簡介：細胞生物學細胞生物學以細胞為研究對象，應用近代物理學、化學、實驗生物學及分子生物學的技術和方法，從細胞整體水平、亞顯微水平和分子水平三個層面來研究細胞的結構及其生命活動規(guī)律的科學。醫(yī)學細胞生物學醫(yī)學細胞生物學以細胞生物學和分子生物學為基礎，研究和探討人體細胞的結構、功能、發(fā)生、發(fā)展、成長、衰老、死亡的生命活動規(guī)律及其發(fā)病機理和防治的科學。膜內在蛋白膜內在蛋白又稱膜整合蛋白質或鑲嵌蛋白。占膜蛋白總量的7080，其部分鑲嵌于膜中，以非極性氨基酸與脂雙層膜脂疏水區(qū)共價緊密結合，不易從膜上分離下來，跨膜蛋白也屬此列。膜外在蛋白膜外在蛋白他們不直接與脂雙層疏水部分直接相連，而通過靜電作用、離子鍵、氫鍵與脂分子極性頭部或膜整合蛋白質分子親水部分相互作用間接結合。主要分布在膜的內在表面，為水溶性蛋白質。細胞外被細胞外被存在于細胞表面的覆蓋物，富含糖類，也稱糖萼。一般指與質膜相連的糖類物質，是質膜中糖蛋白和糖脂向外延伸的寡糖部分。脂筏模型脂筏模型脂筏是指質膜外層富含膽固醇和鞘磷脂，富集而形成有序脂相的微結構域，是一種動態(tài)結構。脂筏像一個蛋白質停泊的平臺，其上載有蛋白質，與膜信號轉到有密切關系。①許多蛋白質聚集于脂筏，便于相互作用②脂筏提供蛋白質一個有利于構象變化的環(huán)境，形成有效構象。通道蛋白通道蛋白由A螺旋構成的介導被動運輸的跨膜蛋白，其形成親水G蛋白蛋白一種鳥嘌呤核苷酸結合蛋白，是由Α、Β、Γ三個亞基組成的異三聚體的可溶性的膜蛋白。是一種具有GTP酶活性，在細胞信號通路中起信號轉換器或分子開關作用的蛋白質NONO信號信號NO合成酶NOS催化精氨酸生成NO和瓜氨酸的信號。NOS活性受CA2/鈣調蛋白調控。NO是脂溶性的，血管內皮細胞和神經細胞是NO主要生成細胞。NO功能,激活可溶性GC，刺激CGMP合成，引發(fā)多種生物學效應。受體酪氨酸蛋白激酶受體酪氨酸蛋白激酶本身具有激酶活性，是單次跨膜蛋白，配體與受體結合導致受體二聚化，二聚體內彼此相互磷酸化胞內斷落氨酸殘基。內膜系統(tǒng)內膜系統(tǒng)指位于細胞質內在結構、功能、乃至發(fā)生上相聯(lián)系的膜性細胞結構的總稱。包括內質網，高爾基復合體，溶酶體等細胞器和胞質內膜性轉運小泡。信號肽信號肽指新合成的蛋白質端帶有的由1530個疏水氨基酸組成的肽段，能被SRP識別并引導蛋白質在合成過程中轉移至內質網膜上，最后被信號肽酶水解。蛋白質糖基化蛋白質糖基化指單糖或寡糖與蛋白質共價結合成糖蛋白的過程。包括N連接的糖基化和O連接的糖基化。起始轉移序列起始轉移序列位于多肽鏈內的一段疏水區(qū)段，具有與N端信號肽同樣的功能，只是不能被信號肽酶切除，從而成為膜蛋白的Α螺旋跨膜結構。終止轉移序列終止轉移序列肽鏈上的一段特殊序列，與內質網膜的親和力很

簡介：國外醫(yī)學輸血及血液學分冊2004年第27卷第5期NK細胞的免疫生物學特性王荷花綜述韓明哲審?！菊咳祟怤K細胞是機體抗腫瘤和抗病毒感染的天然免疫細胞，有自發(fā)的細胞毒功能，近1O年來人們發(fā)現NK細胞的識別也具有特異性。NK細胞表達多種受體，按受體識別的分子可分為HLAI類分子特異性受體、非HLAI類分子特異性受體和共受體三大類，功能上劃分為活化性受體和抑制性受體兩類，這些受體對NK細胞的功能有重要的調節(jié)作用。本文就NK細胞受體的特點和功能作一綜述，并探討開發(fā)NK細胞新型潛在細胞免疫治療的價值。【關鍵詞】自然殺傷細胞；受體；細胞免疫治療人類NK細胞由骨髓造血干細胞發(fā)育而來，約占外周血淋巴細胞的10～15，免疫表型特點為CD3一CD56，因細胞胞體大、胞漿量多、電鏡下觀察胞內含有致密顆粒，故又稱為大顆粒淋巴細胞。NK細胞的發(fā)育成熟非胸腺依賴性，也無抗原特異性受體的表達，因此最初被認為是一種天然免疫細胞，具有天然的和淋巴細胞因子活化的細胞毒活性、分泌有免疫調節(jié)功能的細胞因子以及抗體依賴性細胞介導的細胞毒活性。早期人們發(fā)現NK細胞殺傷的靶細胞常有HLAI類分子表達水平的下調I1，另外NK細胞也能介導排斥同種異體的正常骨髓細胞_2。近來隨著NK細胞受作者單位300020天津，中國醫(yī)學科學院中國協(xié)和醫(yī)科大學血液學研究所血液病醫(yī)院433綜述體的不斷發(fā)現及其對NK細胞功能調節(jié)的研究，使人們認識到NK細胞識別功能的特異性，有利于開發(fā)新的細胞免疫治療。1NK細胞受體NK細胞表達多種不同的受體，按其識別的配體可分為三大類3HLAI類分子特異性受體、非HLAI類分子特異性受體和其他受體，根據受體的結構特點又可劃分為免疫球蛋白樣超家族受體和C型凝集素超家族受體兩大家族I4。1．1HLAI類分子特異性受體這一大類受體識別的配體是HLAI類分子，它包括免疫球蛋白樣超家族受體殺傷細胞免疫球蛋白樣受體KILLERCELLIMMUNOGLOBULINLIKERECEPTORS，KIR23DRUKERBJ。SAWYERSCL，KANTARJIANH，ETA1．ACTIVITYOFASPECI．CINHIBITOROFTHEBETABLTYROSINEKINASEINTHEBLASTCRISISOFCHRONICMYELOIDLEUKEMIAANDACUTELYMPHOBLASTICLEUKEMIAWITHTHEPHILADELPHIACHROMOSOME．NENGLJMED，2001，34410381042．24KANTARJIANH，SAWYERSC，HOCHHAUSA，ETA1．HEMATOLOGICANDCYTOGENETICRESPONSESTOIMATINIBMESYLATEINCHRONICMYELOGENOUSLEUKEMIA．NENGLJMED，2002，346645652．25TALPAZM，SILVERRT，DRUKERBJ，ETA1．IMATINIBINDUCESDURABLEHEMATOLOGICANDCYTOGENETICRESPONSESINPATIENTSWITHACCELERATEDPHASECHRONICMYELOIDLEUKEMIA；RESULTSOFAPHASE2STUDY．BLOOD，2002，9919281937．26SAWYERSCL。HOCHHAUSA，FELDMANE。ETA1．IMATINIBINDUCESHEMATOLOGICANDCYTOGENETICRESPONSESINPATIENTSWITHCHRONICMYELOIDLEUKEMIAINMYELOIDBLASTCRISISRESULTSOFAPHASE1STUDY．BLOOD，2002，9935303539．27KANTARJIANHJORGEC，O’BRIENS，ETA1．HIGHRATESOFEARLYMAJORANDCOMPLETECYTOGENETICRESPONSESWITHIMATINIBMESYLATETHERAPYGIVENAT400MGOR800MGORALLYDAILYINPATIENTSWITHNEWLYDIAGNOSEDPHILADELPHIACHROMOSOMEPOSITIVECHRONICMYELOIDLEUKEMIAINCHRONICPHASE．PROCAMSOCCLINONCO1．2002。21261AABSTR．28DRUKERBJ，FORTHEIRISINTERNATIONALRANDOMIZEDIFNVS．STI571STUDYGROUPSTI571GLEEVEC／GLIVECIMATINIBVERSUSINTERFERONIFN一CYTARABINEASINITIALTHERAPYFORPATIENTSWITHCMLRESULTSOFARANDOMIZEDSTUDY．PROCAMSOCCLIN0NC。2002，21LAABSTR．29DRUKERBJ。SAWYERSCL，CAPDEVILLER，ETA1．CHRONICMYELOGENOUSLEUKEMIA．HEMATOLOGY，AMSOCHEMATOLEDUCPROGRAM2001，87112．3O0’BRIENSG，VALLANCESE，CRADDOCKC．ETA1．PEGINTRONANDST1571COMBINATIONEVALUATIONSTUDYPISCESINCHRONICPHASECHRONICMYELOIDLEUKAEMIA．BLOOD，2001。98846ASUPPL1，ABSTR．31DRUKERB，KANTARJIANH，TALPAZM，ETA1．APHASEISTUDYOFTHECOMBINATIONOFGLEEVECIMATINIBMESYLATEWITHLOWDOSEARAC．BLOOD，2001，98845ASUPPL1，ABSTR．32BRIANJ．DRUKER．IMATINIBALONEANDINCOMBINATIONFORCHRONIEMYELOIDLEUKEMIA．SEMINARSINHEMATOLOGY，2003，4015058．收稿日期2004一O4一O1本文編輯羅幼平IL￡}}維普資訊HTTP//WWWCQVIPCOM國外醫(yī)學輸血及血液學分冊2004年第27卷第5期HLAI類分子特異性活化性受體KIR和CD94／NKG2C、E、H的結構共同點是受體胞質尾短，無ITIM基序，受體活化信號的轉導需DAP12_1。DAP12胞質尾含有由YXXL／I氨基酸序列組成的2個ITAMIMMUNORECEPTORTYROSINEACTINGMOTIF基序。NK細胞活化性受體的集結導致YXXL序列中酪氨酸快速而短暫的磷酸化，隨后募集并活化蛋白酪氨酸激酶SYK或ZAP70轉導活化信號，使NK細胞活化。