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1、細(xì)胞內(nèi)pH值對(duì)細(xì)胞的生理活動(dòng)有重要影響,由細(xì)胞內(nèi)pH值變化可監(jiān)測(cè)細(xì)胞內(nèi)的生理活動(dòng),如吞噬作用、內(nèi)吞作用等。pH值的變化對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)也有巨大影響,可影響突觸傳遞、神經(jīng)元的興奮性、細(xì)胞間的耦合等過(guò)程。因此,測(cè)定細(xì)胞內(nèi)的pH值日益引起人們的高度重視。熒光分子探針由于其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)性質(zhì),并且具有靈敏度高,操作條件溫和等優(yōu)勢(shì),突破了傳統(tǒng)pH值測(cè)試方法的局限,從而引起人們的極大關(guān)注。
本論文首先通過(guò)將含有8-氨基喹啉與熒光素衍生物縮合的席
2、夫堿QZl與銪(Ⅲ)的TTA(噻吩基三氟乙酰丙酮)化合物作為基本原料合成了新的銪(Ⅲ)-熒光素化合物Eu-QZ1,并對(duì)其進(jìn)行了光譜表征?;衔顴u-QZ1在470nm光的激發(fā)下產(chǎn)生熒光素的特征綠色熒光(530nm)。在標(biāo)準(zhǔn)的從堿到酸(pH從9.5到6.5)滴定過(guò)程中該熒光的強(qiáng)度增強(qiáng)了接近8倍,其pKa值計(jì)算為7.30。在370nm光的激發(fā)下,Eu-QZ1發(fā)射稀土銪(Ⅲ)離子的特征紅色熒光(主峰位于612 nm)。在標(biāo)準(zhǔn)的從酸到堿(pH從
3、5.5到8.5)滴定過(guò)程中,該熒光的強(qiáng)度增強(qiáng)了接近10倍,其pKa值計(jì)算為7.39。這些結(jié)果表明Eu-QZ1是一個(gè)高靈敏度雙熒光響應(yīng)的pH探針,其pKa值表明Eu-OZ1可以用來(lái)測(cè)定低限達(dá)40nM的氫離子濃度。細(xì)胞試驗(yàn)表明Eu-QZ1具有良好的細(xì)胞通透性,能夠在紅光和綠光兩個(gè)位置標(biāo)記海拉細(xì)胞中的pH范圍。
在上述研究基礎(chǔ)上,合成一種新型的稀土-羅丹明雙重?zé)晒忭憫?yīng)pH探針?lè)肿覧u-DR1。Eu-DR1由發(fā)射綠光的羅丹明基團(tuán)、
4、發(fā)射紅光的稀土Eu(TTA)3、發(fā)射藍(lán)光的4-(二甲氨基)苯甲醛基團(tuán)構(gòu)成。在不同波長(zhǎng)的光激發(fā)下,化合物發(fā)射不同顏色的光,有紅色、白色、綠色。在標(biāo)準(zhǔn)pH值從6.5到4.0滴定過(guò)程中,羅丹明綠色熒光的強(qiáng)度增強(qiáng)了接近40倍,量子產(chǎn)率提高到0.70,溶液的顏色也有黃色變成了紅色。pH從8.5到6.5滴定過(guò)程中,Eu紅色熒光的強(qiáng)度增強(qiáng)了接近30倍,其pKa值計(jì)算為7.20。Eu-DR1是一種新型的雙熒光響應(yīng)的pH探針?lè)肿?。?duì)活細(xì)胞內(nèi)pH值的測(cè)試研
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