和GLN5．使用DUTP代替DTTP并不能改變DNA雙螺旋的結(jié)構(gòu)。T和U的差別只是在T嘧啶環(huán)上是否有一個甲基，這個甲基位于雙螺旋的大溝之中。如果用2′－OH取代2′－H，則合成出來的是RNA，于是螺旋變成A－型。多出來的羥基產(chǎn)生空間位阻，致使RNA無法形成B－型雙螺旋。6．AT堿基對只有2個氫鍵，容易斷裂，從而容易與溶液中的重氫發(fā)生交換。第三章1．K值是指某一物質(zhì)染色體的數(shù)目，N值是指某一物質(zhì)基因的數(shù)目。3．（1）RNA既可以充當(dāng)遺傳物質(zhì)，又可以作為核酶；（2）先有核苷酸，后有脫氧核苷酸；（3）先有尿苷酸后有胸苷酸。5．這種突變將使游離的Σ因子和RNA聚合酶全酶競爭性結(jié)合啟動子，從而競爭性抑制RNA聚合酶全酶與啟動子的結(jié)合，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄的起始受到抑制。最后的結(jié)果有可能是致命的。第八章1．（1）Γ；（2）Β或Γ；（3）Α。2．略3．略4．節(jié)省時間，有利于在較短的時間內(nèi)大量表達，以保持與DNA復(fù)制的同步。5．（1）轉(zhuǎn)錄照樣起始，但RNA因不能形成帽子，穩(wěn)定性下降，還在轉(zhuǎn)錄的時候就有可能發(fā)生降解。（2）轉(zhuǎn)錄可以完成，但轉(zhuǎn)錄物不能形成POLYA尾部，這樣的MRNA不能運輸出細(xì)胞核，而且穩(wěn)定性下降，容易被降解。（3）轉(zhuǎn)錄可以完成，但RNA前體不能剪接，也不能被運輸出細(xì)胞核。（4）所有的S/T都突變成ALA意味著CTD完全不能進行磷酸化，結(jié)果必然是無轉(zhuǎn)錄的延伸和轉(zhuǎn)錄的后加工。第九章1．略2．略3．TYR比PHE多出的基團是1個羥基，故可以通過作為氫鍵供體或受體形成氫鍵而得到很大結(jié)合能。而ILE－TRNA合成酶僅僅是疏水的，在形狀上與ILE很像，在底物和蛋白質(zhì)之間無特異性的化學(xué)鍵。范德華力既弱，又沒有方向性，而氫鍵既有方向性，又較強。所以，TYR－TRNA合成酶很容易識別PHE和TYR之間的差別，也就不需要額外的校對位點了。4．略5．略6．略7．略第十章1．在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)剪接照樣能夠發(fā)生。2．略3．略4．因為在細(xì)胞分裂的時候，細(xì)胞核發(fā)生解體，在重新形成細(xì)胞核的時候，需要信號序列的幫助，方可讓蛋白質(zhì)回到細(xì)胞核內(nèi)。5．有利于將翻譯和定向分揀偶聯(lián)在一起；方便后來的切除。6．過氧化物酶體內(nèi)是一種氧化的環(huán)境，蛋白質(zhì)在進入它之前事先折疊后有利于其正確的折疊和結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。第十一章1．乳糖操縱子的正調(diào)控機制將變得多余，從而導(dǎo)致葡萄糖效應(yīng)減弱甚至喪失。2．溶原階段的轉(zhuǎn)錄物3′－端僅含有INT的閱讀框架，不會形成被RNA酶識別的降解信號。3．（1），（4），（5）4．略第十二章1．略2．（1）通過異源二聚化可以增加細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子組合的數(shù)目。（2）通過二聚體化的調(diào)節(jié)可以增加調(diào)節(jié)它們與DNA結(jié)合的機會。

簡介：1干細(xì)胞生物學(xué)干細(xì)胞生物學(xué)一、緒論；干細(xì)胞概述；干細(xì)胞增殖、分化與調(diào)控；一、緒論；干細(xì)胞概述；干細(xì)胞增殖、分化與調(diào)控；1、干細(xì)胞、干細(xì)胞（STEMCELLS，SCS）是機體在整個生命期中具有自我更新、增殖能力和分化潛能的未分化細(xì)胞群。干細(xì)胞群的功能是控制和維持細(xì)胞、組織、器官的再生及生命體的相對穩(wěn)態(tài)。2、干細(xì)胞生物學(xué)、干細(xì)胞生物學(xué)（STEMCELLBIOLOGY）是以干細(xì)胞為研究對象，應(yīng)用現(xiàn)代物理學(xué)、化學(xué)和實驗生物學(xué)技術(shù)、方法，從顯微、亞顯微、分子水平等多層次研究干細(xì)胞的發(fā)生、發(fā)育、分化等生命活動機制、規(guī)律以及應(yīng)用的一門新興科學(xué)。簡單說，研究干細(xì)胞及其生物學(xué)特性的科學(xué)稱干細(xì)胞生物學(xué)。3、干細(xì)胞生物學(xué)研究內(nèi)容、干細(xì)胞生物學(xué)研究內(nèi)容?1基因治療?2干細(xì)胞生物工程，細(xì)胞、組織、器官移植治療?3研究胚胎發(fā)生、發(fā)育機制、組織細(xì)胞分化、基因表達調(diào)控?4新型生物材料工程、新藥的研制、開發(fā)與藥效、毒性評估?5基因嫁接與物種改良、轉(zhuǎn)基因動物?6做實驗平臺進行疾病發(fā)病學(xué)研究?7新基因發(fā)掘、基因功能分析?8制造新物種4、生物經(jīng)濟與第四次浪潮、生物經(jīng)濟與第四次浪潮在信息經(jīng)濟時代進入成熟階段之前，生物經(jīng)濟即在孕育，但其孕育期遠(yuǎn)長于信息經(jīng)濟時代的孕育期。以1953年弗蘭西斯克拉克（FRANCISCRICK）和詹姆斯沃森（JAMESWATSON）發(fā)現(xiàn)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)為標(biāo)志，生物經(jīng)濟時代進入孕育階段。人類基因組破譯的完成和發(fā)表標(biāo)志著孕育階段的終結(jié)，當(dāng)前人類社會已進入生物經(jīng)濟的成長階段1。正如只有當(dāng)信息經(jīng)濟發(fā)展到成熟階段才能稱為進入信息經(jīng)濟時代一樣，只有當(dāng)生物經(jīng)濟進入其成熟階段，才可以稱為進入了生物經(jīng)濟時代。5、干細(xì)胞分類、干細(xì)胞分類21根據(jù)發(fā)育階段分為二類211胚胎干細(xì)胞212成體干細(xì)胞22按其分化潛能，分為三類221全能干細(xì)胞2221三胚層多能干細(xì)胞2222單胚層多能干細(xì)胞223單能干細(xì)胞23根據(jù)發(fā)生、來源分為四類231胚胎干細(xì)胞232胎兒干細(xì)胞233成體干細(xì)胞234人造干細(xì)胞2341核移植干細(xì)胞2342細(xì)胞融合雜交干細(xì)胞2343基因改造干細(xì)胞25根據(jù)組織性質(zhì)分類251上皮組織干細(xì)胞252結(jié)締組織干細(xì)胞253肌肉組織干細(xì)胞254神經(jīng)組織干細(xì)胞255器官組織干細(xì)胞256胚胎組織干細(xì)胞257腫瘤組織干細(xì)胞26根據(jù)發(fā)育進程分類261干細(xì)胞262短暫增殖細(xì)胞263祖細(xì)胞6、干細(xì)胞特點、干細(xì)胞特點干細(xì)胞本身不是處于分化途徑的終端；332根據(jù)個體克隆對象個體克隆對象分類分為動物克隆、植物克隆等2種類型。33根據(jù)供體細(xì)胞來源供體細(xì)胞來源分類分為同種胚胎細(xì)胞克隆、同種成體細(xì)胞克隆、異種胚胎細(xì)胞克隆、異種成體細(xì)胞克隆等4種類型。34根據(jù)克隆應(yīng)用目的克隆應(yīng)用目的分類分為治療性克隆、生殖性克隆或繁殖性克隆、克隆人等2種類型。國際人類基因組倫理委員會國際人類基因組倫理委員會關(guān)于克隆的聲明，將克隆分為生殖性克隆、基礎(chǔ)性研究和治療性克隆3類。分子克隆分子克隆指利用DNA重組技術(shù)將特定基因或DNA序列插入載體以獲得大量相同基因DNA序列的過程；細(xì)胞克隆細(xì)胞克隆指由一個單一的共同祖先細(xì)胞分裂所形成的一個細(xì)胞群體即細(xì)胞克?。粋€體克隆個體克隆指基因型完全相同的2個或更多個體組成的一個群體，也可指代群體中的一個個體。4、核移植、核移植利用顯微操作儀將外源細(xì)胞的核移入去核卵母細(xì)胞或其它具有重編程（REPROGRAMMING）能力的細(xì)胞中，經(jīng)人工活化以及體內(nèi)或體外培養(yǎng)后如果目的是克隆出一個人胚胎獲取全能干細(xì)胞，然后利用干細(xì)胞誘導(dǎo)、分化獲得各種組織特異性細(xì)胞、組織甚至器官移植以治療疾病的則稱為治療性克隆THERAPEUTICCLONING；如果目的是為了克隆出一個人的胚胎而移植入代孕母體發(fā)育為含有與供體細(xì)胞相同遺傳物質(zhì)的個體則稱為生殖性克隆（REPRODUCTIVECLONING）。5、治療性克隆、治療性克隆治療性克隆是指通過核移植技術(shù)構(gòu)建來源于病人成體細(xì)胞的胚胎，待胚胎發(fā)育至胚泡階段后取出內(nèi)細(xì)胞團，在體外培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞，然后定向誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化成病人所需要的細(xì)胞類型，再移植回病人身上；或通過組織工程構(gòu)建病人所需要的組織或器官，移植給病人，來替代或補充病變或受到損傷的細(xì)胞、組織或器官，從而實現(xiàn)對疾病的治療。6、細(xì)胞核重編程、細(xì)胞核重編程細(xì)胞核重編程細(xì)胞核重編程使在正常胚胎發(fā)育中表達、而在成體細(xì)胞中被關(guān)閉的基因重新激活、供體細(xì)胞核完全恢復(fù)全能性的過程稱為細(xì)胞核重編程。外生性重編程機制體細(xì)胞核轉(zhuǎn)移入卵細(xì)胞后在外生性重編程序中可能受到影響的機制有DNA甲基化、基因“印記”、X染色體的失活、染色質(zhì)的重新塑造、組蛋白的變更、端粒體的維持以及外生標(biāo)記的遺傳傳遞等。7、生命起點的科學(xué)爭論、生命起點的科學(xué)爭論科學(xué)的爭論人胚胎干細(xì)胞創(chuàng)造胚胎干細(xì)胞在一個完整的鏈條中，通過每一個母親的卵子都可追溯到30億年前地球表面的第一個細(xì)胞。精子和卵子相遇的那一刻，為生命提供了一個浪漫的起點，但事實上那一刻相當(dāng)模糊。如果DNA結(jié)合是一個標(biāo)志性事件，那么就不能說生命的起點在受精的那一刻。從生物學(xué)的觀點看，受精不足以作為新生命的標(biāo)志。直到大約第14天，胚泡有了分裂形成孿生的能力。我們不習(xí)慣看著一個人分裂成兩個。第8周腦開始成形。感覺能力是否可以作為生命開始的有用的標(biāo)志呢這或許也是生命結(jié)束的很好分界點。三、成體干細(xì)胞概述成體干細(xì)胞概述、上皮組織干細(xì)胞上皮組織干細(xì)胞、結(jié)締組織干細(xì)胞結(jié)締組織干細(xì)胞、肌肉組織干細(xì)胞肌肉組織干細(xì)胞1、成體干細(xì)胞、成體干細(xì)胞（ADULTADULTSTEMSTEMCELLSCELLS，ASCSASCS）是指存在于胎兒、兒童和成人已經(jīng)分化的各）是指存在于胎兒、兒童和成人已經(jīng)分化的各組織器官中尚未分化的、具有自我更新潛能并負(fù)有構(gòu)建和補充組織各種類型細(xì)胞的細(xì)胞組織器官中尚未分化的、具有自我更新潛能并負(fù)有構(gòu)建和補充組織各種類型細(xì)胞的細(xì)胞群，又名組織干細(xì)胞（群，又名組織干細(xì)胞（TISSUETISSUESTEMSTEMCELLSCELLS）、體細(xì)胞干細(xì)胞（）、體細(xì)胞干細(xì)胞（SOMATICSOMATICSTEMSTEMCELLSCELLS）。）。2、成體干細(xì)胞來源、分布、分類、成體干細(xì)胞來源、分布、分類2121細(xì)胞來源細(xì)胞來源①胚胎細(xì)胞由胚胎干細(xì)胞定向分化，或移植分化而成；胚胎細(xì)胞由胚胎干細(xì)胞定向分化，或移植分化而成；

