基于金納米粒子團(tuán)聚及熒光共振能量轉(zhuǎn)移的三聚氰胺檢測(cè).pdf

1、基于金納米粒子團(tuán)聚及熒光共振能量轉(zhuǎn)移的三聚氰胺檢測(cè)MelamineDetectionBasedonGoldNanoparticlesAggregationandFluorescenceResonanceEnergyTransfer學(xué)科專(zhuān)業(yè)：藥物分析研究生：胡云麗指導(dǎo)教師：萬(wàn)謙宏教授天津大學(xué)藥物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院二零一零年五月，‘ilr’緬‘套‘摘要三聚氰胺是一種工業(yè)粘合劑，由于其富含氮而被不法商販非法添加到食品中，引發(fā)了多起人和寵物中毒致病

2、致死事件。目前，三聚氰胺的檢測(cè)方法主要包括高效液相色譜法，液相色譜質(zhì)譜連用法，氣相色譜質(zhì)譜連用法等。這些方法大多需要昂貴的設(shè)備，耗時(shí)長(zhǎng)，某些方法的靈敏度低。因此，建立食品中三聚氰胺快速、靈敏、廉價(jià)的檢測(cè)方法十分必要。根據(jù)三聚氰酸與三聚氰胺的特異性氫鍵結(jié)合特性，本文發(fā)展了基于納米粒子的三聚氰胺快速檢測(cè)新方法。本文首先制備膠體金納米粒子并對(duì)其進(jìn)行表面修飾。通過(guò)檸檬酸鈉還原法制備金納米粒子，并通過(guò)高分辨電鏡(HRTEM)，紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)

3、金納米粒子進(jìn)行了表征。接著，采用常規(guī)有機(jī)合成技術(shù)，制備了含巰基的三聚氰酸，即l一(2巰乙基)一1，3，5三嗪酮2，4，6三酮(MTT)。通過(guò)巰基配體交換法在金納米粒子表面修飾MTT，并將其應(yīng)用于三聚氰胺的檢測(cè)，在MTT修飾的金納米粒子溶液中加入三聚氰胺，通過(guò)觀察溶液的顏色變化實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)三聚氰胺，考察了時(shí)間和三聚氰胺濃度對(duì)團(tuán)聚反應(yīng)的影響。為了進(jìn)一步對(duì)三聚氰胺進(jìn)行定量檢測(cè)，發(fā)展了基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移體系(FRET)三聚氰胺檢測(cè)的方法，以F

4、ITC與三聚氰胺連接作為熒光發(fā)射基團(tuán)，以MTT修飾的金納米粒子作為熒光淬滅劑，通過(guò)三聚氰胺與MTT的氫鍵結(jié)合實(shí)現(xiàn)熒光淬滅，體系中加入的三聚氰胺可與MTT修飾金納米粒子結(jié)合，從而引起熒光恢復(fù)。通過(guò)熒光恢復(fù)量實(shí)現(xiàn)對(duì)三聚氰胺定量檢測(cè)。為了進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)對(duì)金納米粒子淬滅機(jī)理的研究，通過(guò)巰基水相法制備碲化鎘量子點(diǎn)。分別考察了反應(yīng)時(shí)間、穩(wěn)定劑等對(duì)量子點(diǎn)制備的影響，采用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、熒光分光光度計(jì)、HRTEM等手段對(duì)量子點(diǎn)進(jìn)行了表征。最后，將量子點(diǎn)

5、代替FITC作為熒光供體，MTT修飾的金納米粒子作為熒光受體，構(gòu)建新型的熒光共振轉(zhuǎn)移體系，以應(yīng)用于三聚氰胺的檢測(cè)并考察其機(jī)理。綜上所述，本文在成功制備碲化鎘量子點(diǎn)和金納米粒子的基礎(chǔ)上，發(fā)展了三種基于納米粒子的三聚氰胺的檢測(cè)方法，一是基于三聚氰胺與MTT修飾金納米粒子的團(tuán)聚反應(yīng)，通過(guò)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)考察了這種方法與時(shí)間濃度的相關(guān)性。二是構(gòu)建了新型的基于MTT修飾的金納米粒子與結(jié)合三聚氰胺的FITC的熒光共振能量轉(zhuǎn)移體系，具有實(shí)現(xiàn)三聚氰胺