基于核酸適體與納米材料的新型仿生傳感器.pdf

1、細(xì)胞信號(hào)的傳導(dǎo)是生命體表現(xiàn)出宏觀生命現(xiàn)象的最基本微觀前提，因此仿生信號(hào)傳導(dǎo)過程成為闡明生命機(jī)理、探究基本生命現(xiàn)象的重要工具。本論文構(gòu)建一個(gè)由熱效應(yīng)引發(fā)信號(hào)開關(guān)響應(yīng)并引起物質(zhì)間傳遞的仿生信號(hào)傳導(dǎo)與仿生傳感系統(tǒng)。以基于FRET理論的熒光信號(hào)作為信號(hào)，構(gòu)建ATP適配體傳感器，并進(jìn)一步優(yōu)化適體探針的構(gòu)建條件。
　　在探針構(gòu)建中探索了兩種緩沖體系。其中PBS緩沖液顯示出更好的特性。AuNPs和HS-DNA在PBS中的連接比在TBE緩沖液中更

2、穩(wěn)定。此外，在PBS緩沖液中由Au-DNA制備的適體傳感器顯示出更好的熒光淬滅和恢復(fù)能力。采用了兩種緩沖液來連接金納米粒子與巰基DNA，用熒光素做能量供體，用連接巰基DNA的金納米粒子做能量受體，構(gòu)建了基于熒光能量共振轉(zhuǎn)移用于ATP檢測(cè)的的熒光適體傳感器。用紫外可見分光光度計(jì)確定DNA是否連接在金納米粒子上，用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)熒光的淬滅及恢復(fù)情況。經(jīng)過紫外及熒光的表征可得出如下結(jié)論:用BSPP修飾過的金納米粒子可以提高對(duì)氯化鈉的承受能

3、力。實(shí)驗(yàn)采用兩種緩沖液制各能量受體，綜合比較得出在PBS緩沖液條件下金納米粒子與DNA的摩爾比越高且?guī)€基化DNA經(jīng)過TCEP還原，二者的連接率越高。在熒光共振能量轉(zhuǎn)移的體系中，從淬滅率來看更加印證了在PBS緩沖液中巰基化DNA與金納米粒子的連接更好。在做熒光淬滅的時(shí)候，熒光素與DNA的摩爾比為1∶1的時(shí)候淬滅效果最好。研究了ATP適體在仿生細(xì)胞內(nèi)外的傳導(dǎo)與傳感過程。首先利用多孔溫敏材料作為人工仿生細(xì)胞的細(xì)胞膜，被金納米粒子包覆的磁性納米