環(huán)境中有機污染物與腫瘤相關(guān)DNA間相互作用的研究.pdf

1、環(huán)境中的有機污染物來源廣泛,種類繁雜,對人體健康造成威脅,尤其是對基因腫瘤相關(guān)疾病的高風(fēng)險性。本文以環(huán)境中三類主要的有機污染物為研究對象,為達到揭示有機污染物分子與人類腫瘤相關(guān)DNA作用機制的研究目的,采用紫外光譜、熒光光譜、圓二色譜、電噴霧質(zhì)譜等分析測試技術(shù)和計算機模擬分子對接實驗,系統(tǒng)地研究污染物分子與不同DNA之間的相互作用。尋找污染物分子特異性作用的基因靶標(biāo),并確定不同污染物分子對特定DNA的親合能力與作用方式,特別是對DNA空

2、間結(jié)構(gòu)的影響,從而在分子水平上探討有機污染物分子的環(huán)境影響與腫瘤疾病的發(fā)生發(fā)展間的內(nèi)在聯(lián)系,為環(huán)境中外源性物質(zhì)的風(fēng)險評估和腫瘤疾病的預(yù)警預(yù)測奠定基礎(chǔ)。
　　 本文選用有機磷農(nóng)藥(DDVP、DIM、OME)、有機氯農(nóng)藥(DDT、DDE、DDD)、環(huán)境激素吩嗪-1-羧酸(PCA)和環(huán)丙沙星(CIP)這三類環(huán)境中的有機污染物作為對象,研究它們分別與人類端粒末端重復(fù)序列、抑癌基因p53和癌基因C-myc啟動子區(qū)DNA之間的相互作用。主要

3、結(jié)果如下:(1)紫外熒光滴定實驗結(jié)果表明有機磷農(nóng)藥與端粒DNA之間主要是以嵌插方式結(jié)合,有機磷農(nóng)藥分子的加入會造成端粒DNA的熔化溫度下降。三種有機磷農(nóng)藥與端粒DNA作用的表觀結(jié)合常數(shù)大小順序依次為:DIM>DDVP>OME。(2)有機氯農(nóng)藥與p53 DNA和C-myc DNA之間也以嵌插作用為主,同時有機氯農(nóng)藥的加入也會減低DNA的熔化溫度。圓二色實驗證實不同有機氯農(nóng)藥對兩種DNA二級空間結(jié)構(gòu)有不同程度的影響。其中,DDD與p53 D

4、NA；DDT與C-myc DNA之間作用最為明顯,作用力較強。(3)紫外、熒光、圓二色譜實驗確定了CIP、PCA與端粒DNA之間的作用力、作用方式以及對DNA空間結(jié)構(gòu)的影響情況。選取CIP為例,結(jié)合質(zhì)譜實驗表明CIP與端粒DNA之間主要以1+1的結(jié)合模式為主。計算機模擬分子對接實驗表明CIP與DNA片段的結(jié)合位點位于DNA的小溝位置且對GC堿基對有一定的偏好性。CIP與端粒DNA的作用方式是以插入方式與DNA小溝區(qū)結(jié)合并伴隨氫鍵和范德華