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文檔簡介
1、一 基因工程與食品名詞解釋1.基因工程:是指將目的基因通過體外重組后導(dǎo)入受體細胞內(nèi),使這個基因能在受體細胞內(nèi)復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯表達的技術(shù)。2.限制酶:是一類能夠識別雙鏈 DNA 分子中某種特定核苷酸序列并由此切割DNA 雙鏈結(jié)構(gòu)的核酸內(nèi)切酶。3.DNA 連接酶:是一種能在 ATP 或 NAD+存在下催化雙鏈 DNA 片段緊靠在一起的 3’羥基末端與 5’磷酸基團末端之間形成磷酸二酯鍵,使兩末端連接起來的酶。4.DNA 聚合酶:能夠催化 D
2、NA 復(fù)制和修復(fù) DNA 分子損傷的一類酶,可在其催化下進行 DNA 體外合成反應(yīng) DNA 修飾酶:這類酶能對 DNA 分子進行一些比如 3’末端加 dNTP 或 5’末端添加/脫除磷酸基團等等的修飾 T4 噬菌體多核苷酸激酶:是一種能催化γ-磷酸從 ATP 分子轉(zhuǎn)移給 DNA 或 RNA分子的 5’-OH 末端的酶,它對底物分子長度沒有限制。5.堿性磷酸酶:這種酶能催化核酸分子脫掉 5’磷酸基團,從而使 DNA 或 RNA 片段的 5
3、’-P 末端轉(zhuǎn)換成 5’-OH 末端6.啟動子:是指一段能被宿主 RNA 聚合酶特異性識別和結(jié)合并指導(dǎo)目的基因轉(zhuǎn)錄的 DNA 序列,是基因表達調(diào)控的重要元件。 20.化學(xué)轉(zhuǎn)化法:對受體細胞經(jīng)過氯化鈣、氯化銣等化學(xué)試劑的處理,使細胞膜的通透性發(fā)生暫時性的改變從而使受體細胞進入感受態(tài),再經(jīng)過熱擊、冷凍等處理即可將外源 DNA 攝入。 21.電穿孔轉(zhuǎn)化法:是指利用脈沖電場將 DNA 導(dǎo)入受體細胞的方法。 基因定點誘變:是在體外特異性地取代、插
4、入或缺失 DNA 序列中任何一個特定堿基的技術(shù),包括盒式取代誘變、寡核苷酸引物誘變及 PCR 定點誘變等22.SD 序列:Shine-Dalgarno 序列,即核糖體結(jié)合位點,是指原核基因轉(zhuǎn)錄起始位點下游的一段 DNA 序列,它與核糖體 16S rRNA 特異配對而與宿主核糖體結(jié)合,對 mRNA 的翻譯起決定性作用。23. DNA 體外重組:是指將目的基因(外源 DNA 片段)用 DNA 連接酶在體外連接到合適的載體 DNA 上形成重組
5、 DNA。24.抗生素抗性基因插入失活法:載體的抗藥性基因內(nèi)具有限制酶的識別位點,用某種限制酶消化并再此位點插入外源 DNA 時,抗藥性基因不再被表達,當(dāng)這個重組載體轉(zhuǎn)化宿主菌并在藥物選擇平板上培養(yǎng)時,根據(jù)對該藥物由抗性轉(zhuǎn)為敏感,便可篩選出重組轉(zhuǎn)化子。25.β-半乳糖苷酶基因插入失活法:質(zhì)粒載體上 LacZ 基因編碼的β-半乳糖苷酶 N端與受體細菌編碼的 C 端片段實現(xiàn)а互補而具有酶活性,可在 IPTG 誘導(dǎo)下分解生色底物 X-gal
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