雖然NCR目前尚未明確配體，但與單克隆抗作用的研究發(fā)現其信號轉導類似于上述途徑，其中NKP46和NKP30的信號轉導通過含經典ITAM的信號轉導肽CD3鏈，NKP44則與DAP12結合。NKG2D活化信號的轉導由DAP10介導，與DAP12不同，DAP10分子胞質尾無ITAM結構，但含有一個YXXM氨基酸序列，其酪氨酸磷酸化后與PI一3亞單位P85結合，啟動活化信號的轉導口。因此，NKG2D活化信號的轉導途徑完全不同于NK細胞HLAI類分子特異性活化性受體。3NK細胞功能的調節(jié)很顯然，NK細胞的功能受其表達的抑制性受體和活化性受體轉導的負性信號和活化信號之間平衡機制調節(jié)。NK細胞表達的受體中，HLAI類分子特異的抑制性受體轉導抑制NK細胞活化的負性信號，NCR、NKG2D和HLAI類分子特異的活化性受體轉導活化信號，共受體則協(xié)同NK細胞功能的活化。對同一NK細胞表達的HIAI類分子特異性受體而言，雖然識別相同或相似HIAI類分子的KIR和CD94／NKG2抑制性受體和活化性受體都能與相應的配體結合，但通常抑制性受體與HLAI類分子結合的親和力顯著高于活化性受體N。另外，僅少數NK細胞克隆同時表達識別相同HLAI類分子同種型的活化性受體和抑制性受體，通常大多數NK細胞克隆表達的是不同HLA1分子同種型的抑制性受體。所以，在正常情況下，NK細胞的抑制性受體與自身正常細胞表達的HLAI類分子結合后，轉導抑制該NK細胞活化的負性信號，導致啟動NK細胞活化的早期階段分子失活，從而阻止NK細胞的活化，即NK細胞以轉導負性信號占優(yōu)勢。這也就阻止了NK細胞對宿主自身正常細胞的殺傷作用，避免自身免疫反應的發(fā)生。病理情況下，當NK細胞識別自身HIAI類分子水平下調或丟失的腫瘤細胞、病原體感染的細胞時，抑制性受體與HIAI類分子作用水平減低或不能與之結合，導致抑制NK細胞活化的信號減弱或缺乏，則啟動活化性受體轉導的活化信號，使該NK細胞活化，發(fā)揮細胞毒功能，裂解靶細胞。若該靶細胞同時表達MLCA／MLCB分子，可激活不同信號轉導途徑的活化性受體NKG2D，進一步增強NK細胞的活化信號，提高宿主的疾病防御能力。綜上所述，NK細胞通過表達多種受體的調節(jié)方式，整合抑制性受體和活化性受體轉導的負性信號和活化信號，使機體能夠區(qū)分自身正常細胞和HLA1分子水平下調或丟失的異常細胞，從而闡明了NK細胞免疫監(jiān)視“丟失自我”MISSINGSELF假說的機制。4NK細胞的免疫治療應用NK細胞識別“自己”和“非己”的特性，調節(jié)NK細胞的活性，可能為免疫治療提供新的途徑。理論上阻斷抑制性受體與MHCI類分子的相互作用，解除對NK細胞活化的抑制，能夠有效增強NK細胞的抗腫瘤效應。KOH等N實驗研究證明，采用單克隆抗體封閉同基因小鼠NK細胞抑制性受體或者過繼性MHCI不相合異基因NK細胞凈化骨髓和自體骨髓移植后的維持治療，有效提高了白血病小鼠長期無白血病復發(fā)存活率，同時對造血重建無明顯影響。這一效應同樣能在病毒感染如巨細胞病毒感染時巨細胞病毒能夠編碼MHCI類分子樣類似物以逃逸免疫系統(tǒng)的殺傷發(fā)揮作用。在異基因造血干細胞移植中ALLOSCT，供一受者問NK細胞識別的特異性主要指抑制性受體識別的特異性，即兩者抑制性受體識別的配體是否相合，另外由于移植預處理的作用使受者NK細胞基本被清除，所以移植后主要存在的是供者NK細胞的同種反應性，即指受者MHCI類基因不編碼供者所有NK細胞抑制性受體識別的MHCI類分子。因此，此NK細胞亞群KIR抑制性受體不能與受者MHCI類分子結合，從而阻斷抑制信號的轉導，有利于供者NK細胞的活化，增強移植后抗殘留腫瘤細胞的功能。RUGGERI等發(fā)現在白血病患者HLA半相合干細胞移植后，供一受者方向KIR一配體不相合的受者體內可檢測到供者同種反應性NK細胞克隆，并證明供一受者方向KIR一配體不相合有利于患者的長期無病生存，同時防止急性移植物抗宿主病GVHD的發(fā)生。小鼠移植模型證明供者同種反應性NK細胞不僅能夠有效清除殘留白血病細胞，而且分別通過進一步清除受者預處理殘留的T細胞和抗原遞呈細胞，促進植入以及阻止AGVHD。后來GIEBEL等223在白血病患者無關供者造血干細胞移植中也證明供一受者方向KIR表位不相合有助于患者的無病生存，減少Ⅲ～Ⅳ度AGVHD的發(fā)生。實際上，同種反應性NK細胞主要攻擊受者造血細維普資訊HTTP//WWWCQVIPCOM

簡介：午曉群等NKG2D真核表達載體的構建及其對YT細胞生物學功能的影響第L2期分子與細胞免疫學NKG2D真核表達載體的構建及其對YT細胞生物學功能的影響①許曉群張建⑦④張彩游力張建華劉金生王郡甫高春義田志剛⑦山東省醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所，濟南250062885中國圖書分類號92．12文獻標識碼A文章編號100X20O5120885．04摘要目的建立NK細胞受體NKG2D真核表達載體，通過轉染NK細胞系YT，初步探討NKG2D分子對YT細胞系殺傷功能的增強作用。方法用RTPCR方法從NK92細胞中調取NKG2D基因片段，克隆到PGEM．TEASY載體并對克隆的DNA片段進行序列分析。用限制內切酶EEORI和BAMHI消化PCEM．TEASY／NKG2D重組質粒，分離NKG2D片段，并插入真核表達質粒PEGFPN1的相應限制酶位點，酶譜分析鑒定重組表達載體PEGFPN1／NKG2D。然后經脂質體介導轉染CHO細胞和YT細胞。應用熒光顯微鏡觀測、WESTERNBLOT方法和免疫組化染色對轉染細胞內PEGFPNI／NKG2D的表達進行鑒定，MTR方法觀察YT細胞對腫瘤細胞的殺傷功能。結果RTPCR擴增獲得650BP基因片段，經DNA序列分析證明所獲得的DNA序列與文獻報道的NKG2D序列一致。轉染的CHO細胞在熒光顯微鏡下發(fā)出強綠色熒光，WESTERNBLOT分析顯示重組蛋白能特異地與抗人NKG2D單克隆抗體結合；免疫組化檢測顯示，轉染的CHO中有棕色顆粒，證明所構建的NKG2D真核表達載體可以在細胞中表達；轉染NKG2D真核表達載體的YT細胞對乳腺癌細胞具有更強的殺傷效果。結論所獲得的表達NKG2D分子的真核表達載體，通過轉染YT細胞，初步鑒定所表達NKG2D分子具有生物學功能，可以提高NK細胞對腫瘤細胞的殺傷活性。關鍵詞NKG2D受體；NK細胞；基因轉染；真核表達CONSTRUCTIONOFNKG2DEUKARYOTICEXPRESSIONVECTORANDEFECTONYTCELLBIOLOGICALFUNCTIONXU‰，ZHANGJ／AN，ZHANGCAI，YOU12，ZHANGANHNA，刪J／NSHENG，WANGJUNFU，GAOCHUNYI，TIANZHIGANG．INSTITUEOFBASICMEDICINE，SHANDONGACADEMYOFMEDICALSCIENCE，J／NAN250062，CHINAABSTRACTOBJECTIVETOESTABLISHNKCELLRECEPTORNKG2DEUKARYOTICEXPRESSIONVECTORANDINVESTIGATEONTHECYT0CITYOFNKCELLFINYTTRAECTEDWITHNKG2D．METHODSANKG2DGENEFRAGMENT，WITHALENGTH0FABOUT650BP，WASAMPLIFIEDFROMTHENK一92CEILLINEBYRTPCRANDWASSEQUENCEDBYCLONEDTOPNIDPGEMTEASY．THERECOMBINANTPLMIDPCTEASY／NKG2DWASDIGESTEDWITHECOR工ANDBAMH工，THENNKG2DFRAGMENTWASISOLATEDANDINSERTEDINTOTHECORRESPONDINGRESTRICTIONSITEONEUKARYOFIEEXPRESSIONVECTORPEGFPN1．THELIPOFECTINWASUSEDTOTRANSECTMCOMBIMNTEUKARYO6EEXPRESSIONPLASMIDINTOTHECHOANDYRCELLS．THEEXPRESSIONLEVELOFNKG2DGENEINTMECTEDCHOCEILSWASDETECTEDBYFLUORESCENCEMICROSCOPY，WESTERNBLOTANDIMMUNOHISTOEHOMICALSTAINING．RESULTSTHENGTHOFEDNAFRAGMENTAMPLIFIEDBYRTPCRWASCONSISTENTWITHTHAT0FNKG2D．DNASEQUENCING0FPGEMTEASY／NKG2DREVEALEDTHATTHECLONEDDNASQUENCEWASIDENTICALTOTHAT0FREPORTEDNKG2D．THEEENFLUORESCENCECOULDBESEENINTRANSFECTEDCHOCELLSUNDERFLUORESCCNEEMICROSCOPE．WESTERNBLOTANDIMMUNOHISTOCHEMICALSTAI,DETECTIONSHOWEDTHATNKG2DEXPRESSEDINTRANSFECTEDCELLS．TRANSFECTEDYTCELLSHAVESTRONGEREYTOTOXICITYAGAINSTTUMORCEIL．CONDUSIONNKG2DEUKARYOAEEXPRESSIONVECTORSHOWEDBIOLOGICALFUNCTIONBYTRANSFEETEDINTONKCEILLINEYTANDCOULDINCREASEYTCYTOLYFIEACTIVITY．