fkbp12.6過表達(dá)對心力衰竭心室肌細(xì)胞收縮功能及離子通道電流的影響

1、中山大學(xué)博士后研究工作報告X1 0 ；j 5 9 7 0F K B P l 2 ．6 過表達(dá)對心力衰竭心室肌細(xì)胞收縮功能及離子通道電流的影響T h e E f f e c t so f F K B P l 2 ．6 O V e r e x p r e s s i o n o n C o n t r a c t i l i t ya n dI o n i c C h a n n e l C u r r e n t o f V e n t

2、r i c u l a r M y o c y t e si nR a t s w i t hH e a r t F a i l u r e博士后：李德流動站名：臨床醫(yī)學(xué)博士后流動站二級學(xué)科：內(nèi)科學(xué)( 心血管病)合作導(dǎo)師：伍衛(wèi)教授2 0 0 7 年1 月中山大學(xué)博士后研究- [ 作報告F K B P l 2 ．6 過表達(dá)對心力衰竭心室肌細(xì)胞收縮功能及離子通道電流的影響摘要研究背景：近年來研究發(fā)現(xiàn)，心力衰竭時心室肌細(xì)胞肌漿網(wǎng)( s a r

3、 e o p l a s m i er e t i c u l u m ，S R ) 鈣( C a ”) 釋放通道的穩(wěn)定性受到破壞，引起S R 明顯的舒張期C a 2 +滲漏。舒張期C a 2 + 滲漏主要導(dǎo)致兩個嚴(yán)重的后果：一是S RC a 2 + 負(fù)荷減少，以致于收縮期S R C a _ ”釋放減少，導(dǎo)致收縮功能障礙；二是舒張期C a 2 + 異常釋放，激活l N 虻。，導(dǎo)致心肌細(xì)胞復(fù)極異常，從而產(chǎn)生后除極并誘發(fā)室性心律失常，甚至發(fā)

4、生猝死。心力衰竭時心室肌細(xì)胞S RC a 2 + 釋放通道的穩(wěn)定性受到破壞的原因主要是F K 5 0 6 結(jié)合蛋白1 2 ．6 ( F K 5 0 6 b i n d i n g p r o t e i n l 2 ．6 ，F(xiàn) K B P l 2 ．6 ) 與蘭尼受體( r y a n o d i n e r e c e p t o r2 ，I 時R 2 )結(jié)合力降低。心力衰竭時交感神經(jīng)張力長期增高，通過c A M P 依賴蛋白激酶A

5、途徑使R y R 2 高度磷酸化，可導(dǎo)致F K B P l 2 ．6 與R y R 2 結(jié)合力降低。R e i k e n 等發(fā)現(xiàn)B 受體阻滯劑治療可逆轉(zhuǎn)狗心力衰竭心室肌細(xì)胞R y R 2 的結(jié)構(gòu)和功能障礙，增強(qiáng)F K B P l 2 ．6 與R y R 2結(jié)合力，進(jìn)一步闡明了B 受體阻滯劑治療心力衰竭的分子機(jī)制。P r e s t l e 和L o u g h r e y等發(fā)現(xiàn)，上調(diào)兔和大鼠心肌細(xì)胞中F K B P l 2 ．6 的表

6、達(dá)可防止舒張期c a 2 + 滲漏，改善興奮．收縮偶聯(lián)，促進(jìn)心肌細(xì)胞收縮。上述研究表明，F(xiàn) K B P l 2 ．6 結(jié)合力降低導(dǎo)致的S R C a 2 +釋放通道門控功能障礙是心力衰竭時心肌收縮力降低及室性心律失常發(fā)生的共同機(jī)制，以F K B P l 2 ．6 為目標(biāo)的干預(yù)可能是心力衰竭和室性心律失常治療的一條新途徑。研究目的：本研究以心力衰竭和室性心律失常的共同機(jī)制一心室肌細(xì)胞C a 2 + 循環(huán)異常為切入點(diǎn)，以S RC a 2 +

7、 釋放通道穩(wěn)定蛋白F K B P l 2 ．6 為干預(yù)目標(biāo)，通過腺病毒介導(dǎo)F K B P l 2 ．6 過表達(dá)，探討F K B P l 2 ．6 過表達(dá)對心力衰竭心室肌細(xì)胞收縮功能及離子通道電流的影響，為心力衰竭和室性心律失常的防治探索新的途徑。研究方法：①重組腺病毒載體A d ．F K B P l 2 ．6 ．G F P 的構(gòu)建：將平端化的F K B P l 2 ．6片段連接到穿梭質(zhì)粒p A d T r a c k ．C M V 構(gòu)建

8、重組穿梭質(zhì)粒p A d T r a c k ／F K B P l 2 ．6 ；采用電穿孔法將線性化p A d T r a c k ／F K B P l 2 ．6 轉(zhuǎn)化A d E a s i e r - 1 細(xì)菌，產(chǎn)生重組腺病毒質(zhì)粒p A d E a s y ／F K B P l 2 ．6 ；采用脂質(zhì)體介導(dǎo)法用線性化p A d E a s y ／F K B P l 2 ．6 轉(zhuǎn)染H E K 2 9 3細(xì)胞，從病變的H E K 2 9 3