高效提純巢湖藍(lán)藻藻藍(lán)蛋白工藝研究.pdf

1、藻藍(lán)蛋白是一種重要的藻膽蛋白，具有抗氧化性、抗癌性等特性，在發(fā)達(dá)國家中被廣泛用作天然色素、醫(yī)藥保健品和制作熒光探針。本研究以巢湖新鮮藍(lán)藻藻泥為原料，通過凍融破壁的方法破碎藻細(xì)胞，獲得藻藍(lán)蛋白粗提液，然后用粉末活性炭吸附法粗提藻藍(lán)蛋白，并在此基礎(chǔ)上分別通過雙水相萃取法和多步鹽析法純化藻藍(lán)蛋白，以探尋高效提純藻藍(lán)蛋白的最佳工藝。
　　在粉末活性炭吸附法粗提藻藍(lán)蛋白的實(shí)驗(yàn)研究中，首先對適合用于藻藍(lán)蛋白純化的粉末活性炭進(jìn)行了種類、粒徑的篩

2、選，接著對粉末活性炭的溫度、添加量、處理時(shí)間、pH值等條件進(jìn)行了研究，最終確定了粉末活性炭吸附法粗提藻藍(lán)蛋白的最佳處理?xiàng)l件，即煤質(zhì)粉末活性炭，400～500目，溫度25℃，添加量100g/L，吸附時(shí)間10min，溶液pH值為7.0。
　　在雙水相萃取藻藍(lán)蛋白的實(shí)驗(yàn)研究中，以粉末活性炭吸附法處理后的藻藍(lán)蛋白溶液為原料，分別用常見高聚物與鹽配成的20種高聚物-鹽雙水相體系進(jìn)行萃取，分析處理結(jié)果選出最佳的雙水相體系;然后，通過單因素和正

3、交實(shí)驗(yàn)，確定雙水相萃取法純化藻藍(lán)蛋白的最優(yōu)工藝條件為:PEG4000做高聚物，磷酸鉀做成相鹽，PEG質(zhì)量濃度為4％，磷酸鉀質(zhì)量濃度為16％，體系pH值為7.0。
　　在多步鹽析純化藻藍(lán)蛋白的實(shí)驗(yàn)研究中，以粉末活性炭吸附法處理后的藻藍(lán)蛋白溶液為原料，通過多步鹽析單因素實(shí)驗(yàn)研究硫酸銨濃度和鹽析次數(shù)對藻藍(lán)蛋白純化效果的影響;然后，以一至四步鹽析硫酸銨濃度為影響因素，通過正交實(shí)驗(yàn)研究四步鹽析法純化藻藍(lán)蛋白的最優(yōu)工藝條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:四步