簡介：醫(yī)學(xué)免疫學(xué)與病原生物學(xué)第1頁共9頁中醫(yī)藥共享資源2011年1月9日醫(yī)學(xué)免疫學(xué)與病原生物學(xué)第一篇醫(yī)學(xué)免疫學(xué)1、固有免疫又稱先天性免疫或非特異性免疫，是在長期種系進化過程中形成的無針對性的防御功能。2、固有免疫3個特點①非特異性、②可遺傳性、③效應(yīng)恒定性。3、固有免疫3個組成①組織屏障作用、②免疫細(xì)胞的非特異性作用、③體液因子的作用。4、適應(yīng)性免疫又稱獲得性免疫或特異性免疫，是在機體與抗原物質(zhì)接觸后獲得的有針對性的防御功能。5、適應(yīng)性免疫3個特點①特異性、②習(xí)得性、③效應(yīng)遞增性。6、免疫系統(tǒng)的功能①免疫防御是指機體排斥外源性抗原的能力。②免疫自穩(wěn)是指機體識別和清除自身衰老殘損組織的能力。③免疫監(jiān)視是指機體殺傷和清除異常突變細(xì)胞的能力。7、中樞淋巴器官是各種免疫細(xì)胞發(fā)生分化成熟的場所。①胸脅T細(xì)胞分化成熟的場所。②骨髓B細(xì)胞分化成熟的場所。8、外周淋巴器官包括淋巴結(jié)、脾臟、黏膜相關(guān)淋巴組織。①淋巴結(jié)T、B細(xì)胞定居的場所、免疫應(yīng)答發(fā)生的場所、過濾作用（微生物、毒素、癌細(xì)胞、大分子物質(zhì)）。②脾臟T、B細(xì)胞定居的場所、免疫應(yīng)答發(fā)生的場所、過濾作用（突變細(xì)胞、衰老細(xì)胞）。③相關(guān)淋巴組織是人體重要的一道防線。9、免疫細(xì)胞淋巴細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、粒細(xì)胞與肥大細(xì)胞。10、抗原（AG）指能和T、B細(xì)胞受體（TCR\BCR）結(jié)合，啟動免疫應(yīng)答并能與相應(yīng)免疫應(yīng)答產(chǎn)物（抗體或效應(yīng)細(xì)胞）在體內(nèi)發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)，又稱免疫原。11、免疫原性指抗原能夠刺激機體產(chǎn)生抗體或致病淋巴細(xì)胞的能力。12、免疫反應(yīng)性指抗原能夠刺激機體產(chǎn)生抗體或致病淋巴細(xì)胞的能力。13、半抗原僅有免疫反應(yīng)性的物質(zhì)。14、完全抗原具備免疫原性和免疫反應(yīng)性的物質(zhì)，可由半抗原與蛋白載體交聯(lián)而成。15、抗原決定簇決定抗原特異性的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)或化學(xué)基團，是抗原特異性的物質(zhì)基礎(chǔ)，又稱抗原表位。16、交叉反應(yīng)是指抗體不僅與其誘生抗原發(fā)生特異性結(jié)合，也可與某些非誘生抗原發(fā)生特異性結(jié)合的現(xiàn)象。17、抗原的分類①根據(jù)抗原刺激B細(xì)胞產(chǎn)生抗體是否需要T細(xì)胞的輔助分類T細(xì)胞依賴性抗原是指需在APC及TH參與下才能激活B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的抗原。T細(xì)胞非依賴性抗原是指刺激B細(xì)胞產(chǎn)生抗體時不需要TH輔助的抗原。②根據(jù)抗原與機體的親緣關(guān)系分類異種抗原指來自于另一物種的抗原性物種。如病原微生物、細(xì)菌外毒素類毒素、動物血清。同種異型抗原指同一種屬不同個體間所存在的抗原。如人類血型抗原、人白細(xì)胞抗原（HLA）。自身抗原指能引起自身免疫應(yīng)答的自身成分。如胚胎期從未與自身淋巴細(xì)胞接觸過的隔絕成分。（△）異嗜性抗原在不同種屬動物、植物、微生物細(xì)胞表面上存在的共同抗原，又稱FORSSMAN抗原。③根據(jù)抗原是否在APC內(nèi)合成內(nèi)源性抗原、外源性抗原。④根據(jù)抗原誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的作用移植抗原、腫瘤抗原、變應(yīng)原、過敏原、耐受原。⑤根據(jù)產(chǎn)生的方式天然抗原、人工合成抗原。⑥根據(jù)物理性質(zhì)顆粒性抗原、可溶性抗原。⑦根據(jù)化學(xué)性質(zhì)蛋白質(zhì)抗原、多糖抗原。18、免疫球蛋白（IG）的基本結(jié)構(gòu)①2條相同的重鏈、②2條相同的輕鏈、③二硫鍵。19、人類免疫球蛋白有5類IGM、IGD、IGG、IGA、IGE。20、FAB作用FAB段能與抗原結(jié)合，不過它是單價的，在體外條件下不能形成肉眼可見的結(jié)合反應(yīng)。21、免疫球蛋白的生物學(xué)活性與效應(yīng)①FAB段可特異性結(jié)合相應(yīng)抗原，有效阻斷抗原本身危害，體現(xiàn)其保護作用，被稱為中和作用。②FC段能夠與相應(yīng)細(xì)胞膜上的FC受體發(fā)生選擇性結(jié)合，并介導(dǎo)相應(yīng)免疫效應(yīng)的產(chǎn)生。22、各類免疫球蛋白的特點①IGG含量最多、半衰期最長、較強的抗感染中和毒素調(diào)理作用、唯一能通過胎盤的抗體、介導(dǎo)III型超敏反應(yīng)。②IGM分子量最大、天然血型抗體、出現(xiàn)最早的IG、抗感染的先鋒抗體、介導(dǎo)IIIII型超敏反應(yīng)。醫(yī)學(xué)免疫學(xué)與病原生物學(xué)第3頁共9頁中醫(yī)藥共享資源2011年1月9日化，以便提呈可供T細(xì)胞識別的抗原肽。47、共刺激分子CD40、CD80\CD86。CD40是B細(xì)胞活化第二信號的主要來源。48、激活共受體CD19\CD21\CD81\CD225復(fù)合體。成熟B細(xì)胞表面表達CD19。49、B細(xì)胞的亞群CD5B1細(xì)胞CD5B2細(xì)胞占BCELL比例51090參與固有免疫適應(yīng)性免疫分泌IG類型IGM＞IGGIGG＞IGM識別的抗原多糖類蛋白質(zhì)類50、NK細(xì)胞（自然殺傷細(xì)胞）是大顆粒淋巴細(xì)胞，直接殺傷某些腫瘤細(xì)胞、病毒感染的細(xì)胞。51、NK細(xì)胞的免疫生物學(xué)作用①抗感染、②抗腫瘤、③免疫調(diào)節(jié)作用。52、單核巨噬細(xì)胞生物學(xué)作用①抗原提呈、②天然防御、③炎癥反應(yīng)。53、免疫應(yīng)答適應(yīng)性免疫應(yīng)答是指機體免疫系統(tǒng)接受抗原刺激后，淋巴細(xì)胞特異性識別抗原（表位），發(fā)生活化、增殖、分化或失能、凋亡，進而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)的全過程，分為體液免疫和細(xì)胞免疫，都包括抗原識別階段、淋巴細(xì)胞活化階段、抗原清除階段。54、CD4T細(xì)胞活化的兩個信號①第一信號CD4T細(xì)胞接受外源性抗原肽與MHCII類分子形成的復(fù)合物。②第二信號CD4T細(xì)胞得到CD80等共刺激分子非特異性的共刺激信號。55、CD8T細(xì)胞活化的兩個信號①第一信號CD8T細(xì)胞接受內(nèi)緣性抗原肽與MHCI類分子形成的復(fù)合物。②第二信號CD80等共刺激分子、或CD4T細(xì)胞誘導(dǎo)靶細(xì)胞表達共刺激分子、或CD4T細(xì)胞直接刺激CD4T細(xì)胞。56、CD4T細(xì)胞的效應(yīng)CD4效應(yīng)T細(xì)胞（TH）可分泌IFNΓ、TNF及其他致炎因子，激活巨噬細(xì)胞并誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)。57、CD8T細(xì)胞的效應(yīng)CD8效應(yīng)T細(xì)胞（TC）可高效、特異性地殺傷胞內(nèi)寄生病原體（病毒、某些胞內(nèi)寄生菌等）的宿主細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等靶細(xì)胞，而不損害周圍正常組織。59、CD8效應(yīng)T細(xì)胞可通過多種機制殺傷靶細(xì)胞①穿孔素\顆粒酶途徑、②FAS\FASL途徑、③TNFTNFR方式。60、B細(xì)胞活化兩個信號①第一信號BCR直接識別TDAG。②第二信號由TH提供。61、抗原清除階段抗體是B細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答中唯一效應(yīng)物質(zhì)，由漿細(xì)胞分泌的抗體可通過中和作用、調(diào)理作用、ADCC及激活補體系統(tǒng)活性等，以清除抗原性異物。62、T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答又叫細(xì)胞免疫，B細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答又叫體液免疫。63、就抗感染免疫而言，細(xì)胞免疫可有效清除胞內(nèi)感染的病原體，體液免疫主要防御細(xì)胞外微生物感染及中和毒素。64、初次免疫應(yīng)答與再次免疫應(yīng)答初次免疫應(yīng)答抗原初次進入機體所產(chǎn)生的應(yīng)答。再次免疫應(yīng)答相同抗原再次進入抗體所產(chǎn)生的應(yīng)答。初次應(yīng)答再次應(yīng)答誘導(dǎo)期13周23天抗體效價（量）低高抗體持續(xù)時間端長抗體親和力低高抗體主要類別IGMIGG長效65、超敏反應(yīng)又叫特點常見病

