常規(guī)及微型化毛細(xì)管電泳-電化學(xué)檢測聯(lián)用技術(shù)及其應(yīng)用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文分為七章: 第一章緒論 毛細(xì)管電泳具有分離效率高,快速和所需樣品量少等特點。應(yīng)用范圍包括無機(jī)離子的分析,有機(jī)小分子分析,環(huán)境分析,食品分析,生物分析,藥物分析等。在分析化學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)、藥物化學(xué)、食品化學(xué)、環(huán)境化學(xué)和醫(yī)學(xué)等許多領(lǐng)域,有著廣闊的應(yīng)用前景。在緒論中回顧了毛細(xì)管電泳的歷史,現(xiàn)狀,發(fā)展趨勢,主要特點和研究進(jìn)展,重點對毛細(xì)管電泳.電化學(xué)檢測(CE-ED)進(jìn)行了較為全面的綜述。根據(jù)本論文的研究內(nèi)容,重點

2、綜述了常規(guī)及微型化毛細(xì)管電泳在中藥,食品成分分析和臨床疾病診斷中的應(yīng)用研究。本論文采用CE-ED技術(shù),測定了幾種中藥、食品中的活性成分,同時也將微型化毛細(xì)管電泳應(yīng)用范圍延伸到臨床疾病的診斷上,大大拓展了CE-ED的應(yīng)用范圍,探討了毛細(xì)管電泳.電化學(xué)檢測聯(lián)用技術(shù)在藥物分析、生化分析中的一些應(yīng)用。 第二章 杜仲及其保健品中生物活性成分的毛細(xì)管電泳 電化學(xué)檢測本實驗采用毛細(xì)管電泳.電化學(xué)檢測法(CE-ED)同時分離測定了杜仲葉

3、、杜仲皮及市售杜仲保健品中蘆丁、抗壞血酸、金絲桃甙、綠原酸、槲皮素等多種生物活性成分的含量,考察了運行緩沖液酸度和濃度、分離電壓、氧化電位和進(jìn)樣時間等實驗參數(shù)對分離、檢測的影響。在最優(yōu)化條件下,以300μm碳圓盤電極為檢測電極,檢測電位為+0.95 V(vs.SCE),50 mmol/L硼砂的運行緩沖液(pH 9.0)中,上述各組分在20 min內(nèi)可實現(xiàn)基線分離。各組分濃度與峰電流在三個數(shù)量級范圍內(nèi)呈良好線性,檢測下限(S/N=3)分別

4、為3.27×10<'-8>g/mL、8.10×10<'-8>g/mL、4.50×10<'-8>g/mL、9.57×10<'-8>g/mL和4.03×10<'-8>g/mL。該方法已成功地應(yīng)用于杜仲及其保健品中生物活性成分的測定,結(jié)果令人滿意。 第三章地骨皮中生物活性成分的毛細(xì)管區(qū)帶電泳 安培檢測方法研究采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳.安培檢測法同時分離測定了中藥地骨皮中刺槐素、莨菪亭、山奈酚、對香豆酸、香草酸、木犀草素和槲皮素等多種

5、生物活性成分,考察了運行液酸度和濃度、分離電壓、氧化電位和進(jìn)樣時間等實驗參數(shù)對分離、檢測體系的影響。在最佳實驗條件下,以直徑300 μm的碳圓盤電極為工作電極,檢測電位為+0.95V(Vs.SCE),在80 mmol/L的硼砂緩沖溶液(pH 9.0)中,七組分在24 min可實現(xiàn)基線分離。七組分峰電流與其濃度在1.0×10<'-3>~1.0×10<'-1>g/L范圍內(nèi)呈良好線性,檢出限(S/N=3)達(dá)3.5×10<'5>~6.0×10<

6、'-5>g/L。該方法成功地應(yīng)用于中藥地骨皮中生物活性成分的含量檢測。 第四章 毛細(xì)管區(qū)帶電泳-安培檢測蒲公英中的多酚 采用毛細(xì)管電泳-安培檢測法(CE-AD)同時測定了蒲公英中的香葉木素、阿魏酸、綠原酸、木犀草素和咖啡酸五種主要生物活性成分的含量。本實驗采用柱端射壁式檢測法,以直徑300 μm的碳圓盤電極為工作電極,檢測電位為+0.85 V(Vs.SCE)。在優(yōu)化的測定條件下,上述五種組分在50mmol/L,pH 8.

7、0的硼砂緩沖溶液中17 min內(nèi)達(dá)到基線分離。五種組分在兩個數(shù)量級的范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系,檢測下限(S/N=3)達(dá)1.7×10<'-7>-7.0×10<'-7>g/mL。該法已成功的應(yīng)用于蒲公英中的多酚的分離檢測;結(jié)果令人滿意。 第五章毛細(xì)管電泳-電化學(xué)方法檢測玉米須、玉米葉及玉米粒中生物活性成分 玉米含有豐富的黃酮類和酚酸類成分。然而,除玉米粒外,玉米的其他部位沒有受到重視。本實驗采用毛細(xì)管電泳.電化學(xué)方法分離檢測玉米

8、須、玉米葉及玉米粒中的表兒茶酸、蘆丁、維生素C(Vc)、山萘酚、綠原酸和槲皮素,并分析比較了玉米須、玉米葉及玉米粒中主要活性成分含量。為了獲得最優(yōu)化的分析條件,研究了緩沖液的濃度、酸性;分離電壓;工作電極電位等實驗條件。在最優(yōu)化條件下,上述六種被分析物能夠在40mmol/L(pH 9.2)硼砂硼酸體系中,在19 min內(nèi)實現(xiàn)較好分離。檢測下限在4.97×10<'-8>到9.75×10<'-8>g/mL之間.該方法已經(jīng)成功地用于玉米須、玉

9、米葉及玉米粒中生物活性成分檢測,實驗結(jié)果令人滿意。 第六章毛細(xì)管電泳-安培檢測法在咖啡天然抗氧化成分極性溶劑提取效率中的研究 本實驗首次采用毛細(xì)管電泳.安培檢測法(CE-AD)同時分離測定了咖啡中兒茶素、蘆丁、阿魏酸、鄰苯二酚、綠原酸、咖啡酸、沒食子酸和原兒茶酸等八種抗氧化活性成分,考察了運行液酸度和濃度、分離電壓、氧化電位和進(jìn)樣時間等實驗參數(shù)對分離、檢測體系的影響。在優(yōu)化實驗條件下,以直徑300μm碳圓盤電極作為工作電

10、極,檢測電位為+950 mV(vs.SCE),在80 mmol/L的硼砂緩沖溶液(pH 8.4)中,八組分在26 min可實現(xiàn)基線分離。八組分濃度與峰電流在三個數(shù)量級范圍內(nèi)呈良好線性,檢出限(S/N=3)達(dá)6.0x10<'-8>-3.6×10<'-7>g/mL。該方法已成功地應(yīng)用于不同極性溶劑對咖啡中抗氧化成分提取效率的研究,結(jié)果令人滿意。 第七章微型化毛細(xì)管電泳-安培檢測法測定人體唾液和尿液中的尿酸成分 本實驗采用改良

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