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1、山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文丙泊酚對(duì)外源性Ca致鼠心肌線粒體損傷的保護(hù)作用姓名:田首元申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):麻醉學(xué)指導(dǎo)教師:劉保江;程橋20050518h 西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文丙泊酚對(duì)外源性C a 2 + 致鼠心肌線粒體損傷的保護(hù)作用{ 兩要目的觀察丙泊酚( P r o p o f 0 1 ) 對(duì)外源性C a 2 + 致鼠心肌線粒體損傷的影響。方法用2 1 7 ~2 3 4 9 健康W i s t a r 大鼠3 5 只,斷頭處死迅速取
2、出心臟并充分剪碎,然后用電動(dòng)玻璃勻漿機(jī)勻漿約1 0 個(gè)沖程。差速分級(jí)離心制備線粒體懸液。然后用雙縮脲法測(cè)定線粒體蛋白含量及對(duì)線粒體純度和活性進(jìn)行酶學(xué)測(cè)定,棄用活性偏低( < 5 .6 士1 .4 ) 的標(biāo)本。實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為5 組( n _ 7 ) ,取l m g 線粒體加入2 m l 反應(yīng)緩沖液中孵育2 m i n 后,分別進(jìn)行不同的處理。其中A 組不做任何處理,B 組( C a C l 2 組) 加入C a C l 2 1 0 0
3、 n m o l /m g p r o t ,C ~E 組( 丙泊酚組) 于C a C l 21 0 0 n m o l /m gp r o t 加入之前分別加入不同濃度丙泊酚( 2 5 } £M 、5 0 口M 、1 0 0 扯M ) 。記錄0 、4 、8 、1 2 、1 6 、2 0 r a i n 各時(shí)間點(diǎn)吸光度值( A 值) ,以A 值表示線粒體膜M P T 大小。然后將線粒體懸液1 3 0 0 0 94 。c 離心1 0 m
4、i n 取上清液行W e s t e r n b l o t t i n g 來(lái)反映C y t C 的釋放情況。結(jié)果M P T 的測(cè)定:B 組在不同時(shí)間點(diǎn)比較顯示第8 m i nA 值開始顯著降低,與0 r a i n 比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < o .0 5 ) 。提示線粒體開始出現(xiàn)損傷,并且這種損傷隨時(shí)間逐漸加重( P < O .0 5 和P < O .0 1 ) 。各濃度丙泊酚在各時(shí)間點(diǎn)均明顯提高了A 值,與
5、B 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < o .0 5 ) 。在第1 2 、1 6 、2 0 m i n C 、D 、E 各組與A 組比較差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < O .0 5 ) 。而D 、E 兩組比c 組明顯提高A 值,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < 0 .0 5 ) 。在第1 6 和2 0m i n 時(shí)l O O p J v t 丙泊酚比5 0 雎M 丙泊酚明顯提高A 值,D 、E 兩組比較差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P
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