簡介：學(xué)習(xí)必備歡迎下載微生物學(xué)教案微生物學(xué)教案第一章緒論一、微生物及微生物的特點1微生物微生物（MICROORGANISM,MICROBE）不是分類學(xué)上的名詞，而是指一切肉眼看不見或看不清、需要借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡才能觀察到的一切微小生物（＜01MM）的總稱。它們大多為單細(xì)胞，少數(shù)為多細(xì)胞，還包括一些沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物。非細(xì)胞結(jié)構(gòu)病毒，亞病毒因子（類病毒，衛(wèi)星病毒，衛(wèi)星RNA，朊病毒）NM（納米）級，微生物分子生物，電鏡下可見原核生物細(xì)菌（真細(xì)菌，古細(xì)菌），放線菌，藍細(xì)菌，支原體，衣原體，立細(xì)胞結(jié)構(gòu)克次氏體等ΜM（微米）級細(xì)胞生物，真核生物真菌（酵母菌，霉菌，蕈菌），原光鏡下可見生動物等在日常生活中，我們每個人對微生物都有過接觸并有一定的感性認(rèn)識。清新的空氣，可口的酸奶，美味的面包或饅頭，蘑菇、木耳，腐乳以及東北人愛吃的酸菜等，都使我們享受到微生物帶來的恩惠；當(dāng)因感冒或其他一些疾?。▊魅静。┦刮覀兪艿秸勰?，植物病害，夏天時菜飯變餿或臭（長毛），食品、衣服、皮革、器材等因受潮濕面霉?fàn)€時，便是微生物作怪，是有害的微生物侵蝕了機體；當(dāng)你患病時打針、吃藥，是抗生素在起作用；病愈時，則是微生物所產(chǎn)生的抗生素的奉獻。但如果高劑量的某種抗生素注入體內(nèi)，效果甚微或毫無效果時，則也是微生物的惡作劇病原微生物對藥物產(chǎn)生了抗性?？梢?，微生物與我們?nèi)粘Ｉ畹年P(guān)系是十分密切的。2微生物的特點在整個生物界中，各種生物體形的大小相差十分懸殊。植物界的一種紅杉可高達350M,動物界中的藍鯨可達34M長，而微生物體的長度一般都在ΜM和NM范圍內(nèi)。微生物由于其個體的微小性，給它們帶來了一系列顯然有別于高等生物的特征，從而也使微生物獲得了許多“生物界之最”的桂冠。（1）體積小，面積大（形態(tài)微小，結(jié)構(gòu)簡單））體積小，面積大（形態(tài)微小，結(jié)構(gòu)簡單）任何固定體積的物體，如對其進行三維切割，則切割的次數(shù)越多，其所產(chǎn)生的顆粒數(shù)就越多，每個顆粒的體積也就越小。任何物體被分割的越細(xì)小，其單位體積所占有的表面積就越大。若把某一物體單位體積所占有的表面積稱為比面值，則物體的體積越小，其比面值就越大，以球體的比面值為例表面積4ΠR23比面值體積4/3ΠR3R由上述公式可以推算出細(xì)胞半徑（R）為1ΜM的球菌，其比面值為3；半徑為2ΜM的，比面值為15；而半徑為3ΜM的，則比面值僅為1了。微生物的個體都極其微小。微生物學(xué)家通常使用的標(biāo)尺是微米（ΜM）或納米（NM）1ΜM1/1000MM1NM1/1000ΜM學(xué)習(xí)必備歡迎下載微生物對營養(yǎng)物質(zhì)吸收多，轉(zhuǎn)化快的特點為微生物的高速生長繁殖和合成大量代謝產(chǎn)物提供了充分的物質(zhì)基礎(chǔ)，從而使微生物能在自然界和人類實踐中更好地發(fā)揮其超小型“活的化工廠”的作用。（3）生長旺，繁殖快）生長旺，繁殖快微生物具有極高的生長和繁殖速度。已知ECOLI在合適的生長條件下，細(xì)胞分裂1次僅需125～20MIN。若按平均20MIN分裂1次計，則1H可分裂3次，每晝夜可分裂72次（代），最初的一個細(xì)菌可產(chǎn)生472210214萬億億個后代，總重量可達4722T。細(xì)菌比植物繁殖率快500倍，比動物繁殖率快2000倍。據(jù)報道，當(dāng)前全球的細(xì)菌總數(shù)約為51030個。事實上，由于營養(yǎng)、空間和代謝產(chǎn)物等條件的限制，微生物的幾何級數(shù)分裂速度充其量只能維持?jǐn)?shù)小時而已。一般在液體培養(yǎng)時，細(xì)菌細(xì)胞的濃度通常不超過108～109個/ML。由于繁殖快，微生物的數(shù)量最多，如肥沃的根圈土壤中，每克土可有微生物幾億到幾十億個；即使在不適于微生物生長的空氣中（街道空氣），每立方米可含有微生物幾千上萬個。土壤為微生物的大本營，細(xì)菌（數(shù)億/G）＞放線菌（孢子數(shù)千萬/G）＞霉菌（孢子數(shù)百萬/G）＞酵母菌（數(shù)十萬/G）。人腸道中聚居100～400種微生物，為腸道正常菌群，總數(shù)達100萬億左右。蒼蠅全身攜帶5億多細(xì)菌（臟）。平均每張紙幣上有900萬細(xì)菌（成都）。一般人的每個噴嚏有1～2萬個飛沫，其中約含菌4500～150000，感冒患者的“高質(zhì)量”噴嚏則含多達8500萬個細(xì)菌。由此可見，我們生活在被大量微生物包圍的世界環(huán)境中，但常常是“身在菌中不知菌”，幸好在一般情況下，大多數(shù)微生物為非致病菌，否則，后果難設(shè)。微生物的生長旺、繁殖快的特性對生物學(xué)基本理論的研究帶來極大的優(yōu)越性，它使科學(xué)研究周期大為縮短、空間減少、經(jīng)費降低、效率提高。當(dāng)然，若是一些危害人、畜和農(nóng)作物的病原微生物或能使物品霉變的有害微生物，則它們的這一特性則會給人類帶來極大的損失和禍害，因此，我們必須認(rèn)真對待。（4）適應(yīng)強，易變異）適應(yīng)強，易變異微生物具有極其靈活的適應(yīng)性或代謝調(diào)節(jié)機制，這是任何高等動、植物所無法比擬的。微生物對外界環(huán)境條件尤其是那些惡劣的“極端環(huán)境”如高溫、高酸、高鹽、高輻射、高壓、低溫、高堿、高毒等具有驚人的適應(yīng)力，堪稱生物界之最。如氧化硫硫桿菌能生長在5～10的H2SO4PH05的酸性環(huán)境中；某些耐堿的微生物如脫氮硫桿菌生長的最高PH為107；在世界大洋最深的馬里亞納海溝，水深達11034米，壓力約為111775MPA，仍有細(xì)菌存在；死海含鹽達23～25，紅皮鹽桿菌、鹽生鹽桿菌、死海鹽桿菌仍有生長，死海根本不“死”?？篃嵊械募?xì)菌能在265個大氣壓，250℃的條件下生長；自然界中細(xì)菌生長的最高溫度可以達到121℃；有些細(xì)菌的芽孢，需加熱煮沸8小時才被殺死；抗寒有些微生物可以在12℃30℃的低溫生長；抗酸堿細(xì)菌能耐受并生長的PH范圍PH0513；

簡介：1必修一知識點整理班級姓名第一章細(xì)胞的分子組成1生物以細(xì)胞為基本結(jié)構(gòu)單位和功能單位，如果要進行生命活動，前提條件是保證細(xì)胞的完整性。病毒無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，但也要在細(xì)胞內(nèi)才能表現(xiàn)出生命活性。2C、H、O、N在生物體內(nèi)含量達963，其中C是生物體核心元素，O是活細(xì)胞中含量最多的元素。3水是活細(xì)胞中含量最多的化合物，蛋白質(zhì)是干細(xì)胞中含量最多的化合物。4無機鹽對維持血漿正常濃度、酸堿平衡和神經(jīng)肌肉興奮性非常重要。哺乳動物血液中CA2含量過低會導(dǎo)致抽搐。MG2是葉綠素的必需成分。FE2是血紅蛋白的主要成分。5幾種有機物的元素組成及基本結(jié)構(gòu)單元，見下表6生物體內(nèi)與能量有關(guān)的物質(zhì)總結(jié)如下A主要能源物質(zhì)葡萄糖B動物細(xì)胞儲能物質(zhì)是糖元；植物細(xì)胞則是淀粉C直接能源物質(zhì)ATPE最終能源物質(zhì)光能7植物細(xì)胞特有糖類果糖、纖維素、麥芽糖、淀粉動物細(xì)胞特有糖類乳糖、糖元動物細(xì)胞和植物細(xì)胞都有的糖類核糖、脫氧核糖、葡萄糖8磷脂是細(xì)胞內(nèi)各種膜結(jié)構(gòu)的重要成分。9蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸。每種氨基酸分子至少含有一個氨基和一個羧基，并且一個氨基和一個羧基連接在同一碳原子上。R基的不同決定了氨基酸的種類不同。10兩個氨基酸發(fā)生脫水縮合形成二肽，形成肽鍵，見下圖名稱元素基本結(jié)構(gòu)單元糖類C、H、O單糖（葡萄糖、果糖等）脂質(zhì)C、H、O無蛋白質(zhì)C、H、O、N、（S）氨基酸核酸C、H、O、N、P核苷酸分為脫氧核糖核苷酸（DNA的單體）以及核糖核苷酸（RNA的單體）313．高爾基體單層膜，與細(xì)胞分泌物有關(guān)，也與植物細(xì)胞壁形成有關(guān)也與植物細(xì)胞壁形成有關(guān)。14．消化酶、抗體等分泌蛋白合成有關(guān)的結(jié)構(gòu)有①核糖體是蛋白質(zhì)的合成場所；②內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是“運輸通道“，其末端形成囊泡，將蛋白質(zhì)包裹在囊泡內(nèi)運輸?shù)礁郀柣w；③高爾基體末端形成囊泡，將蛋白質(zhì)包裹在囊泡內(nèi)，運輸?shù)郊?xì)胞膜；④細(xì)胞膜與高爾基體形成的小囊泡融合（體現(xiàn)細(xì)胞膜具有流動性），將蛋白質(zhì)通過胞吐方式排到細(xì)胞外；⑤以上過程都需要能量，由線粒體提供。15植物細(xì)胞特有細(xì)胞器是葉綠體、液泡。動物細(xì)胞特有細(xì)胞器是中心體，但少數(shù)低等植物也會有中心體。如果一種生物同時有葉綠體、液泡、中心體等結(jié)構(gòu)，則為低等植物細(xì)胞。16掌握細(xì)胞的亞顯微結(jié)構(gòu)圖，分辨細(xì)胞器并了解各細(xì)胞器的功能。17細(xì)胞核是遺傳物質(zhì)貯存、復(fù)制的場所，是細(xì)胞的控制中心。它也是雙層膜的結(jié)構(gòu)。哺乳動物紅細(xì)胞和維管植物的篩管細(xì)胞無細(xì)胞核。18細(xì)胞膜上有核孔，是大分子物質(zhì)如蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)、RNARNA進出細(xì)胞核進出細(xì)胞核的通道。19染色質(zhì)由DNA和蛋白質(zhì)組成，是遺傳物質(zhì)。在分裂期染色質(zhì)會縮短變粗為染色體。染色質(zhì)和染色體是同一種物質(zhì)的不同形態(tài)。1細(xì)胞膜2細(xì)胞溶膠3高爾基體4核基質(zhì)5染色質(zhì)6核仁7核膜8光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)9線粒體10核孔11粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)12核糖體13中心體1細(xì)胞膜2細(xì)胞壁3細(xì)胞溶膠4葉綠體5高爾基體6核仁7核基質(zhì)8核膜9染色質(zhì)10核孔11線粒體12光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)13核糖體14液泡15粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

