柚子皮多糖抗腫瘤活性研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)是以柚子皮為原料提取柚子皮多糖，通過正交試驗(yàn)得到柚子皮多糖的最佳提取工藝條件。對(duì)提取的多糖進(jìn)行成分與含量測定，并進(jìn)行紫外光譜和紅外光譜分析，采用氣相色譜測定其單糖組成。建立動(dòng)物模型和細(xì)胞模型，探討柚子皮多糖的體內(nèi)體外抗腫瘤活性。
　　通過單因素實(shí)驗(yàn)與正交試驗(yàn)得到提取柚子皮多糖的最佳提取工藝為:料液比1∶40，提取時(shí)間1.5h，提取溫度95℃，pH為2，多糖得率最高為17.6％。其中多糖含量為77.01％，并主要由葡萄糖組成。

2、
　　在體外通過MTT法發(fā)現(xiàn)多糖對(duì)腫瘤細(xì)胞幾乎沒有抑制作用。建立S180肉瘤小鼠模型，用低劑量(100mg·kg-1d-1)、中劑量（200mg·kg-1d-1）和高劑量(300mg·kg-1d-1)灌胃小鼠，發(fā)現(xiàn)中劑量抑瘤率最高為50％，表明柚子皮多糖具有較好的體內(nèi)抗腫瘤效果。
　　從血液和免疫器官兩方面來檢測柚子皮多糖的抗腫瘤作用。血液指標(biāo)通過小鼠血常規(guī)檢查、外周血淋巴細(xì)胞亞群測定、小鼠血清Elisa實(shí)驗(yàn)、血清抗體免疫熒

3、光實(shí)驗(yàn)和血清中IL-2、IFN-γ、TNF-α細(xì)胞因子的檢測;免疫器官指標(biāo)包括HE染色觀察免疫器官組織形態(tài)、研磨液淋巴細(xì)胞亞群測定、淋巴細(xì)胞增值實(shí)驗(yàn)和NK細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示多糖可以提高荷瘤小鼠血液中各淋巴細(xì)胞亞群的比例，促進(jìn)腫瘤特異性抗體和細(xì)胞因子的分泌;通過小鼠免疫器官（胸腺和脾）的HE染色結(jié)果可以看出，多糖可以很好的保護(hù)荷瘤小鼠的免疫器官，并維持其良好的形態(tài)。胸腺和脾臟研磨液的淋巴細(xì)胞亞群檢測結(jié)果顯示，發(fā)現(xiàn)多糖可以提高荷瘤小鼠T

4、淋巴細(xì)胞的比例，增強(qiáng)淋巴細(xì)胞活性。淋巴細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和NK細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，發(fā)現(xiàn)多糖可以促進(jìn)荷瘤小鼠淋巴細(xì)胞的增殖，增強(qiáng)NK細(xì)胞的殺傷能力。通過腹腔吞噬中性紅實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)多糖可以增強(qiáng)荷瘤小鼠腹腔細(xì)胞的吞噬能力。
　　通過以上實(shí)驗(yàn)，可以得出柚子皮多糖對(duì)腫瘤細(xì)胞沒有直接的殺傷作用，它是通過促進(jìn)荷瘤小鼠淋巴細(xì)胞的增殖、提高免疫細(xì)胞的活性、促進(jìn)抗體及免疫因子的分泌和保護(hù)免疫器官等途徑，來提高機(jī)體細(xì)胞免疫、體液免疫和非特異性免疫能力，從