KEYWORDSNKG2DRECEPTOR；NKCEIL；GENETRANSFECFION；EUKARYOFICEXPRESSIONNKG2D是近年來發(fā)現的表達于NK細胞、NKT細胞、7KI細胞及CD8細胞等效應細胞表面的NK細胞受體，是NK細胞識別靶細胞的一種主要結構“。由于腫瘤細胞不表達或低表達MHC．I①本文受國家自然科學基金項目30371302、3047152和山東省自然科學基金資助項目YMCZ4資助②山東大學藥學院，濟南250012③通訊作者作者簡介許曉群1975年一，男，碩士，助理研究員，主要從事基因工程和分子免疫學研究。類分子，使得腫瘤特異性MHC限制性細胞毒性T細胞CTL不能發(fā)揮作用。在這種情況下，識別非MHC．I類分子的NKG2D在介導NK細胞識別并溶解腫瘤細胞及感染細胞的免疫應答中可能發(fā)揮關鍵作用L2】。近年來，對于NK細胞的分化發(fā)育、識別殺傷和功能調節(jié)的分子機制的研究日益引起重視。我們旨在構建NKG2D基因的真核表達載體并轉染NK細胞系，為進一步研究NKG2D如何在NK細胞中發(fā)揮效應功能及其腫瘤生物治療的應用提供一種研究工具。維普資訊HTTP//WWWCQVIPCOM午曉群等NKG2D真核表達載體的構建及其對YR細胞生物學功能的影響第12期ECORLBAMHLIECORLIBAMHLECORI_PG．FPNN／NKG2D535BPIFEGFP／KANNEOR／／HIE．1?1D川R圖1重組質粒PEGFP．N1／NKG2D構建示意圖№．1SCHEMATICCONSTRUCTIONOFPLASMIDPEGFPN1／NKG2D圖2重組質粒PEGFPN1／NKG2D的酶切鑒定№．2RESTRICTIVEENZYMEDIGESTIONANALYSISOFRECOMBINANTPLASMIDPEGFP．N1／NKG2DNOTE1．NKG2DGENEFR,TNONT；2．PEGFPNI／NKG2DDIGESTEDWITHECORIANDBANLHI3．PCEM．TEASY／NKG2DDIGESTEDTHECORIANDBAMHI；4．1KBDNAMARKER．圖3GFP在CHO中的表達200№．3EXPRESSIONOFGFPINCHOS200NOTECHOSTRANSFECTEDBYPEGFPNI／NKG2DAFTER24HOURS．KDA6050402520一L5一88728圖4WESTERNBLOT鑒定NKG2D重組蛋白№．4ANALYSISOFRECOMBINANTPROTEINNKG2DBYWESTERNBLOTNOTE1．PRESTAINEDPROTEINLADDER；2．NONTRANDECTEDCHOS；3．CHOSTLDBFTEDBYPEGFPNI／NKG2D．AB圖5免疫組化染色檢測NKG2D在CHO中表達200№．5DETECTIONOFNKG2DEXPRESSIONINCHOSBYILI,DNUNOHISTOCHEMICALSTALG200NOTEA．CHOTRANSFECTEDBYEMPTYPLASMID；B．CHOTRANDECTEDBYPEG}3NI／NKG2D．圖6NKG2D對YT細胞殺傷OMDA231乳腺癌細胞的影響№．6INFLUENCEOFNKG2DONYT曲AGAINSTOMDA231CELLS2．3NKG2D真核表達載體轉染的CHO細胞中NKG2D表達水平的鑒定①綠色熒光鑒定將重組質粒PEGFPN1／NKG2D轉染CHO細胞繼續(xù)培養(yǎng)24、．旌一譬鬻辨。踟∞鯽加加一O／0一魯I3L蓉；U維普資訊HTTP//WWWCQVIPCOM

簡介：1干細胞生物學干細胞生物學一、緒論；干細胞概述；干細胞增殖、分化與調控；一、緒論；干細胞概述；干細胞增殖、分化與調控；1、干細胞、干細胞（STEMCELLS，SCS）是機體在整個生命期中具有自我更新、增殖能力和分化潛能的未分化細胞群。干細胞群的功能是控制和維持細胞、組織、器官的再生及生命體的相對穩(wěn)態(tài)。2、干細胞生物學、干細胞生物學（STEMCELLBIOLOGY）是以干細胞為研究對象，應用現代物理學、化學和實驗生物學技術、方法，從顯微、亞顯微、分子水平等多層次研究干細胞的發(fā)生、發(fā)育、分化等生命活動機制、規(guī)律以及應用的一門新興科學。簡單說，研究干細胞及其生物學特性的科學稱干細胞生物學。3、干細胞生物學研究內容、干細胞生物學研究內容?1基因治療?2干細胞生物工程，細胞、組織、器官移植治療?3研究胚胎發(fā)生、發(fā)育機制、組織細胞分化、基因表達調控?4新型生物材料工程、新藥的研制、開發(fā)與藥效、毒性評估?5基因嫁接與物種改良、轉基因動物?6做實驗平臺進行疾病發(fā)病學研究?7新基因發(fā)掘、基因功能分析?8制造新物種4、生物經濟與第四次浪潮、生物經濟與第四次浪潮在信息經濟時代進入成熟階段之前，生物經濟即在孕育，但其孕育期遠長于信息經濟時代的孕育期。以1953年弗蘭西斯克拉克（FRANCISCRICK）和詹姆斯沃森（JAMESWATSON）發(fā)現DNA雙螺旋結構為標志，生物經濟時代進入孕育階段。人類基因組破譯的完成和發(fā)表標志著孕育階段的終結，當前人類社會已進入生物經濟的成長階段1。正如只有當信息經濟發(fā)展到成熟階段才能稱為進入信息經濟時代一樣，只有當生物經濟進入其成熟階段，才可以稱為進入了生物經濟時代。5、干細胞分類、干細胞分類21根據發(fā)育階段分為二類211胚胎干細胞212成體干細胞22按其分化潛能，分為三類221全能干細胞2221三胚層多能干細胞2222單胚層多能干細胞223單能干細胞23根據發(fā)生、來源分為四類231胚胎干細胞232胎兒干細胞233成體干細胞234人造干細胞2341核移植干細胞2342細胞融合雜交干細胞2343基因改造干細胞25根據組織性質分類251上皮組織干細胞252結締組織干細胞253肌肉組織干細胞254神經組織干細胞255器官組織干細胞256胚胎組織干細胞257腫瘤組織干細胞26根據發(fā)育進程分類261干細胞262短暫增殖細胞263祖細胞6、干細胞特點、干細胞特點干細胞本身不是處于分化途徑的終端；332根據個體克隆對象個體克隆對象分類分為動物克隆、植物克隆等2種類型。33根據供體細胞來源供體細胞來源分類分為同種胚胎細胞克隆、同種成體細胞克隆、異種胚胎細胞克隆、異種成體細胞克隆等4種類型。34根據克隆應用目的克隆應用目的分類分為治療性克隆、生殖性克隆或繁殖性克隆、克隆人等2種類型。國際人類基因組倫理委員會國際人類基因組倫理委員會關于克隆的聲明，將克隆分為生殖性克隆、基礎性研究和治療性克隆3類。分子克隆分子克隆指利用DNA重組技術將特定基因或DNA序列插入載體以獲得大量相同基因DNA序列的過程；細胞克隆細胞克隆指由一個單一的共同祖先細胞分裂所形成的一個細胞群體即細胞克??；個體克隆個體克隆指基因型完全相同的2個或更多個體組成的一個群體，也可指代群體中的一個個體。4、核移植、核移植利用顯微操作儀將外源細胞的核移入去核卵母細胞或其它具有重編程（REPROGRAMMING）能力的細胞中，經人工活化以及體內或體外培養(yǎng)后如果目的是克隆出一個人胚胎獲取全能干細胞，然后利用干細胞誘導、分化獲得各種組織特異性細胞、組織甚至器官移植以治療疾病的則稱為治療性克隆THERAPEUTICCLONING；如果目的是為了克隆出一個人的胚胎而移植入代孕母體發(fā)育為含有與供體細胞相同遺傳物質的個體則稱為生殖性克隆（REPRODUCTIVECLONING）。5、治療性克隆、治療性克隆治療性克隆是指通過核移植技術構建來源于病人成體細胞的胚胎，待胚胎發(fā)育至胚泡階段后取出內細胞團，在體外培養(yǎng)胚胎干細胞，然后定向誘導胚胎干細胞分化成病人所需要的細胞類型，再移植回病人身上；或通過組織工程構建病人所需要的組織或器官，移植給病人，來替代或補充病變或受到損傷的細胞、組織或器官，從而實現對疾病的治療。6、細胞核重編程、細胞核重編程細胞核重編程細胞核重編程使在正常胚胎發(fā)育中表達、而在成體細胞中被關閉的基因重新激活、供體細胞核完全恢復全能性的過程稱為細胞核重編程。外生性重編程機制體細胞核轉移入卵細胞后在外生性重編程序中可能受到影響的機制有DNA甲基化、基因“印記”、X染色體的失活、染色質的重新塑造、組蛋白的變更、端粒體的維持以及外生標記的遺傳傳遞等。7、生命起點的科學爭論、生命起點的科學爭論科學的爭論人胚胎干細胞創(chuàng)造胚胎干細胞在一個完整的鏈條中，通過每一個母親的卵子都可追溯到30億年前地球表面的第一個細胞。精子和卵子相遇的那一刻，為生命提供了一個浪漫的起點，但事實上那一刻相當模糊。如果DNA結合是一個標志性事件，那么就不能說生命的起點在受精的那一刻。從生物學的觀點看，受精不足以作為新生命的標志。直到大約第14天，胚泡有了分裂形成孿生的能力。我們不習慣看著一個人分裂成兩個。第8周腦開始成形。感覺能力是否可以作為生命開始的有用的標志呢這或許也是生命結束的很好分界點。三、成體干細胞概述成體干細胞概述、上皮組織干細胞上皮組織干細胞、結締組織干細胞結締組織干細胞、肌肉組織干細胞肌肉組織干細胞1、成體干細胞、成體干細胞（ADULTADULTSTEMSTEMCELLSCELLS，ASCSASCS）是指存在于胎兒、兒童和成人已經分化的各）是指存在于胎兒、兒童和成人已經分化的各組織器官中尚未分化的、具有自我更新潛能并負有構建和補充組織各種類型細胞的細胞組織器官中尚未分化的、具有自我更新潛能并負有構建和補充組織各種類型細胞的細胞群，又名組織干細胞（群，又名組織干細胞（TISSUETISSUESTEMSTEMCELLSCELLS）、體細胞干細胞（）、體細胞干細胞（SOMATICSOMATICSTEMSTEMCELLSCELLS）。）。2、成體干細胞來源、分布、分類、成體干細胞來源、分布、分類2121細胞來源細胞來源①胚胎細胞由胚胎干細胞定向分化，或移植分化而成；胚胎細胞由胚胎干細胞定向分化，或移植分化而成；

