萊茵衣藻chlamydomonasreinhardtii.cbn1和cao突變基因的對比分析及cao基因的分子定位

1、新疆大學(xué)碩士學(xué)位論文萊茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii.）cbn1和cao突變基因的對比分析及CAO基因的分子定位姓名：艾山江·阿不都拉申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：吾甫爾·米吉提20070602新疆大學(xué)碩士學(xué)位論文A b s t r a c tW h e n p l a s m i d 臨p 1 0 9 - E 8 w i t hC A O w a s t r a n s f o

2、 r m e d i n t oC h l a m y d o m o n a sc b n ls t a n d a r tm u t a n ts t r a i nC C - 1 3 5 4 ( c b n l - 4 8r a t + ) b ye l e c t r o p o r a t i o n , n l 呲t h a n2 0 乜a n s f ‘' 冊a n bw c r ec u l t u r e d

3、O i l t h eT A P c u l t u r ec o n t a i n sz e o c i n , t h ec o v e r ye x p r e s s i o no fc h l o r o p h y l l bW a sd e t e c t e d b yP e Ra n d H P L C , w h i c hv e r i f i e dp r i m a r i I yt h a tc b n l

4、a n dc a ow i t h o u tt h e a b i l i t yo fc h l o r o p h y l lbs y s t h e s i sb o t hp o s s e s sa l l e l i c c h a r a c t e r s ．T h em u t a n ts t r a i n l 6 4 1 ·l b ( c b n l ·4 3m f + ) a n dm u

5、 t a n ts w a i nC C - 1 3 5 4 ( c b n l ·鈣棚+ ) w e 他t a k e nt oc r o s sw i t ht h e C a Om u t a n ts t r a i nC B S 5 - c l ( c 幻m r - ) a n d 9 8 9m e i o s i s p r o g e n yw 讎o b t a i n e df r o m l 6 4 1 一l

6、 b xC B S 5 - c lh y b r i da n d8 5 3p r o g e n yW a s o b t a i n e df r o mC C - 1 3 5 4 x C B S 5 - e l h y b r i d ,t o t a lm e i o s i s p r o g e n y n u m b e ri s l 8 4 2 ．A f t e rt h a tf l u o r e s c e n c

7、 ed e t e c t i o nW a s t a k e no n t h e s eg e n e r a t i o n s f o rw h e t h e r ．t h e y h a v eC h l o r o p h y l l b ’i ts h o w e d t h a tt h e r eW a sn O w i l d t y p ep h e n o t y p e t r a n s f o r m

8、a n t s t h a t h a d C h l o r o p h y l lb ，w h i c he x a c t l yi n d i c a t e d t h a tp h e n o t y p e so fa l l s e g r e g a n t ss h o w e dt h e l a c ko fc h l o r o p h y l l b ．S t a t i s t i c so b t a i

9、 n e d f r o mr a n d o m a n a l y s i sp r o v e d t h ec l o s e l i n k a g eb e h 嗍m u t a n tg e n ec b n la n dm u t a n tg e n ec a o ．A n da m o n g t h e5 0s e g r e g a n t so b t a i n e db yc e l lm a t i n

10、g t e t r a d a n a l y s i s n o w i l d t y p e s e g r e g a n t sW a s d e t e c t e d , w h i c h f u r t h e rv e r i f i e dt h ea l l e f i cc h a r a c t e r so f m u t a n tg e n ec b n la n dC a O ．A o e o r d

11、 i n gt O t h eC A O D N As e q u e n c e i n C h l a m y D B a n d G e n e b a n k , w e p r e p a r et w o p r o b e s ：p r o b e l ( 2 2 0 b p ) a n dp r o b e 2 ( 1 0 6 7 b p ) A 蛔t h a tD N A d o tb l o ta n a l y s

12、 i sW a s p e r f o r m e dw i t h2 1B A Cc l o n e s ) b e t w e e nt h eG B P 1a n dt h eR B 4 7m o l e c u l a r m a r k e r o nc h l a m y d o m o n a sl i n k a g e g r o u pI ．T h er e s u l ts h o w e d t h a tp o

13、 s i t i v ec o n t r o lp l a s m i dP s p1 0 9 - E8a n dt w o p r o b ed i s p l a y e dc I D a sw i t hn u m b e r e d 3 3 e 2B A C c l o n ea n d 1 1 0e l s eW a s f o u n dO n o t h e rB A C c l o n e s ．I tv e r i

14、f i e s t h a tt h i ss e q u e n c e a n d t h eD N A f r a g m e n t , m a r k e db e t w e e n G B P a n dR B 4 7 o nc h l a m y d o m o n a s l i n k a g e g r o n pI ，h a v e t h ec h a r a c t e r o fh o m o l o g