新型熒光探針的合成及其與生物大分子作用的研究.pdf

1、近年來,熒光光譜法因其具有操作簡便、靈敏度高等優(yōu)點,逐漸發(fā)展成為一種十分重要且有效的光譜分析手段,相應(yīng)地,設(shè)計合成不同類型的熒光試劑也成為這一領(lǐng)域工作者的重要任務(wù)之一。針對所要識別的客體,將具有選擇性識別功能的基團修飾在熒光基團上,合成具有選擇性識別功能的熒光分子,根據(jù)熒光分子與客體作用后熒光信號的變化,即可實現(xiàn)對客體的識別及傳感。本文設(shè)計合成了三種有機小分子化合物,利用光譜法研究了其自身或金屬配合物與生物大分子DNA或BSA的作用,共

2、分四個章節(jié)進行闡述。
　　 第一章為文獻綜述,對2005年以來國內(nèi)外報道的有關(guān)熒光光譜法研究某些小分子熒光探針與DNA和蛋白質(zhì)相互作用的研究作了簡要概述。
　　 第二章合成了新的席夫堿類化合物N'-(2-羥基萘亞甲基)-4-(2-羥基萘亞甲基氨基)苯甲酰肼(HHBH,1),產(chǎn)物經(jīng)1H NMR、質(zhì)譜和IR光譜鑒定。采用熒光光譜法和UV-Vis吸收光譜法研究了1的鋅配合物1-Zn與BSA的相互作用。在pH7.4 Tris-H

3、Cl緩沖溶液中,以370 nm激發(fā),該配合物1-Zn在475 nm處有弱熒光發(fā)射,加入BSA后熒光顯著增強。同時1-Zn配合物能猝滅BSA的內(nèi)源熒光,考察了不同溫度下Stern-Volmer猝滅方程以及BSA對主體吸收光譜的影響,結(jié)果表明此過程為形成基態(tài)配合物的靜態(tài)猝滅過程,并計算出不同溫度下的結(jié)合常數(shù)Kb和結(jié)合位點數(shù)n,結(jié)果顯示Kb幾乎不隨溫度的變化而變化,n值接近1。同步熒光和三維熒光光譜表明1.Zn配合物與BSA作用時引起了BSA

4、構(gòu)象的變化。依據(jù)FSrter非輻射能量轉(zhuǎn)移理論,確定了1-Zn配合物與BSA間的結(jié)合距離和能量轉(zhuǎn)移效率。
　　 第三章合成了新的席夫堿類化合物對氨基苯乙酮-對二甲氨基苯甲酰腙(AADBH,2),產(chǎn)物經(jīng)1H NMR鑒定。采用熒光光譜法和UV-Vis吸收光譜法研究了2與DNA的相互作用。在pH7.4 Tris-HCl緩沖溶液中,以345 nm激發(fā),該化合物熒光很弱,加入DNA后450 nm處熒光逐漸增強。離子強度對2-DNA熒光強度

5、幾乎沒有影響,這說明2和DNA間不存在靜電作用。DNA對2吸收光譜的影響呈現(xiàn)減色效應(yīng),2與熱變性DNA的研究和2對EB-DNA體系的猝滅作用研究結(jié)果均表明2主要以插入作用方式與DNA作用。
　　 第四章采用熒光光譜法和UV-Vis吸收光譜法研究了新化合物2-[2-(3,5-二(2-吡啶基甲基)氨甲基-4-羥基苯基)乙烯基]-5-甲基吡嗪(biPAHEMP,3)的鋅配合物3-Zn與DNA的作用,在’pH7.4 Tris-HCl緩沖