分子佐劑c3d3增強(qiáng)lb.hcgβc3d3乳酸桿菌粘膜疫苗抗生育潛能的分子機(jī)制

1、復(fù)旦大學(xué) 附屬婦產(chǎn) 科 醫(yī) 院碩 士研 究 生畢業(yè) 論 文分子佐劑 c 3d 3 增強(qiáng) L b. h c G 聲。 刃 乳酸桿菌粘膜疫苗抗 生育潛 能 的分 子機(jī)制T h em ol eeularadjuvantC 3d3i m P rovesth ea nti 一 ferti li tyPoten ti alofL aetobaeil iL b. h C G 盡已 心 vacci nati onvi au P一 regul ati n

2、gtheC C L 2 5 一 m e d ia te dly m P h o ey teh o m in gin tog e n ita ltra c t研 究生姓名學(xué)科 及 專業(yè)導(dǎo) 師王 健 理婦產(chǎn) 科 學(xué)生殖 免 疫 學(xué)姚 曉 英 副 教 授二零一一年三 月I 一 健 理碩 } :學(xué) 位論 文 中文摘 要分子佐劑 c 3d 3 增 強(qiáng) L b. h c G 盡。 刃 乳酸桿菌粘膜疫苗抗 生育潛 能 的分子機(jī)制中文摘要免疫 避 孕疫

3、 苗 作 為一種 新 的節(jié) 育措 施 近 年 來越 來越 受 關(guān)注 ，其 中 以 hC G p 為基礎(chǔ) 的避 孕疫 苗是近 年來研 究得最 為成 熟 的一種 ;通過 在生育期婦 女體 內(nèi)誘 導(dǎo)產(chǎn)生抗 hc G p體液 免疫 以中和 hC G 生物學(xué)活性 ， 從而 發(fā)揮 抗 生育作用 。 升調(diào)節(jié)淋 巴細(xì)胞 歸巢到 生殖 道 勃膜 局部 ， 將有利于增 強(qiáng)粘膜 體液免疫效應(yīng) ， 從而有助于提 高避 孕疫 苗 的避孕效 果 。 我們 實(shí)驗(yàn) 室

4、前期成 功構(gòu)建 了分泌 hC G p及 攜分子 佐劑 C 3d3的 hC G p一 C 3d3 融合 蛋 白重組乳酸桿菌 。并 已研 究證 明 ，通 過勃膜 接種 B A L B/c小 鼠，能產(chǎn) 生抗 hC G p 體液 免疫應(yīng) 答 ，但 其抗 生育 作用 尚不能完全 肯 定 。因此 ，本 實(shí)驗(yàn) 擬 對 這種 表 達(dá) hC G p一 C 3d3 融合 蛋 白重 組 乳酸 桿 菌 的抗 生 育潛 能 ，及其 免疫后 淋 巴細(xì) 胞 歸巢 機(jī)

5、 制 進(jìn)行研 究 ， 為其 最 終應(yīng) 用 于 臨床 以及 提 高其 有 效 性 提 供 實(shí)驗(yàn) 依 據(jù) 。第一部分 重組乳酸桿菌 L b. h C C 盡。 打 陰道豁膜免疫 的抗生育潛 能目的 探 討 表 達(dá) hC G p一 C 3d 3 融 合 蛋 白的 重 組 乳 酸 桿 菌 疫 苗 經(jīng) 陰道 勃 膜 接 種B A L B /c小 鼠及 其 抗 生 育潛 能 。方 法 用 野 生 型 乳 酸桿 菌L b. 及 重 組 乳 酸 桿 菌

6、L b. hC 印 和L b. hC G 盡C 了 d3 以兩種 劑量(1護(hù)個(gè) 和 10 ’ 。 個(gè))經(jīng) 陰道 滴注接種6一8周齡 雌性B A L B/c小 鼠。3周后用 相同劑 量加 強(qiáng) 免疫 一 次 。于初 次免 疫 后 的第6 、7 、8周 分 別收集 血清 ; 用 該血 清 分別處 理 M LT C 一 1、B ew o細(xì)胞 系 ，及 原代 人 絨 毛 滋養(yǎng) 細(xì) 胞 ; 化 學(xué) 發(fā) 光 法 檢 測 培 養(yǎng)上 清 中孕酮 或hC

7、G p 水 平 ; E IJsA 檢測培 養(yǎng) 上 清 中 的hP IJ 水平 ; 免疫 熒 光觀 察 抗 一 血清 處 理 的B eW O細(xì) 胞 融 合情 況 。結(jié) 果 用 10 ’ 。 個(gè)L b. hc G 盡c 了 刃 陰道 勃膜 免 疫B A L B/ c小 鼠產(chǎn) 生 的抗 血清 能顯著 抑 制hC G 刺激M LT C 一 1分泌 孕 酮及 人滋養(yǎng) 細(xì) 胞 分泌hC G p和hP L ， 明顯 抑 制B eW 。細(xì) 胞 分 泌