改性類人膠原蛋白鐵的制備工藝及生物學(xué)功效.pdf

1、缺鐵性貧血是目前嚴重影響人類健康的疾病之一，它是由于體內(nèi)貯存鐵不能滿足正常紅細胞生成的需要而引發(fā)的貧血。據(jù)WHO報道，全世界已有超過20％的人群患有不同程度的貧血。傳統(tǒng)的補鐵劑有無機鐵鹽、有機鐵鹽、氨基酸螯合鐵等，雖然它們的鐵含量較高，但由于其對身體均存在不同程度的副作用，嚴重影響了鐵的生物利用率。為了得到安全高效的補鐵劑，本實驗以生物相容性良好的類人膠原蛋白(HLC)為原料，通過巰基化改性，以FeSO4為配體，制備出一種新型的巰基化類

2、人膠原蛋白鐵(SH-HLC-Fe)復(fù)合物補鐵劑。
　　本實驗對SH-HLC-Fe的合成工藝進行了優(yōu)化，最終得出制備SH-HLC-Fe的最佳條件為:pH6.5，溫度25℃，物料比m(SH-HLC)/m(Fe2+)4∶1，底物濃度c(SH-HLC)4％。
　　采用火焰原子吸收光譜法、紅外光譜法和熱重分析法分別對HLC、SH-HLC和SH-HLC-Fe復(fù)合物三者進行了比較。結(jié)果表明:通過進一步的工藝優(yōu)化，SH-HLC與鐵的結(jié)合能力

3、有了顯著的提高，每摩爾SH-HLC可以結(jié)合35.34摩爾鐵離子。紅外光譜的數(shù)據(jù)表明SH-HLC與鐵離子的結(jié)合位點主要集中在蛋白的N-H基團上。熱力學(xué)分析證明了SH-HLC-Fe具有良好的熱穩(wěn)定性。
　　采用小鼠成纖維細胞(L929)以及MTT法對SH-HLC-Fe的安全性進行了評估，初步證明了SH-HLC-Fe復(fù)合物是安全無毒的，并且具有促進細胞生長的作用。進一步采用聚丙烯酰胺凝膠電泳及凝膠過濾色譜對模擬體外消化的樣品做了定量的分

4、析。模擬體外消化聯(lián)合Caco-2細胞吸收實驗表明，SH-HLC-Fe相比于其它補鐵劑，鐵的生物利用率有了顯著的提高，同時發(fā)現(xiàn)維生素C在一定程度上能夠顯著提高鐵的生物利用度。
　　最后，通過建立缺鐵性貧血模型小鼠，研究幾種補鐵劑的補鐵功效，結(jié)果顯示鐵的生物功效性的大小依次為:SH-HLC-Fe消化物＞SH-HLC-Fe＞甘氨酸螯合鐵＞琥珀酸亞鐵＞硫酸亞鐵。表明SH-HLC-Fe復(fù)合物作為一種新型補鐵劑，為將來進一步開發(fā)研究為口服補鐵