簡介：中文中文3825字出處出處KRISTMUNDSDóTTIRT,JóNSDóTTIRE,?GMUNDSDóTTIRHM,ETALSOLUBILIZATIONOFPOORLYSOLUBLELICHENMETABOLITESFORBIOLOGICALTESTINGONCELLLINESJEUROPEANJOURNALOFPHARMACEUTICALSCIENCES,2005,245539543不溶性地衣代謝產物的增溶作用在細胞系的生物學測試不溶性地衣代謝產物的增溶作用在細胞系的生物學測試摘要摘要荔枝素縮酚酸和富馬原島衣酸縮酚酸環(huán)醚，分別是從珊瑚枝屬的高山柳葉菜地衣和冰島地衣屬提取出來的，分別被選做為不溶性天然化合物的原型，以方便在藥理模型中的測試。增溶劑在之前就被認定是做為從無毒性走向一個惡性白血?。↘562）細胞株和氧芴地衣代謝物（）地衣酸溶解研究中使用的縮酚酸及縮酚酸環(huán)醚的反增生性活動的測試。環(huán)糊精衍生物是之前發(fā)現的最適合增溶的地衣化合物，已經確認在富馬原島衣酸的溶解度上有了最大的提高，從水中003MG/ML到898MG/ML在10的2羥丙基Β環(huán)糊精（HPΒCD），提高了將近300倍。隨后,地衣化合物包括（）地衣酸，溶解在10的HPΒCD中，測試在3種惡性的人類細胞系T47D（胸腺），PANC胰腺和PC3（前列腺）的標準細胞增殖實驗。荔枝素和富馬原島衣酸沒有展現出有反增殖影響，但是地衣酸可以有效的對抗所有測試細胞系和半數效應濃度值4382ΜG/ML。在本實驗中使用的無毒的增溶劑可以證明其他可溶性就差的天然產品的藥理學測試。?2005ELSEVIERPV，保留最終解釋權。關鍵詞關鍵詞地衣代謝物；溶解度；細胞系；富馬原島衣酸；荔枝素；地衣酸。11介紹介紹冰島地衣中的一些次級代謝產物在人類惡性細胞系測試中展現了可喜的反增殖結果。相同原料的代謝產物在無毒溶劑中的進一步測試是存在的但是經常被不溶性的所阻礙。許多方法是可以試著去增加不溶性物質的溶解度，比如使用助溶劑，表面活性劑，有機絡合劑。然而這些方法必須是對培養(yǎng)基中的細胞無害的溶劑系統(tǒng)。在先前研究地衣代謝物（）地衣酸（圖1）中，氧芴衍生物作為原型的目的是找到一個既能夠溶解地衣酸，同時不會對細胞系的測試產生影響的不溶于水的天然產物。各種溶劑和絡合劑的直接產物是用來在人類白血病細胞K562標準細胞增殖實驗中的測試。大部分的化合物是有毒的，除了聚乙二醇400（PEG400）和2羥丙基Β環(huán)糊精絡合劑（HPΒCD）。地衣酸的反增生活性可以證明使用PEG400和HPΒCD的半數有效濃度47ΜG/ML，但是只有后者給出了滿意的溶解度。2羥丙基Β環(huán)糊精因此被作為一種增溶劑，因為它同時滿足溶解度以及對細胞測試的無毒性。地衣酸在每日攝取100200MG劑量時會引發(fā)肝中毒。除了氧芴衍生物比如地衣酸，地衣類的次級代謝產物有很大數量的縮酚酸和縮酚酸環(huán)醚的化學分類。兩者都是通過芳香羧酸的酯化反應形成的單位。除了酯鍵和含有一個分子內氧橋的縮酚酸環(huán)醚。許多這種化合物在地衣類是結構獨特的，很值得去進行藥理測試。然而很多時候他們的溶解性很差。目前調查的目標是雙重的，首先是選擇一個說溶性很差縮酚酸和縮酚酸環(huán)醚的典型，并且在使用之前找到的對細胞系毒性很小的溶劑和絡合劑時能夠明顯提高他們溶解度。分別選中了從冰島珊瑚枝屬高山柳葉菜中提取的荔枝素和從冰島衣多毛屬提取的富馬原島衣酸。其次是在3中人類惡性為6的10HPΒCD溶解度很低，但是在PH為8時，有更高的溶解度00055MG/ML。盡管PH為8的荔枝素溶解度比PH為74的生理的高，但是后者是選擇作為細胞實驗的。由于荔枝素在HPΒCD中的溶解度很小，所以嘗試去選擇HPΓCD增加溶解度。Γ環(huán)糊精的中心空腔比Β環(huán)糊精的要大，因此它可能使地衣化合物的溶解度更高。但是，這并非如此。圖3顯示的是環(huán)糊精濃度在PH為74的荔枝素的溶解度。溶解度的增加與增溶劑濃度做了一個函數，但是還是有很小的不同在后面得到的兩個環(huán)糊精和HPΓCD在高得濃度測試中相對要好。3232增溶劑對富馬原島衣酸溶解度的影響。增溶劑對富馬原島衣酸溶解度的影響。富馬原島衣酸在水中的溶解度是00325MG/ML，在PH為4時溶解度是00069MG/ML，并且隨著PH的增加溶解度也在增長，在PH為74時，溶解度是283MG/ML。在同時使用PEG400和丙二醇時，富馬原島衣酸的溶解度要比只有水的時候要好，但是由于在這些溶液中的化合物的分解是通過HPLC測量的，所以它不能反應溶解度。富馬原島衣酸的溶解度在PH為74的10的HPΒCD中是898MG/ML。分解在環(huán)糊精溶液中可能是看不到的，因為一部分富馬原島衣酸的很適合非極性的環(huán)糊精空腔并可以從外界環(huán)境中保護它。3333地衣化合物對細胞吸收胸苷的影響。地衣化合物對細胞吸收胸苷的影響。將地衣酸、荔枝素和富馬原島衣酸三種地衣化合物溶解在10的HPΒCD溶液中，并分別在PANC1、T47D和PC3的PH為74的細胞系中進行測試。松蘿酸在溶劑濃度為10ΜL/ML中抑制PANC1的半數有效濃度是43ΜG/ML，與之相比松蘿酸對K562的半數有效濃度是47ΜG/ML。松蘿酸抑制T47D的半數有效濃度是29ΜG/ML，抑制PC3的半數有效濃度是相對高的82ΜG/ML。計算得到這個半數有效濃度對溶劑有直接的影響。HPΒCD這個增溶劑對PC3和PANC1沒有明顯的作用，但是T47D是更加敏感的，而且在有效的劑量范圍內對胸苷的吸收有一個明顯的3080的減少。荔枝素對T47D的溶劑和溶解度的抑制作用就像那個是很有限的，也是因此決定不在其他細胞表面進行試驗。富馬原島衣酸對T47D和PANC1并沒有一個很好的抑制作用。44討論。討論?，F在溶解度研究是選擇最好的使用溶劑，并且它有很小的溶解度，而且還是在地衣類中是廣泛分布的。盡管它們相對其他地衣代謝物相對豐度是很高的，這些化合物在藥理的觀點內從未收到應有的重視。先前的工作已經確定了在細胞培養(yǎng)中的適合的增溶劑丙二醇、PEG400、HPΒCD。HPΒCD是已經發(fā)現的有增加氧芴衍生物地衣酸抑制惡性細胞系測試的溶解度（KRISTMUNDSDOTTIRETAL,2002）在試圖使用增溶的化合物去增加及其不佳溶解度的縮酚酸衍生物荔枝素和縮酚酸環(huán)醚衍生物富馬原島衣酸后，發(fā)現縮酚酸環(huán)醚比縮酚酸更容易溶解。荔枝素溶解度的增加順序是無HPLC在水中檢測的HPLC使用HPΒCD和HPΓCD。這種增加不能足夠的曾明明顯的反增生實驗，荔枝素也不能證明是及其困難增溶的候選物。荔枝素在細胞增長方面與它的溶劑相比不能引起明顯的減少，因此不可能做出任何假設在荔枝素的反增生反應是由于它的很差的溶解性。另一方面富馬原島衣酸在水中的溶解度從003MG/ML增加到了在10HPΒCD的898MG/ML，因此具有更多剛性環(huán)的富馬原島衣酸比荔枝素更適合環(huán)糊精空腔。除了增加溶解度，HPΒCD溶液也可以增加富馬原島衣酸的穩(wěn)定性。大概延胡索酸酯可以保護環(huán)糊精復合物的水解，由于

簡介：EUROPEANJOURNALOFPHARMACEUTICALSCIENCES242005539–543SOLUBILIZATIONOFPOORLYSOLUBLELICHENMETABOLITESFORBIOLOGICALTESTINGONCELLLINESTH′ORD′ISKRISTMUNDSD′OTTIRA,?,ELSAJ′ONSD′OTTIRA,HELGAM¨OGMUNDSD′OTTIRB,C,KRIST′INING′OLFSD′OTTIRAAFACULTYOFPHARMACY,UNIVERSITYOFICELAND,HAGI,HOFSVALLAGATA53,REYKJAVIKIS107,ICELANDBFACULTYOFMEDICINE,UNIVERSITYOFICELAND,REYKJAVIK,ICELANDCMOLECULARANDCELLBIOLOGYRESEARCHLABORATORY,ICELANDICCANCERSOCIETY,REYKJAVIK,ICELANDRECEIVED8JULY2004RECEIVEDINREVISEDFORM11JANUARY2005ACCEPTED14JANUARY2005ABSTRACTTHEDEPSIDEATRANORINANDDEPSIDONEFUMARPROTOCETRARICACID,ISOLATEDFROMTHELICHENSSTEREOCAULONALPINUMANDCETRARIAISLANDICA,RESPECTIVELY,WERECHOSENASPROTOTYPESFORPOORLYSOLUBLENATURALCOMPOUNDSINANEFFORTTOFACILITATETESTINGINPHARMACOLOGICALMODELSSOLUBILIZINGAGENTSPREVIOUSLYIDENTIFIEDASBEINGNONTOXICTOWARDSAMALIGNANTLEUKEMICK562CELLLINEANDSUITABLEFORTESTINGOFANTIPROLIFERATIVEACTIVITYOFTHEDIBENZOFURANLICHENMETABOLITEUSNICACIDWEREUSEDINSOLUBILIZATIONSTUDIESOFTHEDEPSIDEANDDEPSIDONECYCLODEXTRINDERIVATIVESWEREFOUNDTOBEMOSTSUITABLEFORSOLUBILIZINGTHELICHENCOMPOUNDS,THEGREATESTRISEINSOLUBILITYBEINGWITNESSEDFORFUMARPROTOCETRARICACID,INCREASINGALMOST300FOLDFROM003MG/MLINWATERTO898MG/MLIN102HYDROXYPROPYL?CYCLODEXTRINHP?CDSUBSEQUENTLY,THELICHENCOMPOUNDS,INCLUDINGUSNICACID,WERESOLUBILIZEDIN10HP?CDANDTESTEDFOREFFECTSONTHREEMALIGNANTHUMANCELLLINEST47DBREAST,PANC1PANCREASANDPC3PROSTATEINASTANDARDPROLIFERATIONASSAYATRANORINANDFUMARPROTOCETRARICACIDDIDNOTEXHIBITANTIPROLIFERATIVEEFFECTSBUTUSNICACIDWASACTIVEAGAINSTALLTESTCELLLINESWITHEC50VALUESOF43–82?G/MLTHENONTOXICSOLUBILIZINGAGENTSUSEDINTHISSTUDYCOULDPROVEUSEFULFORPHARMACOLOGICALTESTINGOFOTHERPOORLYSOLUBLENATURALPRODUCTS?2005ELSEVIERBVALLRIGHTSRESERVEDKEYWORDSLICHENMETABOLITESSOLUBILITYCELLLINESFUMARPROTOCETRARICACIDATRANORINUSNICACID1INTRODUCTIONSOMESECONDARYMETABOLITESFOUNDINICELANDICLICHENSHAVESHOWNPROMISINGANTIPROLIFERATIVERESULTSININVITROTESTSONMALIGNANTHUMANCELLLINES¨OGMUNDSD′OTTIRETAL,1998HARALDSD′OTTIRETAL,2004FURTHERTESTINGOFOTHERCANDIDATESOFTHESAMEORIGINHASHOWEVEROFTENBEENHAMPEREDBYTHEPOORSOLUBILITYTHATMANYOFTHESEMETABOLITESSHOWINNONTOXICSOLVENTSNUMEROUSWAYSAREPOSSIBLEWHENTRYINGTOINCREASETHESOLUBILITYOFPOORLYSOLUBLESUBSTANCES,FOREXAMPLETHEUSEOFCOSOLVENTS,SURFACANTSANDCOMPLEXFORMINGAGENTSTINWALLAETAL,1993JONKMANDEVRIESETAL,1996LIETAL,1999A,BTHESEMETHODSMUSTHOWEVER?CORRESPONDINGAUTHORTEL3545254370FAX3545254071EMAILADDRESSTHORDISKHIISTKRISTMUNDSD′OTTIRPRODUCESOLVENTSYSTEMSTHATARENONTOXICFORTHECELLSINCULTUREINAPREVIOUSSTUDYTHELICHENMETABOLITEUSNICACIDFIG1,ADIBENZOFURANDERIVATIVE,WASUSEDASAPROTOTYPEFORAWATERINSOLUBLENATURALPRODUCTWITHTHEAIMTOFINDASOLVENTTHATWASBOTHCAPABLEOFSOLUBILIZINGUSNICACIDANDWASFREEOFDIRECTACTIVITYAGAINSTATESTCELLLINETHEDIRECTEFFECTSOFVARIOUSSOLVENTSANDCOMPLEXANTSWERETESTEDONTHEHUMANLEUKEMIACELLLINEK562INASTANDARDPROLIFERATIONASSAYMOSTOFTHECOMPOUNDSPROVEDTOXICWITHTHEEXCEPTIONOFTHESOLVENTSPROPYLENEGLYCOLANDPOLYETHYLENEGLYCOL400PEG400ANDTHECOMPLEXANT2HYDROXYPROPYL?CYCLODEXTRINHP?CDANTIPROLIFERATIVEACTIVITYOFUSNICACIDCOULDBEDEMONSTRATEDWITHANEC50OF47?G/MLUSINGPEG400AND2HYDROXYPROPYL?CYCLODEXTRINBUTONLYTHELATTERGAVESATISFACTORYSOLUBILITY2HYDROXYPROPYL?CYCLODEXTRINWASTHUSIDENTIFIEDASASOLUBILIZINGAGENTTHAT09280987/–SEEFRONTMATTER?2005ELSEVIERBVALLRIGHTSRESERVEDDOI101016/JEJPS200501011TKRISTMUNDSD′OTTIRETAL/EUROPEANJOURNALOFPHARMACEUTICALSCIENCES242005539–543541CELLSWERECULTUREDUNDERSTANDARDCONDITIONSINRPMI1640MEDIUMWITHLGLUTAMINEANDSUPPLEMENTEDWITH50IU/MLPENICILLINAND50?G/MLSTREPTOMYCINWITH10FETALCALFSERUMALLFROMGIBCOLIFETECHNOLOGIES,PAISLEY,UKFORTESTINGCELLSWEREPLACEDIN96WELLPLATESAT104CELLSPERWELLONEOFTHETESTSUBSTANCESWASADDEDINSTEPWISEDILUTIONS3HTHYMIDINEAMERSHAMPHARMACIABIOTECH,UKWASADDEDAT1?CIPERWELLAFTER24HOFCULTUREANDCULTURECONTINUEDFORFURTHER6HTHECELLSWERETHENHARVESTEDONTOGLASSFIBREFILTERSINAPACKARDC961960FILTERMAIDCELLHARVESTERANDTHENPLACEDINMICROSCINTOSCINTILLATIONLIQUIDTHERADIOACTIVITYWASCOUNTEDINATOPCOUNTSCINTILLATIONCOUNTERALLFROMPACKARDINSTRUMENTS,CONNECTICUT,USATHERESULTSAREEXPRESSEDASPERCENTAGEOFUNTREATEDCONTROL3RESULTS31EFFECTOFSOLUBILIZINGAGENTSONTHESOLUBILITYOFATRANORINTHESOLUBILITYOFATRANORININWATERWASNONDETECTABLEUSINGHPLCANATTEMPTWASMADETOSOLUBILIZEATRANORINUSINGTHESOLVENTSANDCOMPLEXANTSPREVIOUSLYFOUNDTOBESUITABLEFORTESTINGONCELLLINES,IEPROPYLENEGLYCOL,PEG400ANDHP?CDTHESOLUBILITYOFATRANORININPUREPEG400WASFOUNDTOBE037MG/MLANDINPROPYLENEGLYCOL0017MG/MLBUTTHEREWASNOMEASURABLESOLUBILITYOFATRANORININ10AQUEOUSMIXTURESOFTHESESOLVENTSHOWEVER,ATRANORINWASFOUNDTOBESOLUBLEINHP?CDFIG2SHOWSTHATTHESOLUBILITYOFATRANORININ10HP?CDISVERYLOWATPH6BUTISCONSIDERABLYHIGHERATPH80,00055MG/MLINSPITEOFHIGHERSOLUBILITYOFATRANORINATPH80THANTHEPHYSIOLOGICALPH74THELATTERWASCHOSENFORTHECELLEXPERIMENTSASTHESOLUBILITYOFATRANORININHP?CDWASLOWITWASATTEMPTEDTOUSEHP?CDTOINCREASEITSSOLUBILITYTHECENTRALCAVITYOFTHE?CYCLODEXTRINISLARGERTHANTHATOF?CYCLODEXTRINANDMIGHTTHEREFOREBEABLETOSOLUBILIZEMOREOFTHELICHENCOMPOUNDFIG2EFFECTOFPHONTHESOLUBILITYOFATRANORININ10?HYDROXYPROPYL?CYCLODEXTRINEACHPOINTREPRESENTSTHEMEAN±SDOFTHREEEXPERIMENTSFIG3EFFECTOFSOLUBILIZERCONCENTRATIONONATRANORINSOLUBILITYATPH74INSOLUTIONSOFHP?CD?ANDHP?CD?EACHPOINTREPRESENTSTHEMEAN±SDOFTHREEEXPERIMENTSTHIS,HOWEVER,WASNOTTHECASEFIG3SHOWSTHEEFFECTOFCYCLODEXTRINCONCENTRATIONONATRANORINSOLUBILITYATPH74THESOLUBILITYINCREASESASAFUNCTIONOFSOLUBILIZERCONCENTRATIONBUTTHEREISLITTLEDIFFERENCEINTHERESULTSOBTAINEDFORTHETWOCYCLODEXTRINSWITHTHEHP?CDBEINGSLIGHTLYBETTERATTHEHIGHESTCONCENTRATIONTESTED32EFFECTOFSOLUBILIZINGAGENTSONTHESOLUBILITYOFFUMARPROTOCETRARICACIDTHESOLUBILITYOFFUMARPROTOCETRARICACIDINWATERWASFOUNDTOBE00325MG/MLATPH4THESOLUBILITYWAS00069MG/MLBUTINCREASEDWITHINCREASINGPHANDWAS283MG/MLATPH74INSOLUTIONSOFBOTHPEG400ANDPROPYLENEGLYCOLTHESOLUBILITYOFFUMARPROTOCETRARICACIDAPPEAREDTOBEBETTERTHANINWATERALONE,BUTDUETODECOMPOSITIONOFTHECOMPOUNDINTHESESOLVENTSASWASAPPARENTFROMHPLCMEASUREMENTSITWASNOTPOSSIBLETODETERMINETHESOLUBILITYTHESOLUBILITYOFFUMARPROTOCETRARICACIDWASINCREASEDTO898MG/MLIN10HP?CDATPH74DECOMPOSITIONWASNOTSEENINTHECYCLODEXTRINSOLUTIONSPRESUMABLYBECAUSEAPARTOFTHEFUMARPROTOCETRARICACIDMOLECULEFITSINTOTHENONPOLARCYCLODEXTRINCAVITYANDISPROTECTEDFROMTHEENVIRONMENT33EFFECTOFTHELICHENCOMPOUNDSONTHYMIDINEUPTAKEOFCELLLINESTHETHREELICHENCOMPOUNDS,USNICACID,ATRANORINANDFUMARPROTOCETRARICACIDWERESOLUBILIZEDIN10SOLUTIONSOFHP?CDANDTESTEDATPHYSIOLOGICALPH74ONTHECELLLINESPANC1,T47DANDPC3THEEC50FORUSNICACIDAGAINSTPANC1WAS43?G/MLATASOLVENTCONCENTRATIONOF10?L/ML,WHICHISCOMPARABLETOTHEEC50PREVIOUSLYFOUNDAGAINSTK562OF47?G/MLTHEEC50FORUSNICACIDAGAINSTT47DWAS29?G/MLBUTAGAINSTPC3ITWASHIGHER,AT82?G/MLINCALCULATINGTHEEC50ACCOUNTWASTAKENOFDIRECTEFFECTSOFTHESOLVENTSTHESOLUBILIZINGAGENTHP?CDHADNOSIGNIFICANTEFFECTONPC3ANDPANC1BUTT47DWASMORESENSITIVE

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簡介：第一章、緒論第一章、緒論11細胞生物學細胞生物學研究細胞基本生命活動規(guī)律的科學，它從不同層次上組要研究細胞結構與功能，細胞增殖、分化、衰老與凋亡，細胞信號轉導，細胞基因表達與調控，細胞起源于進化等22細胞生物學研究內容細胞生物學研究內容①細胞核、染色體以及基因表達的研究②生物膜與細胞器的研究③細胞骨架體系的研究④細胞增殖及其調控⑤細胞分化及其調控⑥細胞的衰老與凋亡⑦細胞的起源與進化⑧細胞工程3細胞的發(fā)現細胞的發(fā)現①1665英國人胡克用自己設計與制造的顯微鏡觀察了軟木（櫟樹皮的薄片。②荷蘭人列文虎克是第一個看到活細胞的人。4．細胞學說的建立及其意義細胞學說的建立及其意義18381839德國人SCHLEIDEN和SCHWANN提出CELLTHEORY（①有機體是由細胞構成的；②細胞是構成有機體的基本單位；③新細胞來源于已存在細胞的分裂。）1858德國人VIRCHOW提出“一切細胞來源于細胞”的著名論斷，進一步完善了細胞學說。5細胞學形成細胞學形成①細胞學的經典時期②實驗細胞學與細胞學的分支及發(fā)展6相關期刊、雜志相關期刊、雜志NATURESCIENCECELL中國科學科學通報ZZZZZZＺＺＺＺＺＺＺ分子細胞生物學報第二章、細胞的統(tǒng)一性與多樣性第二章、細胞的統(tǒng)一性與多樣性1細胞的統(tǒng)一性細胞的統(tǒng)一性基本單位細胞共性①一切有機體都由細胞構成，細胞是構成有機體的基本單位②細胞具有獨立的、有序的自控代謝體系，細胞是代謝與功能的基本單位③細胞是有機體生長與發(fā)育的基礎④細胞是遺傳的基本單位，細胞具有遺傳的全能性⑤沒有細胞就沒有完整的生命⑥關于細胞概念的一些新思考2細胞的多樣性細胞的多樣性原核原核細胞原核細胞沒有核膜，DNA為裸露的環(huán)狀分子，通常沒有結合蛋白。沒有恒定的內膜系統(tǒng)，核糖體為70S型，通常稱為細菌基本特點基本特點①遺傳信息量小，主要的遺傳信息載體僅由一個環(huán)狀DNA構成②細胞內沒有分化出以膜為基礎的具有專門結構與功能的細胞器和細胞核真核真核細胞特點1、細胞分裂分為核分裂和細胞質分裂，并且分開進2、DNA和蛋白質結合壓縮成染色體結構，形成有絲分裂的結構3、具有復雜的內膜系統(tǒng)和細胞內的膜結構如內質網、高爾基體、溶酶體、過氧化物酶體、乙醛酸循環(huán)體、胞內體等4、具有特異的進行有氧呼吸的細胞器線粒體和光合作用的細胞器葉綠體5、具有復雜的骨架系統(tǒng)包括微絲、中間纖維和微管6、有復雜的鞭毛和纖毛7、具有小泡運輸系統(tǒng)胞吞作用和胞吐作用8、含有纖維素的細胞壁如植物細胞9、利用微管形成的紡錘體進行細胞分裂和染色體分離10、每個細胞中的遺傳物質成雙存在，二倍體分別來自于兩個親本11、通過減數分裂和受精作用進行有性生殖相同點相同點1都具有類似的細胞質膜結構2都以DNA作為遺傳物質，并使用相同的遺傳密碼3都是以一分為二的方式進行細胞分裂4具有相同的遺傳信息轉錄和翻譯機制，有類似的核糖體結構5代謝機制相同如糖酵解和TCA循環(huán)6具有相同的化學能貯能機制，如ATP合成酶原核位于細胞質膜，真核位于線粒體膜上（三）激光掃描共焦顯微境特點①用激光作掃描光源，逐點、逐行、逐面快速掃描成像②分辨率大約是普通光學顯微鏡的3倍③能顯示細胞樣品的立體結構④用途類似熒光顯微鏡,但能掃描不同層次,形成立體圖像⑤掃描的激光與熒光收集共用一個物鏡，物鏡的焦點即掃描激光的聚焦點，也是瞬時成像的物點四相差顯微鏡在構造上，相差顯微鏡有不同于普通光學顯微鏡兩個特殊之處①環(huán)形光闌位于光源與聚光器之間，作用是使透過聚光器的光線形成空心光錐，焦聚到標本上。②相位板在物鏡中加了涂有氟化鎂的相位板，可將直射光或衍射光的相位推遲1/4Λ五暗視野顯微鏡六倒置顯微鏡用于觀察培養(yǎng)的活細胞，通常具有相差或DIC物鏡，有的還具有熒光裝置電子顯微鏡電子顯微鏡超薄切片超薄切片厚度僅50NM左右，用超薄切片機制作超薄切片技術的過程為超薄切片技術的過程為固定、脫水、包埋、切片、染色。冰凍蝕刻標本置于100度的干冰或196度的液氮中，進行快速冰凍。用冷刀驟然將標本斷開，升溫，冰在真空條件下迅即升華，暴露出斷面結構蝕刻向斷面以45度角噴涂一層蒸汽鉑，再以90度角噴涂一層碳，加強反差和強度。然后用次氯酸鈉溶液消化樣品，把碳和鉑的膜剝下來，此膜即為復膜。復膜顯示出了標本蝕刻面的形態(tài)，在電鏡下得到的影像即代表標本中細胞斷裂面處的結構。22細胞組分的分析方法細胞組分的分析方法一、離心技術一、離心技術細胞破碎細胞破碎差速離心在密度均一的介質中由低速到高速逐級離心，用于分離不同大小的細胞和細胞器。差速離心只用于分離大小懸殊的細胞，更多用于分離細胞器。通過差速離心可將細胞器初步分離密度梯度離心1、速度沉降用途用于分離密度相近而大小不等的細胞或細胞器特點介質密度較低，介質的最大密度應小于被分離生物顆粒的最小密度原理介質密度梯度十分平緩,生物顆粒（細胞或細器）按各自的沉降系數以不同的速度沉降而達到分離2、等密度沉降用途用于分離密度不等的顆粒特點介質密度較高,陡度大,介質的最高密度應大于被分離組分的最大密度所需要的力場通常比速率沉降法大10100倍，故往往需要高速或超速離心原理細胞或細胞器在連續(xù)梯度的介質中經足夠大離心力或足夠長時間則沉降或漂浮到與自身密度相等的介質處，并停留在那里達到平衡，從而將不同密度的細胞或細胞器分離二、細胞化學技術二、細胞化學技術DNADNA原位顯示原位顯示福爾根反應的原理福爾根反應的原理酸水解可以去除RNA，僅保留DNA，并除去DNA上嘌呤脫氧核苷酸鍵的嘌呤，使脫氧核糖的醛基暴露。所暴露的自由醛基與希夫試劑反應呈紫紅色。免疫熒光技術免疫熒光技術熒光素異硫氰酸熒光素、羅丹明免疫電鏡技術免疫電鏡技術免疫酶標技術辣根過氧化物酶免疫膠體金技術金膠體顆粒定量細胞化學分析技術定量細胞化學分析技術1流式細胞儀原理原理包在鞘液中的細胞通過高頻振蕩控制的噴嘴，形成包含單個細胞的液滴，在激光束的照射下，這些細胞發(fā)出散射光和熒光，經探測器檢測，轉換為電信號，送入計算機處理，輸出統(tǒng)計結果，并可根據這些性質分選出高純度的細胞亞群，分離純度可達99。包被細胞的液流稱為鞘液，所用儀器稱為流式細胞計2顯微光譜分析技術顯微分光光度測定技術（主要有紫外光顯微分光光度測定法和可見光顯微分光光度測定法）原理利用細胞中有一些成分具有特定的吸收光譜的特性，測定細胞中某些物質的含量。DNA含量50A33細胞培養(yǎng)、細胞工程與顯微操作技術細胞培養(yǎng)、細胞工程與顯微操作技術一動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)1原代培養(yǎng)2原代細胞3細胞貼壁4接觸抑制5傳代培養(yǎng)6傳代細胞7細胞系度8轉化細胞9細胞株二細胞工程細胞工程細胞融合細胞融合應用單克隆抗體技術（過程過程單個B淋巴細胞→抗體（單一物質→專一性）

