毛細(xì)管電泳無組分歧視電動(dòng)進(jìn)樣裝置的研究與應(yīng)用.pdf

1、進(jìn)樣系統(tǒng)一直是毛細(xì)管電泳技術(shù)中的一個(gè)重要部分。出于降低或消除電動(dòng)進(jìn)樣組分歧視現(xiàn)象的需要，通常在樣品內(nèi)加入內(nèi)標(biāo)或用數(shù)學(xué)計(jì)算校正實(shí)驗(yàn)結(jié)果。此外，各種類型的無組分歧視的電動(dòng)進(jìn)樣裝置柱已經(jīng)在毛細(xì)管、微芯片電泳中體現(xiàn)了越來越重要的作用。這些方法可以在一定程度上消除進(jìn)樣歧視，但也存在不足。加入內(nèi)標(biāo)或用數(shù)學(xué)計(jì)算校正峰面積的方法不僅繁瑣費(fèi)時(shí)，而且應(yīng)用也受到一定實(shí)驗(yàn)條件的限制；目前改進(jìn)的進(jìn)樣裝置存在制作成功率低、操作復(fù)雜、成本高、影響EOF穩(wěn)定性等缺點(diǎn)，

2、因此有必要開發(fā)出一種快速簡(jiǎn)便、成功率高的消除組分歧視的毛細(xì)管電動(dòng)進(jìn)樣方法。 在橋電場(chǎng)進(jìn)樣法、外等電勢(shì)進(jìn)樣法和補(bǔ)償式鐘擺進(jìn)樣法的研究基礎(chǔ)上，本論文提出了電滲泵進(jìn)樣和Teflon連接斷口進(jìn)樣法，隔離毛細(xì)管進(jìn)樣端和局部電場(chǎng)，用電滲流作為“泵”驅(qū)動(dòng)樣品進(jìn)入毛細(xì)管，從而有效地消除電動(dòng)進(jìn)樣組分歧視。為了便于監(jiān)測(cè)歧視效應(yīng)的變化，本論文還定義了歧視度、標(biāo)準(zhǔn)歧視偏差。以這兩個(gè)參數(shù)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，分別考察了毛細(xì)管長度、進(jìn)樣電壓和樣品溶液離子強(qiáng)度對(duì)電滲泵

3、和Teflon連接斷口進(jìn)樣法消除歧視效應(yīng)效果的影響，從而優(yōu)化進(jìn)樣條件。同時(shí)分別對(duì)上述兩種進(jìn)樣方法進(jìn)行了可行性和性能驗(yàn)證，并考察了它們的應(yīng)用領(lǐng)域。為了消除在極端進(jìn)樣條件下單電場(chǎng)進(jìn)樣時(shí)引發(fā)的負(fù)歧視效應(yīng)，提出了接地進(jìn)樣電極進(jìn)樣法。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，電滲泵進(jìn)樣和Teflon連接斷口進(jìn)樣法能有效消除電動(dòng)進(jìn)樣時(shí)發(fā)生的組分歧視，并適用于反向電滲體系和不同電泳遷移率的離子，分析結(jié)果呈現(xiàn)出良好的重現(xiàn)性。將進(jìn)樣電極接地施加零電勢(shì)后，在進(jìn)樣端形成理想的

4、零電勢(shì)，可以消除單電場(chǎng)進(jìn)樣中由于“電容器”效應(yīng)產(chǎn)生的負(fù)歧視。這兩種電滲驅(qū)動(dòng)進(jìn)樣可以分別應(yīng)用在毛細(xì)管電色譜進(jìn)樣、實(shí)際樣品分析和芯片“點(diǎn)樣”方面。 本論文所研究的消除毛細(xì)管電動(dòng)進(jìn)樣組分歧視的進(jìn)樣方法避免了以往進(jìn)樣方法的缺點(diǎn)。裝置制作簡(jiǎn)便易行、材料廉價(jià)易得。雙毛細(xì)管構(gòu)造和柱上斷口都不會(huì)對(duì)毛細(xì)管分析體系電流、電滲流的穩(wěn)定性、進(jìn)樣量重現(xiàn)性、出峰時(shí)間、峰形和柱效等性能產(chǎn)生明顯影響。本論文的研究結(jié)果進(jìn)一步證明，電滲泵進(jìn)樣和Teflon連接斷口