dna連接酶與dna聚合酶的比較ppt課件

1、DNA連接酶與DNA聚合酶的比較,DNA連接酶,DNA聚合酶,催化兩個脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵,不需要模板,需要DNA的一條鏈為模板,游離的DNA片段,單個的脫氧核苷酸,形成完整的DNA分子,形成DNA的一條鏈,基因工程,DNA復(fù)制,相同點,不同點,模板,作用對象,作用結(jié)果,用途,PCR技術(shù)與DNA復(fù)制的比較,DNA復(fù)制,PCR技術(shù),解旋酶催化,DNA在高溫作用下變性解旋,細胞內(nèi)（主要在細胞核內(nèi)）,細胞外（主要在PCR擴增儀

2、內(nèi)）,DNA解旋酶、普通的DNA聚合酶等,耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）,細胞內(nèi)溫和條件,需控制溫度，在較高溫度下進行,區(qū)別,解旋方式,場所,酶,溫度條件,合成的對象,DNA分子,DNA片段或基因,聯(lián)系,①模板：均需要脫氧核苷酸鏈作為模板進行物質(zhì)合成②原料：均為四種脫氧核苷酸③酶：均需要DNA聚合酶進行催化④引物：均需要引物，使DNA聚合酶從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸,基因工程的概念,基因工程的別名,DNA重組技術(shù)

3、,操作環(huán)境,生物體外,操作對象,基因,操作水平,DNA分子水平,基本過程,剪切→拼接→導(dǎo)入→表達,結(jié)果,人類需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品,目的基因?qū)胧荏w細胞,微生物細胞,農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法,顯微注射法,常用方法,生物種類,體細胞或受精卵,將含有目的基因的表達載體提純→取受精卵→顯微注射→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動物,以農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法為例：將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上→農(nóng)桿菌→導(dǎo)入

4、植物細胞→整合到受體細胞的DNA上→表達,轉(zhuǎn)化過程,植物細胞,動物細胞,Ca2+處理法,受體細胞,受精卵,原核細胞,Ca2+處理細胞→感受態(tài)細胞→重組表達載體與感受態(tài)細胞混合→感受態(tài)細胞吸收DNA分子,目的基因的檢測與鑒定,方 法,檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體DNA分子上是否插入了目的基因,采用DNA分子雜交技術(shù),檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，采用分子雜交技術(shù),分子水平檢測,導(dǎo)入DNA 分子,轉(zhuǎn)錄,翻譯,除了分子檢測