耳突麒麟菜寡糖的抗食物過敏研究.pdf

1、食物過敏主要指人體對食物中的抗原物質產生的由免疫介導的不良反應，其臨床表現常表現為消化道、皮膚、呼吸系統(tǒng)等疾病。為了有效緩解食物過敏患者的過敏癥狀，臨床主要用抗組胺類藥物治療，但是藥物治療具有副作用大、不能根治的缺點。所以開發(fā)抗過敏天然活性物質代替藥物緩解食物過敏反應顯得尤為重要。
　　本研究通過酶解、超濾、DEAE-cellulose52離子柱層析及Detoxi-Gel內毒素去除柱層析的方法獲得高純度的耳突麒麟菜寡糖(ESO)，

2、其總糖含量為97.87％;紅外光譜結果分析顯示ESO含有硫酸根的特征吸收峰，含量為18.17％。高效液相色譜分析發(fā)現ESO的主要單糖組成為半乳糖，含量達到87.65％;薄層層析結合離子色譜分析顯示ESO主要由四糖和六糖組成，且分子量大小分別為796Da和2112Da。
　　本研究主要通過體外細胞模型和體內小鼠模型共同評價并探究ESO抗過敏活性及其機制。體外細胞模型結果顯示ESO能夠顯著抑制RBL-2H3細胞脫顆粒、組胺、白介素-4

3、(IL-4)和腫瘤壞死因子-α的釋放;小鼠骨髓來源肥大細胞(BMMCs)模型結果表明ESO能夠特異性的誘導過敏原激活BMMCs的凋亡，而對未激活的BMMCs沒有顯著影響。
　　利用來源于擬穴青蟹中的原肌球蛋白(TM)為過敏原，建立TM小鼠食物過敏模型評價ESO的抗過敏活性。小鼠食物過敏模型結果顯示ESO能夠顯著緩解食物過敏小鼠的腹瀉，低溫等過敏癥狀;ELISA實驗結果顯示ESO能夠顯著降低過敏小鼠血清IgE、IgG1、組胺、肥大細

4、胞蛋白酶的分泌水平;小鼠脾臟和腸系膜來源淋巴細胞因子蛋白水平結果顯示ESO能夠顯著降低Th2細胞因子IL-4、IL-13的分泌，促進Th1細胞因子IFN-γ和調節(jié)性T(Treg)細胞因子IL-10的分泌;基因水平測定結果顯示ESO能夠顯著下調Th2細胞轉錄因子GATA-3與Th1細胞轉錄因子T-bet表達的比值，上調Treg轉錄因子Foxp3的表達;流式細胞術測定結果顯示ESO能夠顯著促進脾臟和腸系膜來源Treg細胞的分化。