電壓門(mén)控鉀離子通道kv1.3與人骨肉瘤mg63細(xì)胞關(guān)系的研究

1、廈門(mén)大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立完成的研究成果。本人在論文寫(xiě)作中參考其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當(dāng)方式明確標(biāo)明，并符合法律規(guī)范和《廈門(mén)大學(xué)研究生學(xué)術(shù)活動(dòng)規(guī)范( 試行) 》。另外，該學(xué)位論文為( 中國(guó)人民解放軍南京軍區(qū)科技創(chuàng)新基金( N O ：1 0 M A 0 7 7 ) ) 課題( 組) 的研究成果，獲得( 中國(guó)人民解放軍南京軍區(qū)科技創(chuàng)新基金) 課題( 組) 經(jīng)費(fèi)或?qū)嶒?yàn)室的資助，在

2、( 廈門(mén)大學(xué)抗癌研究中心) 實(shí)驗(yàn)室完成。( 請(qǐng)?jiān)谝陨侠ㄌ?hào)內(nèi)填寫(xiě)課題或課題組負(fù)責(zé)人或?qū)嶒?yàn)室名稱(chēng)，未有此項(xiàng)聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。)聲明人。㈣：蕩泉紗l 弓年毛只歷B摘要目的：觀(guān)察和研究電壓門(mén)控鉀離子通道K v l ．3 特異性阻滯劑r M a r g a t o x i n( M g T X ) 和?？舅? S t i c h o d a c t y l a h e l i a n t h u s t o x i n ，S H K

3、 ) 對(duì)入骨肉瘤M G 6 3細(xì)胞增殖、凋亡、細(xì)胞分裂周期、細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響，并初步探討其分子作用機(jī)制。方法：體外細(xì)胞培養(yǎng)法培養(yǎng)人骨肉瘤M G 6 3 細(xì)胞株，分別用特異性K v l ．3 鉀離子通道阻滯劑r M a r g a t o x i n 和?？舅? S H K ) 阻滯骨肉瘤M G 6 3 細(xì)胞的K v l ．3鉀離子通道，采用M T T 法檢測(cè)不同濃度r M a r g a t o x i n 和S H K 對(duì)細(xì)

4、胞增殖的影響；流式細(xì)胞術(shù)( F C M ) 檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期的影響：劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其對(duì)M G 6 3細(xì)胞遷移能力的影響；T r a n s w e l l 侵襲小室法檢測(cè)其對(duì)M G 6 3 細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響；通過(guò)R T —P C R 和W e s t e r n b l o t 印跡法檢測(cè)其對(duì)M G 6 3 細(xì)胞中相關(guān)的基因表達(dá)和蛋白合成的影響。結(jié)果：阻滯K v l ．3 鉀離子通道能有效抑制人骨肉瘤M G 6 3 細(xì)胞

5、的增殖，誘導(dǎo)M G 6 3 細(xì)胞發(fā)生凋亡，使細(xì)胞周期阻滯于G o ／G l 期，且呈劑量依賴(lài)效應(yīng)。不同濃度r M a r g a t o x i n 和S H K 處理M G 6 3 細(xì)胞后，可明顯降低M G 6 3 細(xì)胞的遷移和侵襲能力。r M a r g a t o x i n 和S H K 阻滯K v l ．3 鉀離子通道能有效下調(diào)M G 6 3 細(xì)胞中K v l 。3鉀離子基因的表達(dá)水平。結(jié)論：阻滯K v l ．3 鉀離子通道能