enterobactersp.ly402生物降解多氯聯(lián)苯的產(chǎn)物及相關(guān)基因分析

1、大連理工大學(xué)碩士學(xué)位論文Enterobacter sp.LY402生物降解多氯聯(lián)苯的產(chǎn)物及相關(guān)基因分析姓名：鄭藹萍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化工指導(dǎo)教師：賈凌云20071221E n t e r o b a c t e rs p ．L Y 4 0 2 害物降解多氯聯(lián)葷的產(chǎn)物及相關(guān)基因分析M e t a b o l i t e sa n d g e n e s o f E n t e r o b a c t e r s p ．L Y 4

2、 0 2 r e l a t e dw i t hp o l y c h l o r i n a t e d b i p h e n y l sb i o d e g r a d a t i o nA b s t r a c tP o l y c h l o r i n a t e d b i p h e n y l s ( P C B s ) a r e 0 1 1 eo f t h e i m p o r t e r o r g a

3、 n i c c h l o r i m t e d p o l l u t a n t si n t h e e n v i r o n m e n t d u e t o t h e p h y s i c a 】a n d c h e m i c a l s t a b i l i t y a n d r e c a l c i t r a n t t ob i o d e g r a d a f i o n ．A s t r a

4、 i n L Y 4 0 2 w h i c h c o u l d e f 矗c i e n d y d e g r a d e h i g l l l yc h l o r i 塒t e d a n dc o p l a n a r P C B s w a s i s o l a t e df r o ms e l lc o n t a m i n a t e d a n dc l a s s i f i e da sE n t e

5、 r o b a c t e r s D ．．I nt h i ss t u d y , t h em e t a b o l i t e sf r o mp o l y c h l o r i n a t e db i p h e n y l sb i o d e g r a d a t i o nb yE n t e r o b a e t e rs p ．L Y 4 0 2 a r ei d e n t i f i e d , a

6、 n dt h eP C B s - d e g r a d i n gg e n e s 啪i s o l a t e d ．E x p c r h n e n t a l r e s u l t s 黜a sf o i l o w s ：( 1 ) 7 如o u g b G C - M S a n d G C - E C D a n a l y s i s ，c h l u r o b e n z o a t e s a 磚i d

7、e n t i f i e d 嬲m e t a b o l i t e s o fP C B s - d e g r a d i n gb yE n t e r o b a c t e rs p ．s t r a i nL Y 4 0 2 ．S i n g l eP C B c o n g e n e r s2 ，2 ’a n d 2 ，3 - d i c h l o r i n a t e d b i p h e n y l s a

8、 他t r a n s f o r m e d t o 2 - c h l o r o b e n z o a m a n d2 ，3 - d i c h l o r o b e n z o a t e ，r e s p e c t i v e l y ．P C B sm i x t u r e A r o c l o r 1 2 4 2 i s t r a n s f o r m e dt o a tl e a s tc i g b

9、tt y p e s o fc h l o r o b e n z o a t e s ，i ∞h d i n gt w o t y p e s o fm o n o c h l o r o b e n z o a t e s , f o u r t y p e s o fd i c h l o r o b e n z o a t e s a n dt w o t y p e s o f t l l l l m o w n t r i

10、c h l o r o b e n z o a t e s ．( 2 ) m r e l e a s e o fc h l o r i d e i nt h e c 4 ) u r 辯o f2 , 2 ’- d i c h l o r o b i p h e n y l d e g r a d a t i o nw a so b s e r v e d b y u s i n g t h em o d i f i e d H N 0 3

11、 - A g N 0 3 m e t h o d ．( 3 ) T h ed e g r a d a t i o no f s e v e n t y p e so f m o n o - ／d i - c h l o r o b e n z o a t e s ( 2 p g ／m le a c h ) m i x t m 屯b yE n t e r o b a c t e rs p ．L Y 4 0 2s h o w st h a

12、t , t h es t r a i nh a s t h ea b i l i t y t od e g r a d e c h l o r o b e n z o a t e ss u b s t i t u t e d a tc e r t a i np o s i t i o n ．3 - c h l o r o b e n z o a t ei sd e g r a d e d1 0 0 ％i n t w od a y s ，

13、a sw e l la s2 - ,4 一，a n d3 , 5 - c h l o r o b e n z o a t e sa r e d e g r a d e d3 4 ％，1 8 ％a n d1 2 ．3 ％i ns e v e n d a y s ，r e s p e c t i v e l y ．( 4 ) mp l a s m i dp u r i f i c a t i o na n d e l e e t r o p

14、 h o r e s i sr e s u l t s s h o wt h a tE n t e r o b a c t e rs p ．L Y 4 0 2c o n t a i n s a2 0 k bp l a s m i d , n a m e dp L Y Z A 0 2 ．T h ep l a s m i dd e l e t i o na n d t r a n s f o r m a t i ∞e x p e r i m

15、 e n t s i n d i c a t et h eg e n e so f p l u s m i d a r e r e l a t e dt oP C B - d e g r a d a f i o n a b i l i t y o f L Y 4 0 2 ．( 5 ) A c c o r d i n g t og e n e h o m o l o g , P C B s - d e g r a d a t i o n

16、g e n ep r i m e r s a r ed e s i g n e d ．m g e n e s啪a m p l i f i e d b yP C R u s i n gp L Y Z 4 0 2 t e m p l a t e ．N e a r l yc o m p l e t e 勸g e n e c l u s t e ra b o u tll k bi so b t 日j n e dH o m o l o g o u

17、 s a n a l y s i ss h o w st h a tt h eg e n eo r g a n i z a t i o na n dg e n e ∞q 1 撇o f b p hg e n ec l u s t e ra 他a l m o s tc o m p l e t e l yt h es a m ew i t h t h a to f B u r k h o l d e r i a x e n o v o r a