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1、西南大學(xué)碩士學(xué)位論文杏(Prunus armeniaca Lam.)LFY基因的克隆及轉(zhuǎn)化擬南芥的研究姓名:盧海敏申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):果樹學(xué)指導(dǎo)教師:梁國(guó)魯;單世華20080401兩南人學(xué)碩+ 學(xué)位論文的高度保守性,設(shè)計(jì)合成兼并引物2 對(duì),通過(guò)反復(fù)摸索,得出r 優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件:預(yù)變性9 4 ℃3 I l l i n ;變性9 4 ℃5 0 s e c ,退火5 5 ℃5 0 s e c ,延伸7 2 ℃1m i n 3 0 s e
2、c ,3 0 個(gè)循環(huán);繼續(xù)延伸7 2 ℃1 01 1 1 i n 。最后利用R T - P C R ,得出了杏凹y 基因的目的條帶,長(zhǎng)度為1 2 0 0 b p 左右。3 .通過(guò)大腸桿菌轉(zhuǎn)化,獲得了膽y 基因的全長(zhǎng)序列,經(jīng)測(cè)序知基因長(zhǎng)1 2 4 0 b p ,編碼4 1 0 個(gè)氨基酸。利用B l 雛t 工具,與其他果樹已知物種的“ y 基因的氨基酸同源性最高為9 7 %,核苷酸最高同源性為9 8 %。通過(guò)對(duì)氨基酸序列的同源性比對(duì)分析,證
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