多氯聯(lián)苯(PCBs)降解菌的篩選、鑒定及降解特性的初步研究.pdf

1、目前，環(huán)境污染問題已成為一個國際性的重大問題，日益受到各國政府和學(xué)者的關(guān)注。芳香族化合物對環(huán)境造成的長期污染一直是人們關(guān)注的焦點，近年來更是呈急速上升趨勢，對農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和人們的身體健康構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅。利用物理、化學(xué)及各種綜合方法對芳香族化合物的污染進(jìn)行治理雖然有一定效果，但是這些方法普遍都存在成本高、降解不徹底以及易造成二次污染等問題。而微生物降解具有成本低、效果好且無二次污染等優(yōu)點，成為目前最有前景的環(huán)境污染的治理方法。
　　

2、 本文對從不同土壤分離得出的相關(guān)降解菌株，比較不同菌株降解效率，在對主要菌株相關(guān)生物學(xué)特性進(jìn)行研究的基礎(chǔ)上，利用分子生物學(xué)方法，對其分類地位進(jìn)行了鑒定。主要結(jié)果如下：
　　 1.聯(lián)苯降解菌株篩選：以從浙江臺州土樣中分離篩選出10株菌株為篩選對象。通過在以聯(lián)苯為唯一碳源的基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基上富集馴化培養(yǎng)，結(jié)果顯示，分離自浙江臺州土樣中的10個菌株可以利用固定聯(lián)苯和聯(lián)苯氣體作為唯一碳源，由此說明，供試菌株對聯(lián)苯具有降解作用，根據(jù)在以聯(lián)苯為

3、唯一碳源的培養(yǎng)基上降解情況和在合成培養(yǎng)基上的生長曲線，菌株A1對聯(lián)苯降解效果最好。
　　 2.多氯聯(lián)苯降解菌株A1的生物學(xué)特性：菌落白色，圓形或近圓形，凸起，邊緣整齊，表面光滑，透明，該菌革蘭氏染色陰性，不產(chǎn)硫化氫，水解淀粉，MR、VP實驗顯陰性，分解檸檬酸鹽，不分解明膠；該菌株在含青霉素類、頭孢菌素類、慶大霉素、氯霉素耐藥的培養(yǎng)基上仍可以生長，具有很強的耐藥性；菌株A1在LB培養(yǎng)基中0-48小時內(nèi)生長速率比較高，生長情況比較好

4、，到48-96h基本處于穩(wěn)定或衰退期。菌株A1在合成培養(yǎng)基中在0-24小時內(nèi)生長速很度快，而且菌株在0-96小時內(nèi)都是增長期。
　　 3.菌株A1的分子鑒定：以菌株A1的DNA為模板，利用細(xì)菌通用引物(序列為27f-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG1492r-ACGGCTACCTTGTTACGACT)進(jìn)行PCR擴增，獲得1450～1500bp的片段，序列分析和遺傳進(jìn)化樹分析表明：菌株A1與Pandoraea norimb

5、ergensis親緣關(guān)系最近，序列同源性為100%。因此，該多氯聯(lián)苯降解菌株A1鑒定為Pandoraea norimbergensis。
　　 4.多氯聯(lián)苯降解菌株A1的降解特性：本文以聯(lián)苯作為唯一碳源，從影響降解率的條件入手，分別研究pH、溫度、底物濃度、裝液量和培養(yǎng)時間各個單因素對菌株降解多氯聯(lián)苯的效果的影響，得出pH=7，溫度30℃，初始底物濃度150mg/L，裝液量為250ml裝30ml，培養(yǎng)7天，菌株在聯(lián)苯培養(yǎng)基里的生