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文檔簡介
1、DNA(脫氧核糖核酸)，是生物體遺傳信息的攜帶者。近年的研究發(fā)現(xiàn)，帶有遺傳信息的DNA片段的異常表達與疾病和腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預后密切相關。傳統(tǒng)方法檢測DNA具有操作復雜、成本高、耗時長等局限性。因此,建立一種簡便、靈敏和特異的DNA定量檢測新方法具有十分重要的意義。本課題整合莖環(huán)自組裝擴增技術和酶催化信號放大策略,構建了一種簡單的、等溫的電化學生物傳感器，實現(xiàn)了DNA的高靈敏和高特異檢測：首先，靶DNA通過堿基互補與生物素標記的莖環(huán)H
2、1雜交，打開H1的莖環(huán)結構；隨后，打開的莖環(huán)H1與莖環(huán)H2雜交，將靶DNA置換下來，生成H1-H2復合物；被置換下來的靶DNA促發(fā)下一輪莖環(huán)自組裝擴增反應，生成大量的H1-H2復合物；最后，金電極表面固定的捕獲探針與H1-H2復合物特異性雜交，形成捕獲探針-H1-H2復合物。金電極表面形成的捕獲探針-H1-H2復合物上的生物素與鏈霉親和素標記的堿性磷酸酶結合，催化底物α-萘磷酸鈉鹽產(chǎn)生電化學信號。為減少莖環(huán)之間的非特異性雜交反應，本研究
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