kca3.1通道對子宮內(nèi)膜癌細胞增生影響的研究

1、後旦大學學校代碼：1 0 2 4 6學 號：0 3 t 1 0 8 1 8 4博士學位論文K C a 3 ．1 通道對子宮內(nèi)膜癌細胞增生影響的研究院專姓系：業(yè)：名：婦產(chǎn)科醫(yī)院婦產(chǎn)科學王朕華指導教師： 主塑宣塑壑復旦大學博十學位論文K C a 3 ．1 通道對子宮內(nèi)膜癌細胞增生影響的研究中文摘要子宮內(nèi)膜癌在人的惡性腫瘤中排名第七，發(fā)病率大約為1 5 —2 0 ／1 0 0 ，0 0 0 ，嚴重威脅婦女的健康和生命。隨著科技和醫(yī)療的發(fā)展，子

2、宮內(nèi)膜癌的治愈率逐漸提高，但是特殊的病理類型和晚期子宮內(nèi)膜癌五年的存活率還是很低。盡管對子宮內(nèi)膜癌的病因和發(fā)病機理有許多學說，但其確切的發(fā)病機制仍不清楚。鈣激活中電導鉀離子( K C a 3 ．1 ) 通道是鈣激活鉀離子通道家族中重要一員。近年研究表明：它在T 淋巴細胞的激活和增生中發(fā)揮重要的功能及在某些腫瘤腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，但它與婦科腫瘤發(fā)生的關系以及對婦科腫瘤細胞生物學行為影響尚未見報道。本課題從研究鈣激活中電導鉀離子通道

3、在正常子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌組織中表達入手，利用R N A 干擾( R N A i ) 技術抑制了子宮內(nèi)膜癌細胞株H E C 一1 一A 中K C a 3 ．1 通道的表達，并運用w e s t e r nb l o t 、R T —P C R 、流式細胞儀、R e a l - T i m e P C R 、氚胸腺嘧啶核苷( 3 H —T d R ) 參入法、該通道的各種阻斷劑，膜片鉗技術等研究K C a 3 ．1 通道在子宮內(nèi)膜癌細胞增

4、生和細胞周期中的作用及該通道的電生理特性。本課題共分三部分：①．K C a 3 ．1 通道在子宮內(nèi)膜癌組織中表達；②．子宮內(nèi)膜癌H E C - 1 - A 細胞K C a 3 ．1 通道電生理特性及其對細胞生長的影響；③．K C a 3 ．1 通道阻斷劑抑制人子宮內(nèi)膜癌H E C 一卜A 細胞裸鼠移植瘤生長的研究。第一部分K C a 3 ．1 通道在子宮內(nèi)膜癌組織中表達目的檢測人的正常子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌組織中K C a 3 ．1 通道

5、的表達，研究它與子宮內(nèi)膜癌的關系。方法應用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應( R T —P C R ) 、R e a l —T i m eP C R 檢測正常子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌組織中K C a 3 ．1 通道m(xù) R N A 的表達，W e s t e r nb l o t 檢測正常子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌組織中K C a 3 ．1 通道蛋白的表達。結(jié)果1 3 例正常子宮內(nèi)膜標本組織中1 2 例K C a 3 ．1m R N A 弱表達或不表達僅有l(wèi) 例

6、中等表達；而2 5 例子宮內(nèi)膜癌標本組織幾乎都表達K C a 3 ．1m R N A ( R T - P C R的結(jié)果和R e a l - T i m eP C R 結(jié)果基本一致) ，子宮內(nèi)膜癌組織和正常子宮內(nèi)膜組織K c a 3 ．1m R N A 表達差異具有統(tǒng)計學意義( P < O ．0 1 ) ：1 3 例正常子宮內(nèi)膜標本組織中1 1 例弱表達或不表達K C a 3 ．1 蛋白僅有2 例中等表達；而2 5 例子宮內(nèi)膜癌標本