茚三酮分光光度法分析賴氨硫酸酸鹽中L-賴氨酸含量的研究.pdf

1、賴氨酸是人體必需而又無法自身合成，是人體必需的八種氨基酸之一，是唯一的僅L-型成分才能有效利用的，故稱為“特殊必需氨基酸”。賴氨酸在維持體內(nèi)酸堿平衡，合成血紅蛋白，促進(jìn)大腦神經(jīng)細(xì)胞的再生，參與脂肪代謝，提高人體免疫，保持人體氮平衡等生理活動中發(fā)揮著重要作用。賴氨酸常以鹽類晶體存在，因為賴氨酸呈弱堿性，吸收空氣中的二氧化碳;易溶于水，在水中的溶解度大，以賴氨酸的晶體形式很難存在。
　　作為賴氨酸產(chǎn)品飼料添加劑，主要有兩類:賴氨酸硫酸

2、鹽和賴氨酸鹽酸鹽。賴氨酸鹽酸鹽是結(jié)晶產(chǎn)品，比較純凈。賴氨酸硫酸鹽產(chǎn)品是發(fā)酵液干燥后產(chǎn)物，包括了賴氨酸硫酸鹽及其它發(fā)酵副產(chǎn)物，不是單一化合物，故賴氨酸含量的檢測不能用常規(guī)滴定方法。因此很有必要探索一種快速，高效的，準(zhǔn)確的檢驗方法，滿足飼料添加劑賴氨酸硫酸鹽生產(chǎn)過程需要。
　　本文分析了茚三酮分光光度法用于賴氨酸含量檢測的實(shí)驗條件，并用國家標(biāo)準(zhǔn)對該方法進(jìn)行了方法驗證;最后用該方法在賴氨酸生產(chǎn)廠的實(shí)際應(yīng)用，結(jié)論如下:
　　(1)摸

3、索茚三酮分光光度法檢測賴氨酸的最佳實(shí)驗條件。賴氨酸濃度在0.05-0.5mg/ml，顏色穩(wěn)定，1ml茚三酮顯色劑，加熱至100℃的沸水，加熱15分鐘，檢測波長480nm，采用1厘米比色皿，檢測吸光度。用新檢測方法對0.3mg/ml賴氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行10次平行實(shí)驗，實(shí)驗數(shù)據(jù)用單尾和雙尾的t檢驗，顯示無系統(tǒng)誤差，測量結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)值無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　(2)結(jié)合國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T27025/ISO17025《檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗室能力認(rèn)可通用要求

4、》《檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗室能力認(rèn)可準(zhǔn)則》，以及《ICH三方協(xié)調(diào)指導(dǎo)原則》對茚三酮分光光度法進(jìn)行驗證，樣品加標(biāo)回收率在98％-102％，精密度相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2％，0.02mg/ml-0.5mg/ml之間線性良好，方法不確定度在1.67％，專屬性實(shí)驗表明蛋氨酸、蘇氨酸、谷氨酸不影響準(zhǔn)確性。滿足國家標(biāo)準(zhǔn)對檢驗新方法的要求規(guī)定。
　　(3)將建立的茚三酮分光光度法檢測賴氨酸用于中糧生化賴氨酸硫酸鹽車間進(jìn)行賴氨酸生產(chǎn)過程檢測，實(shí)驗顯示使用效果良