魚(yú)鱗抗菌肽制備及抗菌包裝應(yīng)用研究.pdf

1、我國(guó)是草魚(yú)食用大國(guó)，魚(yú)鱗作為高產(chǎn)低值的下腳料之一，因富含膠原蛋白而具有較高的研究和開(kāi)發(fā)價(jià)值。本文以草魚(yú)魚(yú)鱗為原料采用響應(yīng)面法優(yōu)化抗菌肽制備工藝、粗分離后對(duì)其性狀表征、并與可食用膜相結(jié)合進(jìn)行應(yīng)用研究，不僅合理利用了工業(yè)廢料還開(kāi)發(fā)了一種新型的天然抗菌劑。
　　1.抗菌肽（Antimicrobial peptides，AMPs）分兩步制備:超聲輔助酸法提取膠原蛋白、酶解制備抗菌肽。為了提高抑菌性選取胃蛋白酶、胰蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋

2、白酶分別酶解魚(yú)鱗得到抗菌肽，抑菌試驗(yàn)結(jié)果表明:酸性蛋白酶酶解產(chǎn)物抑菌性最好。響應(yīng)面優(yōu)化制備工藝得到:超聲時(shí)間8.06 min，pH2.56，酶解時(shí)間1.44 h，酶解溫度39.5℃，在此條件下酶解產(chǎn)物對(duì)大腸桿菌抑菌圈直徑為35.14 mm而預(yù)測(cè)值為35.03 mm，結(jié)果表明該回歸模型可信度高。
　　2.最佳工藝條件下制備粗酶液依次經(jīng)葡聚糖凝膠G-100與葡聚糖凝膠G-50分離純化得到G2組分，蛋白質(zhì)溶度由20.90 mg/mL降至

3、1.57 mg/mL，說(shuō)明初分離能除去大量雜蛋白。抑菌試驗(yàn)表明:G2組分熱穩(wěn)定性及低溫穩(wěn)定性良好，但酸堿穩(wěn)定性差在pH達(dá)到5時(shí)即失去抑菌性。G2組分對(duì)大腸桿菌、副溶血性弧菌、希瓦氏菌的最小殺菌濃度(MBC)為62.50μg/mL高于金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、沙門(mén)氏菌32.25μg/mL，對(duì)以上六種菌最小抑菌濃度(MIC)為7.81μg/mL;在2MIC、MIC、1/2MIC濃度下均能影響細(xì)菌生長(zhǎng)曲線(xiàn)即延遲期增長(zhǎng)，對(duì)數(shù)期縮短甚至無(wú)對(duì)數(shù)

4、期出現(xiàn)。
　　3.運(yùn)用單因素和正交試驗(yàn)優(yōu)化以粗酶液、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、海藻酸丙二醇酯(PGA)為成膜基質(zhì)的復(fù)合膜制備工藝，以甘油為增塑劑，CaCl2交聯(lián)改性后測(cè)定膜的物理性能及抑菌性能。正交試驗(yàn)結(jié)果為:甘油添加量為干物質(zhì)重0.1倍，PGA溶液(2％w/v)及HPMC溶液(2％w/v)添加量均為120 g，粗酶液添加量為3 mL;在此條件下對(duì)大腸桿菌抑菌圈直徑為24.75 mm，抗拉伸強(qiáng)度為8.87Mpa，水蒸氣透過(guò)量為

5、35.2 g/(m2×d)。FTIR、DSC分析得出大分子間相互作用形成新的穩(wěn)定體系，復(fù)合膜相容性良好。
　　4.以pH、TVB-N、菌落總數(shù)、感官評(píng)分為指標(biāo)，空白對(duì)照不做任何處理、陰性對(duì)照用不添加抗菌肽的復(fù)合膜處理、實(shí)驗(yàn)組用抗菌復(fù)合膜處理。研究在4℃環(huán)境下對(duì)冷鮮肉保藏品質(zhì)的影響，結(jié)果表明:實(shí)驗(yàn)組能夠抑制冷鮮肉表面微生物生長(zhǎng)，減緩蛋白質(zhì)分解和脂肪氧化。抗菌膜氧氣透過(guò)率為44.117 mL/(m2×d)高于陰性對(duì)照組(36.306m