ATP適體探針在微囊內(nèi)部的固定及信號傳導(dǎo)與傳感過程.pdf

1、細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞間存在著非常復(fù)雜的通訊機(jī)制，并且引發(fā)相應(yīng)的生命過程與現(xiàn)象。因此建立仿生體模擬細(xì)胞的信號傳導(dǎo)過程將有助于促進(jìn)對生命現(xiàn)象的認(rèn)識。傳統(tǒng)的仿生信號傳導(dǎo)研究主要在于脂質(zhì)體囊泡表面構(gòu)建基于分子水平上的信號接收、傳遞及轉(zhuǎn)換。本論文從人工仿生細(xì)胞入手，構(gòu)建一個由熱效應(yīng)引發(fā)物質(zhì)傳遞，然后再由物質(zhì)傳遞引發(fā)熒光信號的仿生信號傳導(dǎo)與仿生傳感系統(tǒng)。主要開展了以下三個方面的工作:
　　1.制備了一種磁性和溫敏性的智能納米反應(yīng)器。通過溶劑熱法合成直

2、徑約為250nm的Fe3O4磁性納米粒子，然后將Au納米粒子、SiO2、聚N-異丙基丙烯酰胺）(PNIPAM)依次涂覆與其表面，利用HF溶液刻蝕除去SiO2層，得到Fe3O4/Au/void/PN IPAM蛋殼微球，每個微球都具有可移動的核心(Fe3O4/Au)和溫敏響應(yīng)殼層(PNIPAM)。
　　2.構(gòu)建出一種熒光ATP適體傳感器，建立了高靈敏度與高選擇性的ATP的分析方法。首先以合成的5'-FAM作為能量供體，采用檸檬酸鈉還原

3、氯金酸法制取的Au納米粒子作為能量受體，通過Au-S鍵將單鏈DNA連接到表面。在pH=8.0Tris-HCl緩沖液中通過DNA鏈間的雜交，構(gòu)建了熒光共振能量轉(zhuǎn)移體系(FRET)。測定了5'-FAM-DNA、探針體系和探針體系+ATP的熒光強(qiáng)度。
　　3.研究了ATP適體在仿生細(xì)胞內(nèi)外的傳導(dǎo)與傳感過程。首先利用多孔溫敏材料作為人工仿生細(xì)胞的細(xì)胞膜，被金納米粒子包覆的磁性納米微球?yàn)榉律?xì)胞核，熒光ATP適體探針作為敏感單元，三磷酸腺苷