簡介：中文中文18萬字萬字出處出處BEENKENA,MOHAMMADIMTHEFGFFAMILYBIOLOGY,PATHOPHYSIOLOGYANDTHERAPYJNATUREREVIEWSDRUGDISCOVERY,2009,83235253本科畢業(yè)論文設(shè)計外文翻譯譯文譯文FGF家族生物學(xué)，病理生理學(xué)和治療學(xué)簡述家族生物學(xué)，病理生理學(xué)和治療學(xué)簡述THEFGFFAMILYBIOLOGY,PATHOPHYSIOLOGYANDTHERAPY摘要摘要成纖維細(xì)胞生長因子家族（FGFS）中的各個因子調(diào)控著一系列的發(fā)育過程，包括腦的發(fā)育、肢體的分化和軀干的形成。研究者已經(jīng)對FGFS在促有絲分裂、細(xì)胞的保護和促血管生成方面的作用進行了探索。最近，學(xué)者們發(fā)現(xiàn)了在膽汁酸、葡萄糖和磷酸鹽平衡過程中起內(nèi)分泌調(diào)節(jié)作用的FGF19亞家族所具有的重要功能，這一發(fā)現(xiàn)引起了人們對該家族在藥理學(xué)方面應(yīng)用潛力的巨大興趣。本綜述探討了使用重組FGFS和小分子成纖維細(xì)胞生長因子受體激酶抑制劑治療癌癥和心血管疾病等傳統(tǒng)的應(yīng)用方法和新發(fā)現(xiàn)的FGFS在治療代謝綜合征及堿性磷酸酶過少癥等疾病方面所具有的潛力。前言前言根據(jù)不同的序列同源性和系統(tǒng)發(fā)育的規(guī)律可將哺乳動物的18種成纖維細(xì)胞生長因子（FGF1FGF10和FGF16，F(xiàn)GF23）分為6亞家族FGF1和FGF2；FGF3，F(xiàn)GF7，F(xiàn)GF10，F(xiàn)GF22；FGF4，F(xiàn)GF5和FGF6；FGF8，F(xiàn)GF17和FGF18；FGF9，F(xiàn)GF16和FGF20和FGF19，F(xiàn)GF21和FGF231。部分已編號的“FGFS”并未被分配到任意亞家族中，其中包括成纖維細(xì)胞生長因子同源因子（以往被稱為FGF11－FGF14）。這些因子具有和FGF家族很高的序列同源性，但沒有激活成纖維細(xì)胞生長因子受體（FGFRS）的能力，因此不被規(guī)類為成纖維細(xì)胞生長因子家族中的成員2（纖維細(xì)胞生長因子同源因子的詳細(xì)介紹請參見方框1）；FGF15是小鼠體內(nèi)的人類FGF19的同源蛋白（即人類FGF19＝小鼠FGF15）。FGFS被公認(rèn)為一種旁泌因子，在胚胎發(fā)育過程種的組織和器官形成中起重要作用前5各亞家族的FGF生長因子屬于這一類。與此相對的，最近人們證明了FGF19，F(xiàn)GF21和FGF23亞家族起內(nèi)分泌激素的功能，如對膽汁酸，膽固醇，葡萄糖，維生素D和磷酸鹽內(nèi)穩(wěn)調(diào)節(jié)器的作用，這種作用的發(fā)生主要依賴于靶向組織中KLOTHO蛋白質(zhì)的存在。與成纖維細(xì)胞生長因子信號異常相關(guān)的人類疾病早有報道。發(fā)揮異常調(diào)控作了連續(xù)的正電性表面區(qū)域。相對的，F(xiàn)GF19、FGF21和FGF23亞家族的HBS包含由Β1Β2折疊和Β10Β12區(qū)域形成的隆起，使HSGAG和FGFS核心骨干的親和力降低，并導(dǎo)致這個亞家族的獨特的內(nèi)分泌特點。FGFRSFGFRSFGF配體通過結(jié)合和激活酪氨酸激酶受體家族發(fā)揮作用，這一過程需要HSGAG的參與。FGFR家族有四種受體基因（FGFR1FGFR4）編碼受體，所編碼受體由三個免疫球蛋白樣區(qū)域（D1、D2和D3區(qū)）、單通過（SINGLEPASS）跨膜區(qū)和細(xì)胞內(nèi)的酪氨酸激酶域構(gòu)成。FGFRS存在一段富含酸性氨基酸和絲氨酸的序列，位于D1區(qū)和D2區(qū)之間，成為酸盒（ACIDBOX）。FGFRS細(xì)胞外功能區(qū)的D2區(qū)和D3區(qū)是FGF的結(jié)合區(qū)域，而D1區(qū)和酸盒可以發(fā)揮自動抑制FGF和FGFR結(jié)合的作用（圖2A）。通過外顯子跳躍刪除FGFR1、FGFR3中的D1域和（或）酸盒，使FGFR形成不同的異構(gòu)體。在FGFR1–3的D3區(qū)后半部分的選擇性剪接產(chǎn)生B型（FGFR1B–3B）和C型（FGFR1C–3C）異構(gòu)體,這些異構(gòu)體具有特殊的FGF結(jié)合性質(zhì)，主要存在于上皮細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞。上皮細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞含有不用的FGFR異構(gòu)體。每種FGF都要結(jié)合上皮或間充質(zhì)細(xì)胞的FGFRS，而FGF1比較特殊，可同時作用兩種剪切異構(gòu)體。HSGAGS和受體配體二聚體結(jié)合后，激活FGFR的胞內(nèi)酪氨酸激酶區(qū)域，通過轉(zhuǎn)磷酸作用激活酪氨酸環(huán)路，環(huán)路的磷酸化在酪氨酸C末端磷酸化后形成，然后激酶插入到近膜區(qū)。主要的FGFR胞內(nèi)作用底物是磷脂酶C（PLA）FRS1和FRS2（FGFR作用底物2）。FGFR的C末端的固有酪氨酸（在FGFR1中，該酪氨酸為Y766）磷酸化，產(chǎn)生一個PLCΓ的SH2區(qū)結(jié)合位點，這一過程需要PLCΓ的磷酸化和激活。相對的，F(xiàn)RS2由FGFR的近膜區(qū)組成。FRS2的磷酸化是MAPK通路（RAS–MITOGENACTIVATEDPROTEINKINASE）和PHOSPHOINOSITIDE3KINASE–AKT通路激活必需的。FGFS也可通過FGFFGFR復(fù)合物激活的胞吞作用在細(xì)胞核和細(xì)胞液中，作為內(nèi)源性配體發(fā)揮作用。FGFFGFRFGFFGFR特異性特異性FGFFGFR結(jié)合的特殊性在于其受到18種FGFS和7種主要FGFRS（FGFR1B、FGFR1C、FGFR2B、FGFR2C,、FGFR3B、FGFR3C和FGFR4）基本序列的差異性的影響，F(xiàn)GFS、FGFRS和HSGAGS三者的復(fù)合物的空間關(guān)系只是短暫存在。FGFRS的剪切異構(gòu)體具有組織特異性FGFRB異構(gòu)體在上皮組織中表達，F(xiàn)GFRC異構(gòu)體在間充質(zhì)細(xì)胞組織中表達。FGF即可在上皮組織中表達也可在間充質(zhì)細(xì)胞組織中表達，通常選擇與之相反的組織的受體作用。一般來說，上皮組織中表達的FGFS會激活間充質(zhì)細(xì)胞中的FGFR，反之亦然。FGF1比較特殊，與同一種FGFR的B、C異構(gòu)體都可結(jié)合。FGFS過量表達會引起結(jié)合特性的異常，從而產(chǎn)生生理學(xué)病癥，如在癌癥中FGFS過量表達。FGF1、FGF2、FGF8和FGF10及其同家族FGFRS的研究發(fā)現(xiàn)了FGF的N末端和Β1折疊長度的差異（FIG1B），F(xiàn)GFR的D3區(qū)有兩種異構(gòu)體形

簡介：附錄Ⅳ英文文獻及翻譯附錄Ⅳ英文文獻及翻譯BIOLOGICALEFFECTSOFTHEMAGNETICSTIMULATIONONTHETOADHEARTHONGWEILEI,YUYUANDU,YINALI,CHUNLINGLIU,XUWAN2007IEEE/ICMEINTERNATIONALCONFERENCEONCOMPLEXMEDICALENGINEERINGCME2007INSTITUTEOFBIOMEDICALENGINEERING,NORTHEASTERNUNIVERSITY,SHENYANG,LIAONING110004,PRCHINAABSTRACTWESTIMULATEDTHEEXPOSEDTOADHEARTBYALOWFREQUENCYANDHIGHENERGYMAGNETICBYANALYZETHEDATAOFTHISEXPERIMENT,ITSHOWSTHATTHEPULSATINGOFTHEWEAKTOADHEARTWOULDMAKECHANGEAFTERSTIMULATEDBYMAGNETICWEAKHEARTBEATSTRENGTHENED,THESINGLEPEAKCURVEWOULDBECOMETHETWOPEAKSCURVEWITHATRIAWAVEANDVENTRICLEWAVEAFTERTHEMAGNETICSTIMULATIONBUTTHECYCLINGOFRHYTHMICPULSATILECURVEOFTOADDOESNTCHANGEIINTRODUTIONALLLIFEFORMSHAVEMAGNETISMALLKINDSOFMAGNETICFIELDWOULDHAVESOMEEFFECTSONTHECONFIGURATIONANDACTIVITIESOFLIFEFORMSTHATWHICHEVERENVIRONMENTALMAGNETIC,ADDITIONALMAGNETICORINSIDEMAGNETICOFORGANISMTHEBIOLOGICEFFECTSARERELATEDTOTHECHARACTERISTICSANDTHEINTENSIONOFTHEMAGNETICFIELD,ASWELLASTHESPECIESANDTHETISSUESOFTHELIFEFORMSTHEEXPERIMENTATIONSHOWEDTHATMAGNETISMSTIMULATIONINSOMERANGEWOULDCONTROLTHEGROWTHOFRATTUMOUR,WHATEVERTHEYAREINOROUTTHEBODYMUCHMORETHEYCANINDUCETHECANCERCELLSDEAD30MTMAGNETICSTIMULATIONWOULDINCREASETHECONTENTOFNOINTHELIVERANDTHEKIDNEYMAGNETICALSOCANIMPROVETHEACTIVITYOFSOMEENZYMEANDPROMOTETHEREGENERATIONOFNERVETISSUECELLWOULDINCREASE,THEBONESWOULDBECONCRESCENCE,THESCARWOULDBEREHABILITATETHEBLOODRHEOLOGYANDBLOODCELLNUMBERBOTHOFHUMANANDRATWOULDCHANGEOBVIOUSLY,DITHEBLOODMUCOSITYWOULDBELOWHEARTISTHEMOSTIMPORTANTAPPARATUSOFLIFEITPULSATESDAYANDNIGHTHEARTONCESTOPPULSATING,THELIFEFORDANGERNUMEROUSSCHOLARPAYSATTENTIONTOTHEROLEOFMAGNETICFIELDBUTTHEYJUSTSTUDIEDTHEEFFECTSOFMAGNETICSTIMULATIONOFTHEHEARTPACEMAKERTHEEXPERIMENTSABOUTDIRECTEFFECTSOFSTIMULATEHEARTBYMAGNETICISVERYMADEBYOURSELVES③CARDIOMUSCULARTRANSDUCER④RINGERSOL⑤BATRACHIAINSTRUMENTS⑥CLIPOFFROGHEART⑦COTTONTHREAD?BURETTEBEXPERIMENTANIMALSTOADSIIIMETHODADESTROYTHEBRAINANDTHESPINALCORDOFTHETOADBYSTYLETPENETRATEINTOTHEOCCIPITALAPERTUREUPRIGHTWITHSTYLET,DESTROYEDTHEBRAINUPWARDS,TAKEBACKTHESTYLETANDDESTROYTHESPINALDOWNWARDSIFTHELIMBOFTOADWERERELAXED,ITSHOWEDTHATTHEBRAINANDSPINALWEREDESTROYEDCOMPLETELYBEXPOSETHETOADHEARTMAKETHETOADLYINGONITSBACKONTHEWINDINGCENTERTHEMAGNETICASPECTISUPRIGHTTHROUGHTHETOADHEARTCUTTHEVENTRALSKINOFTOAD,SNIPTHEBREASTBONE,EXPOSETHERATHEARTNIPTHEHEARTTIPBYCLIPCAREFULLYMAKETHECOTTONTHREADTIEDWITHTHECLIPOFFROGHEARTHELINKEDWITHTHECARDIOMUSCULARTRANSDUCERDONOTMAKETHETOADHEARTLEAVETHORAX,ORITWOULDDISTURBTHEEXPERIMENTRESULTSCNOTEDTHERESULTCONNECTTHECARDIOMUSCULARTRANSDUCERWITHTHECOMPUTERTAKENOTESTHECURVEOFTOADHEARTWITHOUTGIVINGTHESTIMULATEOFMAGNETICFIELDDAFTERTHREEMINUTES,NOTEDTHEWEAKPULSATILECURVEEMAKETHEMAGNETICINTENSION10T,ELECTRICIZE10SSTIMULATETHETOADHEARTANDRECORDTHEPULSATILECURVEIVRESULTSTHEABSCISSAOFCARDIACRHYTHMICPULSATILECURVEISTIME,THEORDINATEISCONSTRICTIONPOWERTAKENOTESFORTHEPULSATILECURVEOFTOADHEARTTHATEXPOSEDJUSTWECANKNOWTHERHYTHMICPULSATILECYCLEOFTHETOADHEARTIS15SFROMFIG1WHICHSHOWTHECARDIACRHYTHMICPULSATILECURVEOFTHETOADWHICHWASEXPOSEDTHEHEARTJUSTNOWTHEREARETWOWAVESINEACHCYCLE,ONEISATRIAWAVE,THEOTHERISVENTRICLEWAVETHEATRIAWAVEIS05SANDTHEVENTRICLEWAVEIS10STHECONSTRICTIONPOWEROFATRIAISLESSTHANTHATOFVENTRICLETHEAMPLITUDEOFCONSTRICTIONPOWEROFVENTRICLEISTHE2TIMESOFTHEATRIA

簡介：THEREARE18MAMMALIANFIBROBLASTGROWTHFACTORSFGF1–FGF10ANDFGF16–FGF23WHICHAREGROUPEDINTO6SUBFAMILIESBASEDONDIFFERENCESINSEQUENCEHOMOLOGYANDPHYLOGENYFGF1ANDFGF2FGF3,FGF7,FGF10,FGF22FGF4,FGF5ANDFGF6FGF8,FGF17ANDFGF18FGF9,FGF16ANDFGF20ANDFGF19,FGF21ANDFGF23REF1THENUMBERED‘FGFS’THATAREUNASSIGNEDTOSUBFAMILIESTHEFGFHOMOLOGOUSFACTORSPREVIOUSLYKNOWNASFGF11–FGF14HAVEHIGHSEQUENCEIDENTITYWITHTHEFGFFAMILYBUTDONOTACTIVATEFGFRECEPTORSFGFRSANDARETHEREFORENOTGENERALLYCONSIDEREDMEMBERSOFTHEFGFFAMILY2BOX1FGF15ISTHEMOUSEORTHOLOGUEOFHUMANFGF19FGFSARECLASSICALLYCONSIDEREDTOBEPARACRINEFACTORSANDAREKNOWNFORTHEIRROLESINTISSUEPATTERNINGANDORGANOGENESISDURINGEMBRYOGENESISTHEFIRSTFIVESUBFAMILIESFALLINTOTHISCATEGORYBYCONTRAST,THEFGF19,FGF21ANDFGF23SUBFAMILYHASRECENTLYBEENSHOWNTOFUNCTIONINANENDOCRINEMANNER,DEPENDENTONTHEPRESENCEOFKLOTHOPROTEINSINTHEIRTARGETTISSUES,TOREGULATEBILEACID,CHOLESTEROL,GLUCOSE,VITAMINDANDPHOSPHATEHOMEOSTASIS3–6THEINVOLVEMENTOFFGFSIGNALLINGINHUMANDISEASEISWELLDOCUMENTEDDEREGULATEDFGFSIGNALLINGCANCONTRIBUTETOPATHOLOGICALCONDITIONSEITHERTHROUGHGAINORLOSSOFFUNCTIONMUTATIONSINTHELIGANDSTHEMSELVESFOREXAMPLE,FGF23GAINOFFUNCTIONINAUTOSOMALDOMINANTHYPOPHOSPHATAEMICRICKETS7,FGF10LOSSOFFUNCTIONINLACRIMOAURICULODENTODIGITALSYNDROMELADDSYNDROME8,FGF3LOSSOFFUNCTIONINDEAFNESS9ANDFGF8LOSSOFFUNCTIONINKALLMANNSYNDROME10ORTHROUGHGAINORLOSSOFFUNCTIONMUTATIONSINFGFRS,WHICHCONTRIBUTETOMANYSKELETALSYNDROMES41,KALLMANNSYNDROME36,LADDSYNDROME54ANDCANCERTHERAPEUTICAPPROACHESUSINGEXOGENOUSFGFS,ANTIBODIESORSMALLMOLECULESARESTILLRELATIVELYNEW,ANDMANYAVENUESOFINVESTIGATIONREMAINOPENRECOMBINANTFGF7ISALREADYINUSEFORTHETREATMENTOFCHEMORADIATIONINDUCEDORALMUCOSITISFUTUREAPPLICATIONOFTHEFGFSINRENALDISEASE,GLUCOSEANDPHOSPHATEHOMEOSTASIS,STEMCELLRESEARCH,TISSUEREPAIRANDBIOENGINEERING,ANDANGIOGENESISISEXPECTEDCONTINUEDEFFORTSTOUNDERSTANDTHESTRUCTURALBIOLOGYOFFGF–FGFRINTERACTIONSWILLPLAYAKEYPARTINDRIVINGTHEDISCOVERYOFNEWTHERAPIESINTHISARTICLE,WEBRIEFLYREVIEWCURRENTKNOWLEDGEREGARDINGFGF–FGFRSIGNALLINGANDTHENFOCUSONTHEBIOLOGY,PATHOLOGYANDRECENTDEVELOPMENTSREGARDINGTHEPHARMACOLOGICALAPPLICATIONSOFEACHLIGANDTHEFGF–FGFRSIGNALLINGSYSTEMFGFSALLFGFS,EXCEPTTHOSEINSUBFAMILIESFGF1ANDFGF2,ANDFGF9,FGF16ANDFGF20,HAVESIGNALPEPTIDESTHEFGF9,FGF16ANDFGF20SUBFAMILYISNONETHELESSSECRETEDTHROUGHTHETRADITIONALENDOPLASMICRETICULUMER–GOLGISECRETORYPATHWAY11,WHEREASTHEFGF1ANDFGF2SUBFAMILYISSECRETEDINDEPENDENTLY12FGFSHAVEAHOMOLOGOUSCOREREGIONTHATCONSISTSOF120–130AMINOACIDSORDEREDINTO12ANTIPARALLELΒSTRANDSΒ1–Β12FLANKEDBYDIVERGENTAMINOANDCARBOXYLTERMINIFIG1AINGENERAL,PRIMARYSEQUENCEVARIATIONOFTHENANDCTERMINALTAILSOFFGFSACCOUNTSFORTHEDIFFERENTBIOLOGYOFTHELIGANDS13FIG1BTHEHEPARANSULPHATEGLYCOSAMINOGLYCANHSGAGBINDINGSITEHBSWITHINTHEFGFCOREISCOMPOSEDOFTHEΒ1–Β2LOOPANDPARTSOFTHEREGIONSPANNINGΒ10ANDΒ12FORPARACRINEFGFS,DEPARTMENTOFPHARMACOLOGY,NEWYORKUNIVERSITYSCHOOLOFMEDICINE,NEWYORK,NEWYORK10016,USAEMAILSANDREWBEENKENMEDNYUEDUMOOSAMOHAMMADINYUMCORGDOI101038/NRD2792AUTOSOMALDOMINANTHYPOPHOSPHATAEMICRICKETSAHEREDITARYDISORDEROFPHOSPHATEWASTINGCHARACTERIZEDBYRICKETS,LOWEREXTREMITYDEFORMITIESANDOSTEOMALACIALACRIMOAURICULODENTODIGITALSYNDROMELADDASYNDROMECHARACTERIZEDBYABNORMALITIESOFTHEDIGITSANDTEETH,LOWSETEARSANDAPLASIAOFTHELACRIMALANDSALIVARYGLANDSMUTATIONSINFGFR2ANDFGF10AREKNOWNTOCAUSELADDKALLMANNSYNDROMETHISSYNDROMERESULTSFROMADEFICIENCYOFGONADOTROPINRELEASINGHORMONE,WHICHLEADSTOHYPOGONADISMMUTATIONSINFGFR1CANDFGF8AREKNOWNTOCAUSEKALLMANNSYNDROMETHEFGFFAMILYBIOLOGY,PATHOPHYSIOLOGYANDTHERAPYANDREWBEENKENANDMOOSAMOHAMMADIABSTRACT|THEFAMILYOFFIBROBLASTGROWTHFACTORSFGFSREGULATESAPLETHORAOFDEVELOPMENTALPROCESSES,INCLUDINGBRAINPATTERNING,BRANCHINGMORPHOGENESISANDLIMBDEVELOPMENTSEVERALMITOGENIC,CYTOPROTECTIVEANDANGIOGENICTHERAPEUTICAPPLICATIONSOFFGFSAREALREADYBEINGEXPLORED,ANDTHERECENTDISCOVERYOFTHECRUCIALROLESOFTHEENDOCRINEACTINGFGF19SUBFAMILYINBILEACID,GLUCOSEANDPHOSPHATEHOMEOSTASISHASSPARKEDRENEWEDINTERESTINTHEPHARMACOLOGICALPOTENTIALOFTHISFAMILYTHISREVIEWDISCUSSESTRADITIONALAPPLICATIONSOFRECOMBINANTFGFSANDSMALLMOLECULEFGFRECEPTORKINASEINHIBITORSINTHETREATMENTOFCANCERANDCARDIOVASCULARDISEASEANDTHEIREMERGINGPOTENTIALINTHETREATMENTOFMETABOLICSYNDROMEANDHYPOPHOSPHATAEMICDISEASESREVIEWSNATUREREVIEWS|DRUGDISCOVERYVOLUME8|MARCH2009|235?2009MACMILLANPUBLISHERSLIMITEDALLRIGHTSRESERVEDCANATUREREVIEWS|DRUGDISCOVERYFGF1FGF2FGF3FGF7FGF10FGF22FGF4FGF5FGF6FGF8FGF17FGF18FGF9FGF16FGF20FGF19FGF21FGF23EKFNLPPGNYKKPKLLYCGSGAFPPGHFKDPKRLYCGGVYEHLGGAPRRRKLYCRSYDYMEGGDIRVRRLFCVRSYNHLQGDVRWRKLFSPRSYPHLEGDVRWRRLFSSGAGDYLLGIKRLRRLYCQSSFQWSPSGRRTGSLYCNWESGYLVGIKRQRRLYCLVTDQLSRRLIRTYQLYSAMTDQLSRRQIREYQLYSRARDDVSRKQLRLYQLYSVTDLDHLKGILRRRQLYCPTDFAHLKGILRRRQLYCAAQLAHLHGILRRRQLYCPHVHYGWGDPIRLRHLYTSSPLLQFGGQVRQRYLYTNASPLLGSSWGGLIHLYT143734556831726774424343494852333527313451728548898491596060666569505244BΒ1CTERMINUSNTERMINUSΒ9Β8Β6Β4Β7Β5Β3Β2Β10Β11Β1Β12FGFR1ATLEASTTHREEGENETICDISORDERSCANBEATTRIBUTEDTOMUTATIONSINFGFR1KALLMAN’SSYNDROME36,OSTEOGLOPHONICDYPLASIAANDPFEIFFER’SSYNDROME37PATHOLOGICALFGFR1SIGNALLINGALSOOCCURSINVARIOUSMALIGNANCIESGLIOBLASTOMABRAINTUMOURSEXHIBITFGFR1KINASEDOMAINGAINOFFUNCTIONMUTATIONS38,ANDFGFR1ISABNORMALLYACTIVATEDCRANIOSYNOSTOSISTHISCONDITIONRESULTSFROMTHEPREMATURECLOSUREOFSUTURESOFADEVELOPINGSKULLBEFORETHECOMPLETIONOFBRAINGROWTHTHEBRAINCONTINUESTOGROWINAREASOFTHESKULLWHERESUTURESHAVENOTCLOSED,LEADINGTOAMALFORMEDCRANIUMAPERT’SSYNDROMEONEOFTHEMOSTCOMMONCRANIOSYNOSTOSISSYNDROMESTHATEXHIBITSSEVERESYNDACTYLYDIGITFUSIONOFTHEHANDSANDFEETAPERT’SSYNDROMEISOFTENASSOCIATEDWITHVISCERALABNORMALITIESOFTHECARDIOVASCULAR,RESPIRATORYANDUROGENITALSYSTEMSOSTEOGLOPHONICDYSPLASIAABONEDISORDERPRESENTINGWITHDWARFISM,VERTEBRALFRAGILITY,CRANIOSYNOSTOSISANDFAILURETOTHRIVETHETERMOSTEOGLOPHONICREFERSTOTHE‘HOLLOWEDOUT’APPEARANCEOFTHEMETAPHYSESINXRAYS,WHICHARETHEGROWTHZONESOFLONGBONESPFEIFFER’SSYNDROMEACRANIOSYNOSTOSISDISORDERTHATCANALSOPRESENTWITHPOLYDACTYLYGLIOBLASTOMAANAGGRESSIVETUMOURDERIVEDFROMGLIALCELLSTHATEXHIBITSHIGHLEVELSOFNEOVASCULARIZATIONMODULATORSOFFGFSIGNALLINGFGFBINDINGPROTEINFGFBPISACARRIERPROTEIN27THATACTIVATESFGFSBYRELEASINGTHEMFROMTHEEXTRACELLULARMATRIX,WHERETHEYAREBOUNDBYHSGAGS28FGFBPHASBEENSHOWNTOINCREASEFGF2DEPENDENTPROLIFERATIONOFFIBROBLASTCELLS29ANDMAYHAVEANIMPORTANTROLEINTHEDEVELOPMENTOFSOMECANCERS30OTHERACTIVATORSOFFGFSIGNALLINGINCLUDEFIBRONECTINLEUCINERICHTRANSMEMBRANEPROTEIN3FLRT3,WHICHFACILITATESFGF8ACTIVITYTHROUGHTHEMAPKPATHWAY31THESPROUTYFAMILYOFPROTEINSPLAYANIMPORTANTPARTININHIBITINGRECEPTORTYROSINEKINASERTKSIGNALLINGANDWEREFIRSTDISCOVEREDASINHIBITORSOFFGFSINDROSOPHILAMELANOGASTER32FGFSIGNALLINGACTIVATESSPROUTYPROTEINS,WHICHCANTHENINTURNINHIBITFGFSTIMULATIONOFTHEMAPKPATHWAYBYINTERACTINGWITHGRB2GROWTHFACTORRECEPTORBOUNDPROTEIN2,SOS1ORRAF1REF33MKP3MAPKPHOSPHATASE3ISANOTHERGENERALINHIBITOROFRTKSIGNALLINGTHATALSOIMPINGESONFGFACTIVITYBYDEPHOSPHORYLATINGEXTRACELLULARSIGNALREGULATEDKINASEERK34SEFISASPECIFICINHIBITOROFFGFSTHATCANFUNCTIONATMULTIPLEPOINTSALONGTHESIGNALLINGPATHWAYTOATTENUATESIGNALLING34FGFRPATHOPHYSIOLOGYANDTHERAPYGERMLINEGAINOFFUNCTIONMUTATIONSINFGFRSARERESPONSIBLEFORVARIOUSDISEASES,SUCHASCRANIOSYNOSTOSIS,DWARFINGSYNDROMESANDCANCERMOSTOFTHEFGFRMUTATIONSARELIGANDINDEPENDENT,BUTAFEWSUCHASSER252TRPANDPRO253ARGINTHEECTODOMAINOFFGFR2MANIFESTONLYDURINGLIGANDBINDINGTHESEMUTATIONSCAUSEAPERT’SSYNDROMEBYENHANCINGLIGANDBINDINGAFFINITYANDPROMOTINGTHEBINDINGOFINAPPROPRIATELIGANDS35,278–280REMARKABLY,MANYOFTHEGERMLINEMUTATIONSTHATCAUSESKELETALSYNDROMESALSOCONTRIBUTE,THROUGHSOMATICMUTATIONS,TOTHEDEVELOPMENTOFCANCERFURTHERMORE,MUTATIONSINFGFR1–FGFR3OFTENOCCURINHOMOLOGOUSRESIDUESANDACCOUNTFORMULTIPLEPATHOLOGIESFIGURE1|STRUCTURALFEATURESOFFIBROBLASTGROWTHFACTORSFGFSA|FGF1,SHOWINGITS12ANTIPARALLELΒSHEETSANDAMINOANDCARBOXYLTERMINIB|THE18FGFS,GROUPEDACCORDINGTOSUBFAMILYTHESEQUENCEALIGNMENTINTHEREGIONOFTHEDIVERGENTNTERMINUSPROXIMALTOTHEΒTREFOILCOREISGIVENTHEΒ1STRANDOFFGF1ISPROVIDEDTOINDICATETHELIMITOFTHENTERMINUSC|FGF19SUPERIMPOSEDONTOFGF2FROMTHEFGF2–FGFRECEPTOR1–HEPARINTERNARYSTRUCTUREPROTEINDATABANKFGF2ANDFGF19ARERENDEREDASRIBBONSANDHEPARINISSHOWNASSTICKSOXYGENRED,NITROGENBLUE,CARBONBEIGE,ANDSULPHURGREENATOMSARESHOWNTHECOREREGIONSOFBOTHLIGANDSARECOLOUREDGREY,ANDTHEHEPARINBINDINGREGIONSOFFGF2ANDFGF19ARECOLOUREDCYANANDORANGE,RESPECTIVELYHEPARINFROM1FQ9CLASHESWITHTHERIDGESINTHEHEPARINBINDINGREGIONOFFGF19TOELIMINATETHESECLASHES,HEPARINMUSTTRANSLOCATEAWAYFROMFGF19BUT,INDOINGSO,CRUCIALCONTACTSBETWEENHEPARINANDTHEFGF19BACKBONECANNOTBEMADETHEWEAKENEDHEPARINBINDINGOBSERVEDINTHEFGF19SUBFAMILYMEMBERSISRESPONSIBLEFORTHEIRENDOCRINEBEHAVIOURREVIEWSNATUREREVIEWS|DRUGDISCOVERYVOLUME8|MARCH2009|237?2009MACMILLANPUBLISHERSLIMITEDALLRIGHTSRESERVED