簡介：細胞生物學（翟中和）配套習題細胞生物學（翟中和）配套習題第一章緒論第一章緒論1、填空題1、細胞生物學是細胞整體、超微結構和分子水平上研究及其規(guī)律的科學。、2、名詞解釋1、細胞學說（CELLTHEORY）3、選擇題1、現今世界上最有影響的學術期刊是。ANATUNEBCELLCPNASDSCIENCE2、自然界最小的細胞是（A）病毒（B）支原體（C）血小板（D）細菌4、是非題1、現代細胞生物學的基本特征是把細胞的生命活動和亞細胞的分子結構變化聯(lián)系起來。（）5、問答題1當前細胞生物學研究的熱點課題哪些2細胞學說的基本要點是什么細胞學說在細胞學發(fā)展中有什么重大意義3細胞生物學的發(fā)展可劃分為哪幾個階段各階段的主要特點是什么第二章細胞基本知識概要第二章細胞基本知識概要1、名詞解釋1血影（GHOST）2通道形成蛋白（PORIN）3纖維冠（FIBROUSCORONA）2、選擇題1、立克次氏體是（A）一類病毒（B）一種細胞器（C）原核生物（D）真核生物2、原核細胞的呼吸酶定位在（A）細胞質中（B）質膜上（C）線粒體內膜上（D）類核區(qū)內3、最小的細胞是3為什么說支原體可能是最小最簡單的細胞存在形式4說明真核細胞與原核細胞在遺傳裝置，基因表達及調控方面的區(qū)別。5真核細胞在亞顯微結構水平可以劃分為哪三大基本結構體系（據說在國內，這是翟中和先提出來的）6細胞與病毒在起源上的關系有哪幾種假說你比較同意哪一種為什么（必須同意生物大分子→細胞→病毒這種，論據P26）7請簡要說明病毒的增殖過程。（今年SARS流行，而且陳建國和鄧宏魁現在都在研究SARS，還要看一下SARS病毒基本的結構和增殖途徑）8在生命起源和進化過程中化學進化與生物進化的關系如何9MILLER實驗的方案是怎樣設計的有什么重要意義10微球學說和團聚體學說的主要內容是什么11如何評價真核生物起源的內共生假說和經典假說12葉綠體可能起源于原核綠藻和藍細菌（藍藻）的觀點的根據是什么13HIV的分子結構特征是什么HIV的英文全稱是什么14列出原核細胞與真核細胞的主要差異。15蛋白質組是什么1、RE走近蛋白質組研究轉發(fā)自中華基因網,非常謝謝PROTEOME（蛋白質組），這個在各種字典里都還查不到的詞組，近幾年來開始在生命科學領域逐漸浮出水面，曝光頻率越來越高，蛋白質組是什么它與我們有什么關系讓我們來揭開其神秘的面紗，一睹其迷人的風采。一、什么是蛋白質組研究基因，尤其是基因組研究形成了20世紀生命科學研究一道亮麗的風景線，取得了巨大的成就。那么，知道了人類的全部基因組序列，就可以解決各種醫(yī)學問題嗎其實并不是這么簡單。僅憑基因組學這只單腳圓規(guī)，很難繪出完美的圓圈。隨著人類基因組計劃的逐步完成，科學家們又進一步提出了后基因組計劃，蛋白質組研究是其中一個很重要的內容。在人體內真正發(fā)揮作用的是蛋白質，蛋白質扮演著構筑生命大廈的“磚塊”角色，是生命活動的真正執(zhí)行者和體現者?；蚝帽纫粡堉圃祜w機和坦克的圖紙，蛋白質就是根據圖紙制造的真正進行戰(zhàn)斗的飛機和坦克。雖然目前已完成了對人類基因的全部序列測定，但是單憑制造飛機和坦克的圖紙，不可能演繹出一場戰(zhàn)爭，也不會知道一場戰(zhàn)爭是如何發(fā)生、如何進行的?；虻闹饕δ苁峭ㄟ^其表達產物蛋白質來實現的，而蛋白質亦具有自身特有的活動規(guī)律，隨著生命活動的進程表現出極其動態(tài)的緊密協(xié)調的變化，蛋白質在合成之后具有相對獨立的修飾、轉運和相互間作用能力，同時還具有對外界因素發(fā)生反應的能力。因此，只有從蛋白質組學的角度對所有蛋白質的總和進行研究，即開展蛋白質組學研究，才能更加貼近對生命現象和本質的掌握，生命活動的本質和活動規(guī)律才能找到答案。正是因為這樣，國際科學界預言，在21世紀，生命科學的熱點將從基因組學轉向蛋白質組學，使后者成為新的前沿。蛋白質組學研究不但對了解生命本質有重要的意義，而且在疾病診斷治療、藥物篩選等有廣泛應用前景。其中蘊藏著開發(fā)疾病診斷方法和新藥的線索。二、蛋白質組能給我們帶來什么人體內的每一細胞是由一萬余個不同蛋白質的有機組合，不同蛋白質的組合就構成不同細胞的功能。要想把細胞內部這些功能和信息全部展現出來，唯一的方法是利用蛋白質組學技術，得到一張擁有各種蛋白質點的“繁星圖“，利用現代科學分析技術，將此圖變成開發(fā)新藥的“探寶圖”，了解其藥物的細胞內作用與運轉機制，成為藥物發(fā)現的“路標”。蛋白質組的研究不僅是探索生命奧秘的必須工作，也能為眾多種疾病機理的闡明及攻克提供理論根據和解決途徑，為人類健康事業(yè)帶來巨大的利益?，F在已經知道，在疾病中只有一小部分是起因于基因突變，而各種疾病都有蛋白質譜的動態(tài)變化，每種疾病在不同的發(fā)病階段，在任何癥狀出現之前，在蛋白質水平方

簡介：農學碩士學位論文黃瓜花粉發(fā)育及細胞生物學特性研究STUDIEDONTHEPOLLENDEVELOPMENTANDCYTOBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFCUCUMBERCUCUMISSATIVUSL陳芬芬作物延邊大學學校代碼10184分類號分類號密級UDC學號2014050276延邊大學碩士學位論文黃瓜花粉發(fā)育及細胞生物學特性研究STUDIEDONTHEPOLLENDEVELOPMENTANDCYTOBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFCUCUMBERCUCUMISSATIVUSL研究生姓名陳芬芬培養(yǎng)單位延邊大學農學院指導教師姓名、職稱金東淳副教授學科專業(yè)作物研究方向植物生殖生物學論文提交日期2016年5月24日

簡介：重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文1英漢縮略語名詞對照英漢縮略語名詞對照英文縮寫英文縮寫英文全稱英文全稱中文全稱中文全稱RPMI1640ROSWELLPARKMEMORIALINSTITUTERPMI1640培養(yǎng)基PBSPHOSPHATEBUFFEREDSALINE磷酸鹽緩沖液EDTAETHYLENEDIAMINETETRAACETICACID四乙酸二氨基乙烯PCRPOLYMERASECHAINREACTION聚合酶鏈式反應RTPCRREVERSETRANSCRIPTIONPCR反轉錄PCRRNARIBONUCLEICACID核糖核酸MRNAMESSENGERRNA信使RNADNADEOXYRIBONUCLEICACID脫氧核糖核酸CDNACOMPLEMENTARYDNA互補DNABPBASEPAIR堿基對G418GENETICIN遺傳霉素PMSFPHENYLMETHANESULFONYLFLUORIDE苯甲基磺酰氟SDSPAGEPOLYACRYLAMIDEGELELECTROPHORESIS聚丙烯酰胺凝膠電泳TMEDTETRAMETHYLETHYLENEDIAMINE四甲基乙二胺PVDFPOLYVINYLIDENEFLUORIDE聚偏二氟乙烯TBSTRISBUFFEREDSALINE三乙醇胺緩沖鹽水溶液ANNEXINVFITC/PIANNEXINVFLUORESCEINISOTHIOCYANATEPROPIDIUMIODIDE異硫氰酸熒光素標記的膜聯(lián)素V/碘化丙啶CCK8CELLCOUNTINGKIT8細胞增殖與毒性檢測試劑盒

簡介：分類號R73密級公開UDC610學校代碼10555碩士學位論文碩士學位論文（專業(yè)學位）（專業(yè)學位）模擬不同照射模式對鼻咽癌細胞系模擬不同照射模式對鼻咽癌細胞系CNE2CNE2放射生物學效應的影響放射生物學效應的影響研究生姓名陳琛指導教師、職稱席許平主任醫(yī)師合作導師、職稱專業(yè)學位類別（領域）臨床醫(yī)學（腫瘤學）研究方向放射治療學所在學院湖南省腫瘤醫(yī)院二〇一五年五月一五年五月南華大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南華大學或其他單位的學位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻均已在論文中作了明確的說明。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。作者簽名年月日南華大學學位論文版權使用授權書本學位論文是本人在南華大學攻讀（博/碩）士學位期間在導師指導下完成的學位論文。本論文的研究成果歸南華大學所有，本論文的研究內容不得以其它單位的名義發(fā)表。本人同意南華大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權保留學位論文，允許學位論文被查閱和借閱；學?？梢怨紝W位論文的全部或部分內容，可以采用復印、縮印或其它手段保留學位論文；學?？筛鶕一蚝鲜∮嘘P部門規(guī)定送交學位論文。同意學校將論文加入中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數據庫，并按中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數據庫出版章程規(guī)定享受相關權益。同意授權中國科學信息技術研究所將本學位論文收錄到中國學位論文全文數據庫，并通過網絡向社會公眾提供信息服務。對于涉密的學位論文，解密后適用該授權。作者簽名年月日導師簽名年月日