簡介：中文中文3825字出處出處KRISTMUNDSDóTTIRT,JóNSDóTTIRE,?GMUNDSDóTTIRHM,ETALSOLUBILIZATIONOFPOORLYSOLUBLELICHENMETABOLITESFORBIOLOGICALTESTINGONCELLLINESJEUROPEANJOURNALOFPHARMACEUTICALSCIENCES,2005,245539543不溶性地衣代謝產(chǎn)物的增溶作用在細(xì)胞系的生物學(xué)測試不溶性地衣代謝產(chǎn)物的增溶作用在細(xì)胞系的生物學(xué)測試摘要摘要荔枝素縮酚酸和富馬原島衣酸縮酚酸環(huán)醚，分別是從珊瑚枝屬的高山柳葉菜地衣和冰島地衣屬提取出來的，分別被選做為不溶性天然化合物的原型，以方便在藥理模型中的測試。增溶劑在之前就被認(rèn)定是做為從無毒性走向一個惡性白血?。↘562）細(xì)胞株和氧芴地衣代謝物（）地衣酸溶解研究中使用的縮酚酸及縮酚酸環(huán)醚的反增生性活動的測試。環(huán)糊精衍生物是之前發(fā)現(xiàn)的最適合增溶的地衣化合物，已經(jīng)確認(rèn)在富馬原島衣酸的溶解度上有了最大的提高，從水中003MG/ML到898MG/ML在10的2羥丙基Β環(huán)糊精（HPΒCD），提高了將近300倍。隨后,地衣化合物包括（）地衣酸，溶解在10的HPΒCD中，測試在3種惡性的人類細(xì)胞系T47D（胸腺），PANC胰腺和PC3（前列腺）的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞增殖實驗。荔枝素和富馬原島衣酸沒有展現(xiàn)出有反增殖影響，但是地衣酸可以有效的對抗所有測試細(xì)胞系和半數(shù)效應(yīng)濃度值4382ΜG/ML。在本實驗中使用的無毒的增溶劑可以證明其他可溶性就差的天然產(chǎn)品的藥理學(xué)測試。?2005ELSEVIERPV，保留最終解釋權(quán)。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞地衣代謝物；溶解度；細(xì)胞系；富馬原島衣酸；荔枝素；地衣酸。11介紹介紹冰島地衣中的一些次級代謝產(chǎn)物在人類惡性細(xì)胞系測試中展現(xiàn)了可喜的反增殖結(jié)果。相同原料的代謝產(chǎn)物在無毒溶劑中的進一步測試是存在的但是經(jīng)常被不溶性的所阻礙。許多方法是可以試著去增加不溶性物質(zhì)的溶解度，比如使用助溶劑，表面活性劑，有機絡(luò)合劑。然而這些方法必須是對培養(yǎng)基中的細(xì)胞無害的溶劑系統(tǒng)。在先前研究地衣代謝物（）地衣酸（圖1）中，氧芴衍生物作為原型的目的是找到一個既能夠溶解地衣酸，同時不會對細(xì)胞系的測試產(chǎn)生影響的不溶于水的天然產(chǎn)物。各種溶劑和絡(luò)合劑的直接產(chǎn)物是用來在人類白血病細(xì)胞K562標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞增殖實驗中的測試。大部分的化合物是有毒的，除了聚乙二醇400（PEG400）和2羥丙基Β環(huán)糊精絡(luò)合劑（HPΒCD）。地衣酸的反增生活性可以證明使用PEG400和HPΒCD的半數(shù)有效濃度47ΜG/ML，但是只有后者給出了滿意的溶解度。2羥丙基Β環(huán)糊精因此被作為一種增溶劑，因為它同時滿足溶解度以及對細(xì)胞測試的無毒性。地衣酸在每日攝取100200MG劑量時會引發(fā)肝中毒。除了氧芴衍生物比如地衣酸，地衣類的次級代謝產(chǎn)物有很大數(shù)量的縮酚酸和縮酚酸環(huán)醚的化學(xué)分類。兩者都是通過芳香羧酸的酯化反應(yīng)形成的單位。除了酯鍵和含有一個分子內(nèi)氧橋的縮酚酸環(huán)醚。許多這種化合物在地衣類是結(jié)構(gòu)獨特的，很值得去進行藥理測試。然而很多時候他們的溶解性很差。目前調(diào)查的目標(biāo)是雙重的，首先是選擇一個說溶性很差縮酚酸和縮酚酸環(huán)醚的典型，并且在使用之前找到的對細(xì)胞系毒性很小的溶劑和絡(luò)合劑時能夠明顯提高他們?nèi)芙舛?。分別選中了從冰島珊瑚枝屬高山柳葉菜中提取的荔枝素和從冰島衣多毛屬提取的富馬原島衣酸。其次是在3中人類惡性為6的10HPΒCD溶解度很低，但是在PH為8時，有更高的溶解度00055MG/ML。盡管PH為8的荔枝素溶解度比PH為74的生理的高，但是后者是選擇作為細(xì)胞實驗的。由于荔枝素在HPΒCD中的溶解度很小，所以嘗試去選擇HPΓCD增加溶解度。Γ環(huán)糊精的中心空腔比Β環(huán)糊精的要大，因此它可能使地衣化合物的溶解度更高。但是，這并非如此。圖3顯示的是環(huán)糊精濃度在PH為74的荔枝素的溶解度。溶解度的增加與增溶劑濃度做了一個函數(shù)，但是還是有很小的不同在后面得到的兩個環(huán)糊精和HPΓCD在高得濃度測試中相對要好。3232增溶劑對富馬原島衣酸溶解度的影響。增溶劑對富馬原島衣酸溶解度的影響。富馬原島衣酸在水中的溶解度是00325MG/ML，在PH為4時溶解度是00069MG/ML，并且隨著PH的增加溶解度也在增長，在PH為74時，溶解度是283MG/ML。在同時使用PEG400和丙二醇時，富馬原島衣酸的溶解度要比只有水的時候要好，但是由于在這些溶液中的化合物的分解是通過HPLC測量的，所以它不能反應(yīng)溶解度。富馬原島衣酸的溶解度在PH為74的10的HPΒCD中是898MG/ML。分解在環(huán)糊精溶液中可能是看不到的，因為一部分富馬原島衣酸的很適合非極性的環(huán)糊精空腔并可以從外界環(huán)境中保護它。3333地衣化合物對細(xì)胞吸收胸苷的影響。地衣化合物對細(xì)胞吸收胸苷的影響。將地衣酸、荔枝素和富馬原島衣酸三種地衣化合物溶解在10的HPΒCD溶液中，并分別在PANC1、T47D和PC3的PH為74的細(xì)胞系中進行測試。松蘿酸在溶劑濃度為10ΜL/ML中抑制PANC1的半數(shù)有效濃度是43ΜG/ML，與之相比松蘿酸對K562的半數(shù)有效濃度是47ΜG/ML。松蘿酸抑制T47D的半數(shù)有效濃度是29ΜG/ML，抑制PC3的半數(shù)有效濃度是相對高的82ΜG/ML。計算得到這個半數(shù)有效濃度對溶劑有直接的影響。HPΒCD這個增溶劑對PC3和PANC1沒有明顯的作用，但是T47D是更加敏感的，而且在有效的劑量范圍內(nèi)對胸苷的吸收有一個明顯的3080的減少。荔枝素對T47D的溶劑和溶解度的抑制作用就像那個是很有限的，也是因此決定不在其他細(xì)胞表面進行試驗。富馬原島衣酸對T47D和PANC1并沒有一個很好的抑制作用。44討論。討論?，F(xiàn)在溶解度研究是選擇最好的使用溶劑，并且它有很小的溶解度，而且還是在地衣類中是廣泛分布的。盡管它們相對其他地衣代謝物相對豐度是很高的，這些化合物在藥理的觀點內(nèi)從未收到應(yīng)有的重視。先前的工作已經(jīng)確定了在細(xì)胞培養(yǎng)中的適合的增溶劑丙二醇、PEG400、HPΒCD。HPΒCD是已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的有增加氧芴衍生物地衣酸抑制惡性細(xì)胞系測試的溶解度（KRISTMUNDSDOTTIRETAL,2002）在試圖使用增溶的化合物去增加及其不佳溶解度的縮酚酸衍生物荔枝素和縮酚酸環(huán)醚衍生物富馬原島衣酸后，發(fā)現(xiàn)縮酚酸環(huán)醚比縮酚酸更容易溶解。荔枝素溶解度的增加順序是無HPLC在水中檢測的HPLC使用HPΒCD和HPΓCD。這種增加不能足夠的曾明明顯的反增生實驗，荔枝素也不能證明是及其困難增溶的候選物。荔枝素在細(xì)胞增長方面與它的溶劑相比不能引起明顯的減少，因此不可能做出任何假設(shè)在荔枝素的反增生反應(yīng)是由于它的很差的溶解性。另一方面富馬原島衣酸在水中的溶解度從003MG/ML增加到了在10HPΒCD的898MG/ML，因此具有更多剛性環(huán)的富馬原島衣酸比荔枝素更適合環(huán)糊精空腔。除了增加溶解度，HPΒCD溶液也可以增加富馬原島衣酸的穩(wěn)定性。大概延胡索酸酯可以保護環(huán)糊精復(fù)合物的水解，由于

簡介：EUROPEANJOURNALOFPHARMACEUTICALSCIENCES242005539–543SOLUBILIZATIONOFPOORLYSOLUBLELICHENMETABOLITESFORBIOLOGICALTESTINGONCELLLINESTH′ORD′ISKRISTMUNDSD′OTTIRA,?,ELSAJ′ONSD′OTTIRA,HELGAM¨OGMUNDSD′OTTIRB,C,KRIST′INING′OLFSD′OTTIRAAFACULTYOFPHARMACY,UNIVERSITYOFICELAND,HAGI,HOFSVALLAGATA53,REYKJAVIKIS107,ICELANDBFACULTYOFMEDICINE,UNIVERSITYOFICELAND,REYKJAVIK,ICELANDCMOLECULARANDCELLBIOLOGYRESEARCHLABORATORY,ICELANDICCANCERSOCIETY,REYKJAVIK,ICELANDRECEIVED8JULY2004RECEIVEDINREVISEDFORM11JANUARY2005ACCEPTED14JANUARY2005ABSTRACTTHEDEPSIDEATRANORINANDDEPSIDONEFUMARPROTOCETRARICACID,ISOLATEDFROMTHELICHENSSTEREOCAULONALPINUMANDCETRARIAISLANDICA,RESPECTIVELY,WERECHOSENASPROTOTYPESFORPOORLYSOLUBLENATURALCOMPOUNDSINANEFFORTTOFACILITATETESTINGINPHARMACOLOGICALMODELSSOLUBILIZINGAGENTSPREVIOUSLYIDENTIFIEDASBEINGNONTOXICTOWARDSAMALIGNANTLEUKEMICK562CELLLINEANDSUITABLEFORTESTINGOFANTIPROLIFERATIVEACTIVITYOFTHEDIBENZOFURANLICHENMETABOLITEUSNICACIDWEREUSEDINSOLUBILIZATIONSTUDIESOFTHEDEPSIDEANDDEPSIDONECYCLODEXTRINDERIVATIVESWEREFOUNDTOBEMOSTSUITABLEFORSOLUBILIZINGTHELICHENCOMPOUNDS,THEGREATESTRISEINSOLUBILITYBEINGWITNESSEDFORFUMARPROTOCETRARICACID,INCREASINGALMOST300FOLDFROM003MG/MLINWATERTO898MG/MLIN102HYDROXYPROPYL?CYCLODEXTRINHP?CDSUBSEQUENTLY,THELICHENCOMPOUNDS,INCLUDINGUSNICACID,WERESOLUBILIZEDIN10HP?CDANDTESTEDFOREFFECTSONTHREEMALIGNANTHUMANCELLLINEST47DBREAST,PANC1PANCREASANDPC3PROSTATEINASTANDARDPROLIFERATIONASSAYATRANORINANDFUMARPROTOCETRARICACIDDIDNOTEXHIBITANTIPROLIFERATIVEEFFECTSBUTUSNICACIDWASACTIVEAGAINSTALLTESTCELLLINESWITHEC50VALUESOF43–82?G/MLTHENONTOXICSOLUBILIZINGAGENTSUSEDINTHISSTUDYCOULDPROVEUSEFULFORPHARMACOLOGICALTESTINGOFOTHERPOORLYSOLUBLENATURALPRODUCTS?2005ELSEVIERBVALLRIGHTSRESERVEDKEYWORDSLICHENMETABOLITESSOLUBILITYCELLLINESFUMARPROTOCETRARICACIDATRANORINUSNICACID1INTRODUCTIONSOMESECONDARYMETABOLITESFOUNDINICELANDICLICHENSHAVESHOWNPROMISINGANTIPROLIFERATIVERESULTSININVITROTESTSONMALIGNANTHUMANCELLLINES¨OGMUNDSD′OTTIRETAL,1998HARALDSD′OTTIRETAL,2004FURTHERTESTINGOFOTHERCANDIDATESOFTHESAMEORIGINHASHOWEVEROFTENBEENHAMPEREDBYTHEPOORSOLUBILITYTHATMANYOFTHESEMETABOLITESSHOWINNONTOXICSOLVENTSNUMEROUSWAYSAREPOSSIBLEWHENTRYINGTOINCREASETHESOLUBILITYOFPOORLYSOLUBLESUBSTANCES,FOREXAMPLETHEUSEOFCOSOLVENTS,SURFACANTSANDCOMPLEXFORMINGAGENTSTINWALLAETAL,1993JONKMANDEVRIESETAL,1996LIETAL,1999A,BTHESEMETHODSMUSTHOWEVER?CORRESPONDINGAUTHORTEL3545254370FAX3545254071EMAILADDRESSTHORDISKHIISTKRISTMUNDSD′OTTIRPRODUCESOLVENTSYSTEMSTHATARENONTOXICFORTHECELLSINCULTUREINAPREVIOUSSTUDYTHELICHENMETABOLITEUSNICACIDFIG1,ADIBENZOFURANDERIVATIVE,WASUSEDASAPROTOTYPEFORAWATERINSOLUBLENATURALPRODUCTWITHTHEAIMTOFINDASOLVENTTHATWASBOTHCAPABLEOFSOLUBILIZINGUSNICACIDANDWASFREEOFDIRECTACTIVITYAGAINSTATESTCELLLINETHEDIRECTEFFECTSOFVARIOUSSOLVENTSANDCOMPLEXANTSWERETESTEDONTHEHUMANLEUKEMIACELLLINEK562INASTANDARDPROLIFERATIONASSAYMOSTOFTHECOMPOUNDSPROVEDTOXICWITHTHEEXCEPTIONOFTHESOLVENTSPROPYLENEGLYCOLANDPOLYETHYLENEGLYCOL400PEG400ANDTHECOMPLEXANT2HYDROXYPROPYL?CYCLODEXTRINHP?CDANTIPROLIFERATIVEACTIVITYOFUSNICACIDCOULDBEDEMONSTRATEDWITHANEC50OF47?G/MLUSINGPEG400AND2HYDROXYPROPYL?CYCLODEXTRINBUTONLYTHELATTERGAVESATISFACTORYSOLUBILITY2HYDROXYPROPYL?CYCLODEXTRINWASTHUSIDENTIFIEDASASOLUBILIZINGAGENTTHAT09280987/–SEEFRONTMATTER?2005ELSEVIERBVALLRIGHTSRESERVEDDOI101016/JEJPS200501011TKRISTMUNDSD′OTTIRETAL/EUROPEANJOURNALOFPHARMACEUTICALSCIENCES242005539–543541CELLSWERECULTUREDUNDERSTANDARDCONDITIONSINRPMI1640MEDIUMWITHLGLUTAMINEANDSUPPLEMENTEDWITH50IU/MLPENICILLINAND50?G/MLSTREPTOMYCINWITH10FETALCALFSERUMALLFROMGIBCOLIFETECHNOLOGIES,PAISLEY,UKFORTESTINGCELLSWEREPLACEDIN96WELLPLATESAT104CELLSPERWELLONEOFTHETESTSUBSTANCESWASADDEDINSTEPWISEDILUTIONS3HTHYMIDINEAMERSHAMPHARMACIABIOTECH,UKWASADDEDAT1?CIPERWELLAFTER24HOFCULTUREANDCULTURECONTINUEDFORFURTHER6HTHECELLSWERETHENHARVESTEDONTOGLASSFIBREFILTERSINAPACKARDC961960FILTERMAIDCELLHARVESTERANDTHENPLACEDINMICROSCINTOSCINTILLATIONLIQUIDTHERADIOACTIVITYWASCOUNTEDINATOPCOUNTSCINTILLATIONCOUNTERALLFROMPACKARDINSTRUMENTS,CONNECTICUT,USATHERESULTSAREEXPRESSEDASPERCENTAGEOFUNTREATEDCONTROL3RESULTS31EFFECTOFSOLUBILIZINGAGENTSONTHESOLUBILITYOFATRANORINTHESOLUBILITYOFATRANORININWATERWASNONDETECTABLEUSINGHPLCANATTEMPTWASMADETOSOLUBILIZEATRANORINUSINGTHESOLVENTSANDCOMPLEXANTSPREVIOUSLYFOUNDTOBESUITABLEFORTESTINGONCELLLINES,IEPROPYLENEGLYCOL,PEG400ANDHP?CDTHESOLUBILITYOFATRANORININPUREPEG400WASFOUNDTOBE037MG/MLANDINPROPYLENEGLYCOL0017MG/MLBUTTHEREWASNOMEASURABLESOLUBILITYOFATRANORININ10AQUEOUSMIXTURESOFTHESESOLVENTSHOWEVER,ATRANORINWASFOUNDTOBESOLUBLEINHP?CDFIG2SHOWSTHATTHESOLUBILITYOFATRANORININ10HP?CDISVERYLOWATPH6BUTISCONSIDERABLYHIGHERATPH80,00055MG/MLINSPITEOFHIGHERSOLUBILITYOFATRANORINATPH80THANTHEPHYSIOLOGICALPH74THELATTERWASCHOSENFORTHECELLEXPERIMENTSASTHESOLUBILITYOFATRANORININHP?CDWASLOWITWASATTEMPTEDTOUSEHP?CDTOINCREASEITSSOLUBILITYTHECENTRALCAVITYOFTHE?CYCLODEXTRINISLARGERTHANTHATOF?CYCLODEXTRINANDMIGHTTHEREFOREBEABLETOSOLUBILIZEMOREOFTHELICHENCOMPOUNDFIG2EFFECTOFPHONTHESOLUBILITYOFATRANORININ10?HYDROXYPROPYL?CYCLODEXTRINEACHPOINTREPRESENTSTHEMEAN±SDOFTHREEEXPERIMENTSFIG3EFFECTOFSOLUBILIZERCONCENTRATIONONATRANORINSOLUBILITYATPH74INSOLUTIONSOFHP?CD?ANDHP?CD?EACHPOINTREPRESENTSTHEMEAN±SDOFTHREEEXPERIMENTSTHIS,HOWEVER,WASNOTTHECASEFIG3SHOWSTHEEFFECTOFCYCLODEXTRINCONCENTRATIONONATRANORINSOLUBILITYATPH74THESOLUBILITYINCREASESASAFUNCTIONOFSOLUBILIZERCONCENTRATIONBUTTHEREISLITTLEDIFFERENCEINTHERESULTSOBTAINEDFORTHETWOCYCLODEXTRINSWITHTHEHP?CDBEINGSLIGHTLYBETTERATTHEHIGHESTCONCENTRATIONTESTED32EFFECTOFSOLUBILIZINGAGENTSONTHESOLUBILITYOFFUMARPROTOCETRARICACIDTHESOLUBILITYOFFUMARPROTOCETRARICACIDINWATERWASFOUNDTOBE00325MG/MLATPH4THESOLUBILITYWAS00069MG/MLBUTINCREASEDWITHINCREASINGPHANDWAS283MG/MLATPH74INSOLUTIONSOFBOTHPEG400ANDPROPYLENEGLYCOLTHESOLUBILITYOFFUMARPROTOCETRARICACIDAPPEAREDTOBEBETTERTHANINWATERALONE,BUTDUETODECOMPOSITIONOFTHECOMPOUNDINTHESESOLVENTSASWASAPPARENTFROMHPLCMEASUREMENTSITWASNOTPOSSIBLETODETERMINETHESOLUBILITYTHESOLUBILITYOFFUMARPROTOCETRARICACIDWASINCREASEDTO898MG/MLIN10HP?CDATPH74DECOMPOSITIONWASNOTSEENINTHECYCLODEXTRINSOLUTIONSPRESUMABLYBECAUSEAPARTOFTHEFUMARPROTOCETRARICACIDMOLECULEFITSINTOTHENONPOLARCYCLODEXTRINCAVITYANDISPROTECTEDFROMTHEENVIRONMENT33EFFECTOFTHELICHENCOMPOUNDSONTHYMIDINEUPTAKEOFCELLLINESTHETHREELICHENCOMPOUNDS,USNICACID,ATRANORINANDFUMARPROTOCETRARICACIDWERESOLUBILIZEDIN10SOLUTIONSOFHP?CDANDTESTEDATPHYSIOLOGICALPH74ONTHECELLLINESPANC1,T47DANDPC3THEEC50FORUSNICACIDAGAINSTPANC1WAS43?G/MLATASOLVENTCONCENTRATIONOF10?L/ML,WHICHISCOMPARABLETOTHEEC50PREVIOUSLYFOUNDAGAINSTK562OF47?G/MLTHEEC50FORUSNICACIDAGAINSTT47DWAS29?G/MLBUTAGAINSTPC3ITWASHIGHER,AT82?G/MLINCALCULATINGTHEEC50ACCOUNTWASTAKENOFDIRECTEFFECTSOFTHESOLVENTSTHESOLUBILIZINGAGENTHP?CDHADNOSIGNIFICANTEFFECTONPC3ANDPANC1BUTT47DWASMORESENSITIVE