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簡介：細胞生物學復習要點第一章緒論1細胞生物學的主要研究內容及其目前研究的一些重大問題是什么當前細胞生物學的研究內容大致可歸納為以下10個方面生物膜與細胞器；細胞信號轉導；細胞骨架體系；細胞核、染色體及基因表達；細胞增殖及其調控；細胞分化及干細胞生物學；細胞死亡；細胞衰老；細胞工程；細胞的起源與進化。當前細胞生物學研究的課題歸納起來包括3個根本性的問題①基因組是如何在時間與空間上有序表達的②基因表達的產物是如何逐級組裝成能行使生命活動的基本結構體系及各種細胞器的這種自組裝過程的調控程序于調控機制是什么③基因及其表達的產物，特別是各種信號分子與活性因子，是如何調解諸如細胞的增殖、分化、衰老與凋亡等細胞最重要的生命活動過程的2概述細胞學說的主要內容。①細胞是有機體，一切動植物都是由細胞發(fā)育而來，并由細胞和細胞產物所構成；②每個細胞作為一個相對獨立的單位，既有它“自己的”生命，又對與其他細胞共同組成的整體的生命有所助益；③新的細胞可以通過已存在的細胞繁殖產生。3從細胞學發(fā)展簡史中，你如何認識細胞學說建立的重要意義細胞學說的提出對生物科學的發(fā)展具有重大的意義。細胞學說是達爾文進化論和孟德爾遺傳學確立的“基石”，是對生物學、醫(yī)學及其各個分支進一步發(fā)展所不可缺少的。4了解細胞生物學分支學科的主要研究內容。①細胞遺傳學從細胞學角度，特別是從染色體的結構與功能，以及染色體和其他細胞器的關系來研究遺傳現象，闡明遺傳和變異的機制。其核心就是染色體基因學說。②細胞生理學細胞對其周圍環(huán)境的反應，細胞生長與繁殖的機制，細胞從環(huán)境中攝取營養(yǎng)的能力，細胞的興奮性、收縮性、分泌性，生物膜的主動運輸和能量的傳遞與生物電等。③細胞化學對細胞成分，特別是核酸與蛋白質的定性。定位、定量以及動態(tài)變化研究。第三章細胞生物學研究方法1細胞形態(tài)的基本觀察方法有哪些，其作用是什么①光學顯微鏡（普通復式光學顯微鏡、相差顯微鏡和微分干涉顯微鏡、熒光顯微鏡、激光掃描共焦顯微鏡）研究細胞的結構與功能，特別是生物大分子在活細胞中的定位及其動態(tài)變化和相互作用等；②電子顯微鏡觀察細胞內部的精細結構；③掃描隧道顯微鏡直接觀察DNA、RNA和蛋白質等生物大分子及生物膜、病毒等結構。2舉出34種細胞生物學的研究方法及它們的作用。①超離心技術分離細胞組分；②免疫熒光技術、免疫電鏡技術特異蛋白抗原的定位與定性；③原位雜交技術細胞內特異核酸的定位與定性；④流式細胞術定量細胞化學分析與細胞分選。3細胞工程包括哪些方面的技術①細胞融合與單克隆抗體技術；②顯微操作技術與動物的克隆。4簡述細胞/組織培養(yǎng)的主要步驟及其應用。用植物的體細胞（二倍體細胞），先經纖維素酶處理去掉細胞壁，去壁的細胞稱為原生質體。原生質體在無菌培養(yǎng)基中可以生長和分裂，經過誘導分化最終可長成植株。

簡介：1細胞生物學細胞生物學第一章第一章緒論緒論11細胞生物學的任務是什么它的范圍都包括哪些細胞生物學的任務是什么它的范圍都包括哪些（一）任務任務細胞生物學的任務是以細胞為著眼點，與其他學科的重要概念兼容并蓄，來闡明生物各級結構層次生命現象的本質。（二）范圍范圍（1）細胞的細微結構；（2）細胞分子水平上的結構；（3）大分子結構變化與細胞生理活動的關系及分子解剖。22細胞生物學在生命科學中所處的地位，以及它與其他學科的關系。細胞生物學在生命科學中所處的地位，以及它與其他學科的關系。（1）地位地位以細胞作為生命活動的基本單位，探索生命活動規(guī)律，核心問題是將遺傳與發(fā)育在細胞水平上的結合。（2）關系關系應用現代物理學與化學的技術成就和分子生物學的概念與方法，研究生命現象及其規(guī)律。33如何理解如何理解EBWILSONEBWILSON所說的“一切生物學問題的答案最終要到細胞中去尋找”。所說的“一切生物學問題的答案最終要到細胞中去尋找”。（1）細胞是一切生物體的最基本的結構和功能單位。（2）所謂生命實質上即是細胞屬性的體現。生物體的一切生命現象，如生長、發(fā)育、繁殖、遺傳、分化、代謝和激應等都是細胞這個基本單位的活動體現。（3）生物科學，如生理學、解剖學、遺傳學、免疫學、胚胎學、組織學、發(fā)育生物學、分子生物學等，其研究的最終目的都是要從細胞水平上來闡明各自研究領域中生命現象的機理。（4）現代生物學各個分支學科的交叉匯合是21世紀生命科學的發(fā)展趨勢，也要求各個學科都要到細胞中去探索生命現象的奧秘。（5）鑒于細胞在生命界中所具有的獨特屬性，生物科學各分支學科若要研究各種生命現象的機理，都必須以細胞這個生物體的基本結構和功能單位為研究目標，從細胞中研究各自研究領域中生命現象的機理。44細胞生物學主要研究內容是什么細胞生物學主要研究內容是什么（1）細胞核、染色體以及基因表達；（2）生物膜與細胞器；（3）細胞骨架體系；（4）細胞增殖及其調控；（5）細胞分化及其調控；（6）細胞的衰老與凋亡；（7）細胞起源與進化；（8）細胞工程。55當前細胞生物學研究中的基本問題以及細胞基本生命活動研究的重大課題是什么當前細胞生物學研究中的基本問題以及細胞基本生命活動研究的重大課題是什么研究的三個根本性問題研究的三個根本性問題（1）細胞內的基因是如何在時間與空間上有序表達的問題。（2）基因表達的產物結構蛋白與核酸、脂質、多糖及其復合物，如何逐級裝配行使生命活動的基本結構體系及各種細胞器的問題。（3）基因表達的產物大量活性因子與信號分子，如何調節(jié)細胞最重要的生命活動的問題。生命活動研究的重大課題生命活動研究的重大課題（1）染色體DNA與蛋白質相互作用關系非組蛋白對基因組的作用。322細胞的基本共性是什么細胞的基本共性是什么（1）所有的細胞表面均有由磷脂雙分子層與鑲嵌蛋白質構成的生物膜；（2）所有的細胞都有DNA與RNA兩種核酸；（3）所有的細胞內都有作為蛋白質合成的機器核糖體；（4）所有細胞的增殖都是一分為二的分裂方式。33為什么說病毒不是細胞蛋白質感染子是病毒嗎為什么說病毒不是細胞蛋白質感染子是病毒嗎（1）病毒是由一個核酸分子（DNA或RNA）芯和蛋白質外殼構成的，是非細胞形態(tài)的生命體，是最小、最簡單的有機體。僅由一個有感染性的RNA構成的病毒，稱為類病毒類病毒；僅由感染性的蛋白質構成的病毒稱為朊病毒朊病毒。病毒具備了復制與遺傳生命活動的最基本的特征，但不具備細胞的形態(tài)結構，是不完全的生命體；病毒的主要生命活動必須在細胞內才能表現，在宿主細胞內復制增殖；病毒自身沒有獨立的代謝與能量轉化系統(tǒng)，必須利用宿主細胞結構、原料、能量與酶系統(tǒng)進行增殖，是徹底的寄生物。因此病毒不是細胞，只是具有部分生命特征的感染物。（2）蛋白質感染子是病毒的類似物，雖不含核酸，其增殖是由于正常分子的構象發(fā)生轉變造成的，這種構象異常的蛋白質分子成了致病因子，這不同于傳統(tǒng)概念上的病毒的復制方式和傳染途徑，所以蛋白質感染子是病毒的類似物。44為什么說支原體可能是最小最簡單的細胞存在形式為什么說支原體可能是最小最簡單的細胞存在形式（1）支原體能在培養(yǎng)基上生長；（2）具有典型的細胞膜；（3）一個環(huán)狀雙螺旋DNA是遺傳信息量的載體；（4）MRNA與核糖體結合為多聚核糖體，指導合成蛋白質；（5）以一分為二的方式分裂繁殖；（6）體積僅有細菌的十分之一，能寄生在細胞內繁殖。55說明原核細胞與真核細胞的主要差別說明原核細胞與真核細胞的主要差別。要點原核細胞真核細胞細胞核細胞核無膜包圍，稱為擬核有雙層膜包圍染色體形狀染色體形狀數目數目組成組成DNADNA序列序列環(huán)狀DNA分子一個基因連鎖群DNA裸露或結合少量蛋白質無或很少重復序列核中的為線性DNA分子；線粒體和葉綠體中的為環(huán)狀DNA分子兩個或多個基因連鎖群核DNA同組蛋白結合，線粒體和葉綠體中的DNA裸露有重復序列基因表達基因表達RNA和蛋白質在同一區(qū)間合成RNA在核中合成和加工；蛋白質在細胞質中合成細胞分裂細胞分裂二分或出芽有絲分裂或減數分裂內膜無獨立的內膜有，分化成細胞器細胞骨架細胞骨架無普遍存在呼吸作用和光合作用酶的分部呼吸作用和光合作用酶的分部質膜線粒體和葉綠體（植物）核糖體核糖體70S（50S＋30S）80S（60S＋40S）第三章第三章細胞生物學研究方法細胞生物學研究方法11透射電鏡與普通光學顯微鏡的成像原理有何異同透射電鏡與普通光學顯微鏡的成像原理有何異同透射電鏡與光學顯微鏡的成像原理基本一樣，不同的是（1）透射電鏡用電子束作光源，用電磁場作透鏡；（2）光學顯微鏡用可見光或紫外光作光源，以光學玻璃為透鏡。22放射自顯影技術的原理根據是什么為何常用放射自顯影技術的原理根據是什么為何常用H3、C1414、P3232標記物做放射自顯影標記物做放射自顯影（一）原理根據（一）原理根據放射性同位素發(fā)射出的各種射線具有使照相乳膠中的溴化銀晶體還原（感光）的性能。利